Catálogo de publicaciones

El tema del trabajo de Tesis encomendado al Ldo. Carlos René Portal consistía en el estudio de la síntesis y propiedades de compuestos heterocíclicos. Como método de síntesis se empleó una reacción estudiada en nuestros laboratorios, por medio de la cual resultaba posible la ciclación de p-nitrofenilhidrazonas de aldehídos y cetonas aromáticas con formación de heterociclos derivados del indazol y del pirrazol. Dentro de ellos tenia especial interés el empleo de compuestos carbonílicos asimétricamente sustituidos, lo cual debía conducir a la formación de sustancias isómeras. Efectivamente, por empleo de las p-nitrofenilhidrazonas de la m-cloro, m-bromo, m-iodo, m-metil y m-metoxi acetofenonas, se obtuvieron, en todos los casos, dos indazoles isómeros que fueron separados cromatográficamente. La misma síntesis se aplicó también a diversas acetofenonas orto-sustituídas, obteniéndose de ellas los correspondientes l-(p-nitrofenil)-3-metil-indazoles 4-sustituídos. Como ejemplo de compuestos carbonílicos disustituídos se emplearon con idéntico fin, el 5-acetil-indano y la 3,4-dimetil-acetofenona. De cada uno de ellos se obtuvieron, como en el caso de las acetofenonas m-sustituídas, dos isómeros, a los que, luego de separarlos, se les eliminó el sustituyente en posición l mediante reacciones degradativas. Dos diferentes benzofenonas fueron utilizadas, dando los resultados esperados. Posteriormente, la misma reacción se aplicó a diversos compuestos heterocíclicos acilados pues ello ofrecía la posibilidad de sintetizar sistemas aromáticos novedosos. Así se obtuvieron por ciclación del 2-aceti1-dibenzofurano, 2-acetildibenzotiofeno y 4-acetil-dibenzotiofeno, el 1-(p-nitrofenil)-3-metil-benzo(b)furo(3,2-f)indazol, el l-(p-nitrofenil)-3-metil-benzo(b)furo(2,3-g)indazol, el 1-(p-nitrofenil)-3-metilbenzo(b)tieno(3,2-f)indazol y el 1-(p-nitrofenil)-3-metilbenzo(b)tieno(2,3-e)indazol respectivamente. Dos de estos compuestos fueron luego reducidos a los amino-derivados correspondientes y después, de ellos se eliminó por oxidación el resto p-aminofenilo, obteniéndose el l-H-3-metil-benzo(b)furo(3,2-f)indazol y el l-H-3-metil-benzo(b)furo(2,3-g)indazol. Durante el desarrollo de este trabajo se sintetizaron 44 sustancias no descriptas anteriormente en la literatura. Las estructuras de los compuestos obtenidos se determinaron en base a los espectros R.M.N. de los mismos, técnica que resultó de utilidad sobretodo en los casos donde las posibilidades de ciclación eran más de una. La correlación de los mencionados espectros, junto con los de otras sustancias preparadas previamente, permitió observar ciertas regularidades en los mismos, como ser el valor del desplazamiento químico de los protones aromáticos del indazol en función del sustituyente. Por otra parte, por el mismo método, se pudo establecer la falta de coplanaridad entre el resto l-p-nitrofenilo y el anillo indazólico, cuando éste está sustituído en la posición 7, relacionando además las variaciones obtenidas en los espectros con el volumen del sustituyente. La no coplanaridad en estos casos fue confirmada mediante la interpretación de los espectros ultravioleta de los l-(p-nitrofenil)-3-metil-indazoles sintetizados. Finalmente, cabe mencionar, que en la Tesis del Ldo. Carlos rené Portal, se discuten, en razón de los nuevos resultados, ciertos aspectos del mecanismo de la reacción estudiada.

El desarrollo de nuevos principios activos para el tratamiento de enfermedades tales como el cáncer es un tema de interés continuo debido a la agresividad y/o a la rápida resistencia a fármacos que presentan estas enfermedades. El uso de un heterociclo no natural como base nitrogenada es una de las aproximaciones usadas para obtener novedosos análogos de nucleósidos. Además, cabe destacar que la presencia de más de un anillo heterocíclico puede potenciar la actividad de los compuestos independientemente de su acción terapéutica. En el presente trabajo de tesis se sintetizaron y caracterizaron compuestos mono- y di-heterocíclicos derivados de D-ribofuranosa, donde la nucleobase consistió en heterociclos de cinco miembros, unidos por un espaciador. Para evaluar la influencia del tipo y cantidad de heteroátomos se sintetizaron 1,2,3-triazoles, 1,2,4-oxadiazoles, isoxazoles e isoxazolinas utilizando tanto reacciones de cicloadición 1,3-dipolares como de condensación intramolecular. A partir de los derivados mono-heterocíclicos, fue posible obtener derivados di-heterocíclicos por funcionalización del carbono terminal del hidrato de carbono con anillos tales como 1,2,4-triazol, 1,3,4-tiadiazol o 1,2,4-triazolil-3-tiona. Con el objetivo de analizar la influencia de los grupos protectores en las posiciones dos y tres de la D-ribosa se sintetizaron compuestos con grupos isopropilidén y ciclopentilidén. Estos últimos presentaron la mayor actividad antiproliferativa. Los compuestos di-heterocíclicos así como también intermediarios y precursores fueron evaluados como agentes antitumorales contra diferentes líneas celulares humanas. El compuesto más activo presentó una CI50 de 4,5 M contra la línea celular de cáncer de colon WiDr.

La síntesis de desoxiazúcares es un tema de gran interés no sólo por ser éstos componentes de productos naturales, sino por considerarlos como herramientas para estudios relacionados con la actividad de enzimas. La bibliografía es extensa en desoxiazúcares piranósicos, que han sido utilizados para determinar la especificidad de glicosidasas y glicosiltransferasas, y por su potencial como inhibidores de esas enzimas. Los monosacáridos más comunes como glucosa, galactosa y manosa se encuentran sólo en configuración piranósica en células de mamíferos, de ahí el interés por la síntesis de desoxiazúcares en esa configuración. Sin embargo en las últimas décadas se ha encontrado que la β-D-galactofuranosa es constituyente de glicoconjugados muy importantes de la superficie de microorganismos patógenos, entre ellos Trypanosoma cruzi y Mycobacterium tuberculosis. Las enzimas responsables del metabolismo de la galactofuranosa, como las galactofuranosidasas y las galactofuranosiltransferasas son un buen blanco para el diseño de inhibidores que afectarian la viabilidad de los microorganismos sin afectar al mamífero infectado que no tiene glicoconjugados con galactofuranosa. En este trabajo de tesis de doctorado se han sintetizado por primera vez β-D-galactofuranósidos desoxigenados en las posiciones 2, 3 ó 6, y se ha utilizado como compuesto de partida a la D-galactono-1,4-lactona, que es un producto comercial, buen precursor del anillo furanósico y da lugar a sustituciones selectivas. Se han caracterizado los desoxiazúcares y sus precursores y se han utilizado los β-D-glicósidos para investigar su capacidad de actuar como sustratos de una exo β-D-galactofuranosidasa de Penicillium fellutanum. Esta enzima es un buen modelo pues es secretada al medio por un microorganismo no patógeno, y la producción y purificación de la enzima se han optimizado en nuestro laboratorio. Se ha determinado en este trabajo de tesis que ninguno de los derivados desoxigenados es sustrato de la enzima, o sea que los hidroxilos de C-2, C-3 y C-6 de la D-galactofuranosa son importantes para la interacción con el sitio activo.

Se han estudiado diversas vías potenciales de preparación de las diamidas disimétricas del ácido orto-ftálico. El primer intento realizado en este sentido fue la fusión de los ácidos ftalámicos con aminas. En ciertas circunstancias los resultados fueron los esperados pero debido a restricciones estructurales esta técnica no es de aplicación general a todos los casos y por ello se exploraron otras vías posibles. Aplicando este método se prepararon la N-(p-tolil)-N'-bencil-ftalamida y la N-bencil-N'-fenil-ftalamida. El segundo intento realizado con el mismo propósito fue el tratamiento de los ésteres metílicos de los ácidos ftalámicos con los derivados sodados de las aminas a introducir en el segundo grupo amidógeno. Esta reacción puede considerarse, en principio, aplicable a la síntesis de ftalamidas N,N' sustituidas; mediante ella se prepararon la N,N'-bis(ptolil)-ftalamida, la N,N'-difenil—ftalamida y la N-(p-tolil)-N‘-fenil-ftalamida, a partir de los dos ésteres posibles. La secuencia de reacciones que cumple con el propósito perseguido en este trabajo es la que emplea las isoimidas como intermediarios. El reemplazo en su obtención del cloruro de acetilo y posterior tratamiento con hidróxido de potasio, por el anhídrido trifluoracético en presencia de trietilamina, mejoró aun más las condiciones de síntesis de las diamidas de estructura disimétrica deseadas. Aplicando este método se prepararon los siguientes compuestos: N-fenil-ftalamida, N-metil—N'-fenil-ftalamida, N-etil-N'-fenil-ftalamida, N-(n-propil)-N'-fenil-ftalamida, N-(n-butil)-N'-fenil-ftalamida, N-isopropil-N'-fenil-ftalamida, N-terbutil-N'-fenil-ftalamida, N-ciclohexil-N'-fenil-ftalamida, N-bencil-N'-fenil-ftalamida, N,N'-difenil-ftalamida, N-(o-tolil)-N'-fenil-ftalamida, N-(m-tolil)-N'-fenil-ftalamida, N-(p-tolil)-N'-fenil-ftalamida, N-(o-hidroxifenil)-N'-fenil-ftalamida, N-(m-hidroxifenil)-N'-fenil- ftalamida, N-(p-hidroxifenil)-N'-fenil-ftalamida, N,N'-dimetil-N’-fenil-ftalamida, N,N-dietil-N'-fenil-ftalamida, N,N'-dibencil-N'-fenil-ftalamida y N-piperidín-N'-fenil-ftalamida, que son especies químicas nuevas. Se realizaron también los espectros infrarrojo y ultravioleta de estas sustancias; utilizándose los primeros en relación con la identificación de los productos de síntesis y pureza de los mismos. Los espectros ultravioleta tuvieron menor interés porque no se observó en ellos ninguna correlación estructural con los compuestos.

Las dihidropiranonas quirales son precursores útiles de productos naturales y moléculas asimétricas biológicamente activas. El sistema carbonilo α,β-insaturado les confiere a las dihidropiranonas una gran versatilidad para diversos tipos de transformaciones químicas. Además, la presencia de estereocentros en sus moléculas les permite el control de la enantioselectividad en una variedad de reacciones. A partir de estas premisas, se planteó como objetivo general de esta Tesis el estudio de la reactividad del sistema carbonílico α,β-insaturado de dihidropiranonas derivadas de azúcares y la influencia de los estereocentros de las mismas en el curso estereoquímico de las reacciones aplicadas. Además de cumplimentarse este objetivo general, se alcanzaron los siguientes objetivos específicos: l) Mediante una secuencia de reacciones simples y estereocontroladas, se obtuvo un glicósido de la D-epi-purpurosamina, un aminotetradesoxiazúcar del tipo encontrado en antibióticos aminoglicosídicos. Se utilizó como compuesto de partida quiral una dihidropiranona derivada de D-galactosa. 2) Se construyeron sistemas carbociclicos mediante adiciones de Diels-Alder de dienos a la mencionada dihidropiranona y a otra derivada de la L-fucosa. Estos carbociclos, generados bajo estereocontrol, eran ópticamente puros y presentaban numerosas funcionalidades, por lo cual constituían intermediarios útiles para posteriores transformaciones sintéticas. 3) La dihidropiranona derivada de D-galactosa presentaba una reactividad limitada como dienófilo. Por eso, se prepararon dihidropiranonas derivadas de pentosas. Se estableció la configuración absoluta y la pureza óptica de estos compuestos portadores de un único estereocentro. Asimismo, se prepararon dihidropiranonas enantioméricamente puras por glicosidación de glicales con alcoholes quirales. 4) Las 2-alcoxi-2H-pirán-3(6H)-onas derivadas de pentosas resultaron excelentes dienófilos, tanto con butadienos como con dienos cíclicos. Se optimizaron las condiciones de las reacciones de cicloadición y se obtuvieron una variedad de carbociclos bajo estereocontrol. 5) Se determinaron las estructuras de los carbociclos obtenidos mediante técnicas de RMN, y se confirmaron las mismas por conversión de los cicloaductos en policiclos. Estos últimos resultan intermediarios útiles en la síntesis de una variedad de moléculas quirales.

En los últimos años se ha visto un gran interés en las comunidades de sistemas de tiempo real y embebidos en el uso de de lenguajes orientados a objetos tipo Java. Los motivos de este interés se deben en parte a que este tipo de tecnologías facilitan la encapsulación de abstracciones y la comunicación mediante interfaces bien de_nidas. Otro aspecto importante es la gran comunidad de desarrolladores y la cantidad de bibliotecas y herramientas de desarrollo disponible. Sin embargo, para poder adoptar lenguajes de este tipo en ambientes embebidos y de tiempo real hay que solucionar al menos dos grandes problemas: la impredictibilidad temporal dada por las interrupciones relacionadas con la colección de objetos (garbage collector) y poder analizar requerimientos de memoria de las aplicaciones. Ha habido un número importante de trabajos donde se intenta atacar el problema de impredictibilidad temporal de los administradores de memoria automáticos desde distintos enfoques tales como garbage collectors con ciertas garantías temporales o directamente utilizando modelos alternativos de administración de memoria. Sin embargo, no ha habido muchos avances con respecto al estudio cuantitativo de requisitos de memoria. En esta tesis abordamos el problema de predecir automáticamente certi_cados de utilización y requisitos de memoria. Para ellos presentamos primero una técnica que permite obtener expresiones paramétricas de las solicitudes de memoria dinámica sin considerar ningún mecanismo de colección de objetos. Luego proponemos un esquema alternativo de administración de memoria junto con una técnica que permite la transformación de código Java convencional en otro con la misma funcionalidad pero adaptado para la nueva política de manejo de la memoria. Bajo este nuevo esquema, proponemos una técnica que permite determinar de manera paramétrica la cantidad de memoria necesaria para correr el programa o parte de él. Todas estas técnicas fueron implementadas en un prototipo que nos permitió analizar automaticamente un conjunto interesante de aplicaciones siendo los resultados iniciales bastante promisorios.

1) Se hizo una revisión de las publicaciones sobre síntesis de derivados acetilados y benzoilados de D-fructosa y L-sorbosa. 2) Se efectuó un resumen sobre los trabajos realizados acerca de la formación de compuestos imidazólicos y piracínicos por acción del amoníaco sobre hidratos de carbono. 3) Se realizó una revisión sobre formación de amino compuestos sobre cetosas. 4) Se describen los estudios más importantes sobre la formación de sustancias poliméricas coloreadas a partir de hidratos de carbono y amino compuestos. 5) Se sintetizaron la 1,3,4,5-tetra—O-benzoil-β-D—fructopiranosa (15), la 1,3,4,5,6-penta-O-acetil-ceto-D-fructosa (4) y la 1,3,4,5,6—penta-O-acetil-ceto-L-sorbosa (29), según las técnicas descriptas en la literatura. 6) Se llevó a cabo la síntesis de la 1,3,5-tri-O-benzoil-α-L-sorbopiranosa (262) la que se obtuvo con un rendimiento del 23,4%. Se demostró su estructura mediante métodos físicos y químicos. Esta sustancia se transformó por posterior benzoilación en la 1,3,4,5-tetra-O-benzoil-α-L-sorbopiranosa (35) conocida, lo cual demostró la configuración del carbono anomérico. Sometiendo este tribenzoato (262) a una metilación con diazometano en diclorometano se obtuvo la 1,3,5-tri-O-benzoil-4-O-metil-α-L—sorbopiranosa (264), la cual se desbenzoiló con metóxido de sodio obteniéndose la 4-O-metil-L-sorbosa (265). Cuando el compuesto 262 se trató con ioduro de metilo-óxido de plata se aisló el metil 1,3,5-tri-O-benzoil-4-O-metil-α-L-sorbopiranósido (266). Esta sustancia se desbenzoiló con metóxido de sodio en metanol, obteniéndose el metil 4-0-metil-α-L-sorbopiranósido (267) que por hidrólisis dio la 4-O-metil-L-sorbosa. Estas experiencias demostraron que los grupos hidroxilo libres del compuesto 262 eran los de los C-2 y C-4. El espectro de R.M.N. de 262 mostró un valor alto (10 Hz) de las constantes de acoplamiento lo cual indicó la existencia de una conformación 1C (L). 7) Se llevó a cabo la síntesis de dos hexabenzoatos de sorbosa no descriptos en la literatura y de la 1,2,3,4,5-penta-O-benzoil-α-L-sorbopiranosa (268) cuya estructura y conformación fueron determinadas por espectros de R.M.N. 8) Se estudió la amonolisis de la 1,3,4,5,6-penta-O-acetil-ceto-L-sorbosa (29) con amoníaco acuoso al 24% obteniéndose la 2-(L-xilo-tetrahidroxibutil)-6—(L—treo-2,3,4-trihidroxibutil)piracina (269; 11%)y la 2,5-bis-(L-xilo-tetrahidroxibutil)piracina (270; 0,4%). Mediante cromatografía en papel y por comparación con muestras auténticas se identificaron: 4(5)-(L-xilo-tetrahidroxibutil)imidazol (271); 4(5)-(2,3,4-trihidroxibutil)imidazol (74); 4(5)-(2,3-dihidroxipropil)imidazol (75); 4(5)(2-hidroxietil)imidazol (73); 4(5)-hidroximetilimidazol (63) y 4(5)-metilimidazol (54). En esta reacción se aisló también un 20% de melanoidinas expresado sobre la base del azúcar libre involucrado en la reacción. La estructura de la piracina 269 se demostró estableciendo la ubicación de los sustituyentes en el anillo piracínico por oxidación con agua oxigenada y posterior preparación del éster metílico del ácido 2,6-piracindicarboxílico obtenido. El número y la ubicación de los grupos hidroxilo en las cadenas laterales se determinó por oxidación con periodato de sodio. Los espectros U.V. y de R.M.N. confirmaron la estructura propuesta. La estructura de la piracina 270 se determinó por oxidación con agua oxigenada y reconocimiento en cromatografía en papel del ácido 2,5-piracindicarboxílico y por espectros U.V. y de R.M.N. 9) Con el fin de verificar si se simplificaba el esquema de reacción se realizó la amonolisis del compuesto 29 con amoníaco acuosa e isopropanólico, ambos al 1%. Las reacciones resultaron igualmente complejas si bien se determinó una disminución en la formación de imidazoles y en el caso del amoníaco isopropanólico un aumento importante en la formación de melanoidinas. 10) Se realizó también la amonolisis de la 1,3,5-tri-O—benzoil-α-L-sorbopiranosa (262) con amoníaco isopropanólico al 5%, obteniéndose un 40% de melanoidinas junto con trazas de 4(5)-metilimidazol. El porcentaje elevado de benzoato de amonio aislado en la reacción indicó que en la molécula de 262 se produjeron rupturas aciloxi-carbono. 11) Se compararon las reacciones anteriores de amonolisis de los ésteres de sorbosa con las reacciones del amoníaco metanólico al 16% y acuoso al 24% sobre la L-sorbosa. Se comprobó que en ambos casos se produjo una disminución en la formación de melanoidinas y un retardo en la formación de imidazoles con respecto a la amonolisis de los ésteres. Cabe destacar que en medio acuoso se revelaron dos manchas ninhidrina positivas atribuíbles a amino azúcares. Las reacciones en cantidades preparativas de la L-sorbosa con amoníaco metanólico 16%, isopropanólico 5% y acuoso 24%, después de ocho días en contacto dieron un porcentaje de melanoidinas del 3,5%, 1% y 10% respectivamente, los que no variaron al cabo de varios meses. 12) Se llevaron a cabo las amonolisis de la l,3,4,5—tetra-O—benzoil-β-D-fructopiranosa (15) con amoníaco metanólico al 16% y de la 1,3,4,5,6-penta-O-acetil-ceto-D-fructosa (4) con amoníaco acuoso al 24%. En ambos casos se aislaron, la 2,5-bis-(D-arabino-tetrahidroxibutil)piracina (fructosacina, 103) y la 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-5-(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)piracina(desoxifructosacina, 109), ya descriptas por Kahn y colaboradores. Los espectros U.V. y de R.M.N. de estas piracinas confirmaron su estructura. En estas reacciones se aislaron además las melanoidinas producidas (25% y 20% respectivamente) y se reconocieron los imidazoles presentes (Fórmulas N° 64, 74, 75, 63 y 54). Se detectó glucosamina por cromatografía en papel. 13) Se compararon las amonolisis anteriores con las reacciones del amoníaco metanólico al 16% y aouoso al 24% sobre la D-fructosa. Se obtuvo también en este caso una disminución en la formación de melanoidinas y un retardo en la producción de imidazoles. Las reacciones en escala preparativa de la D-fructosa con amoníaco metanólico al 16% y acuoso al 24% despues de ocho días en contacto dieron 2,5% y 2,6% de melanoidinas respectivamente. 14) Paralelamente se realizaron ensayos preliminares acerca de la estructura de las melanoidinas que deberán ser encarados en escala preparativa y que permitieron postular la existencia de algunos elementos estructurales coincidentes con los propuestos anteriormente para este tipo de sustancias. 15) Se llevó a cabo una discusión e interpretación de los resultados obtenidos y se propusieron las reacciones que podrían conducir en nuestro caso a la formación de piracinas, imidazoles y melanoidinas.

Fil:Caballero, Gerardo Manuel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Xanthomonas campestris es un patógeno de plantas causando la putrefacción negra en las hojas de las crucíferas. Además, produce un polisacárido extracelular (EPS), de gran importancia industrial, llamado xantano. La estructura de su unidad repetitiva es ( Jansson, P. E. et al., 1975. Carbohydr. Res. 45: 274): (ver figura en el pdf). La biosíntesis in vitro de xantano ha sido estudiada en detalle en nuestro laboratorio (Ielpi et al., 1993. Bacteriol., 175:2490). Se ha determinado que ésta ocurre en al menos dos etapas. En la primera etapa, la unidad repetitiva se ensamba secuencialmente sobre un poliprenol pirofosfato. En una segunda etapa, las unidades repetitivas son polimerizadas y el EPS formado liberado en el medio de crecimiento. Se conoce que los genes involucrados en la biosíntesis del xantano, 12 genes, están agrupados en un segmento de ADN de 16 Kb ( Barrre et al., 1986.Int. Biol. Macromol, 8: 372) y parte de los genes involucrados en la transferencia de azúcares estan identificados (Vanderslice et al., 1990. Synergen, Inc., EEUU), pero no se realizó un estudio detallado de la caracterización de mutantes no productoras de xantano, como asi también, aún se desconoce la ubicación de los genes responsable del proceso de polimerización y exportación. En este trabajo de tesis, presentamos la caracterización de algunas mutantes defectuosas en la producción de EPS, en la cual, en dos de ellas, se realizó un estudio más detallado: X. campestris 8004:: Tn525 y 8004:: Tn570. La primera mutante falló en producir el pentasacárido, unidad repetitiva del xantano, y solamente tres azúcares fueron transferidos al prenil pirofosfato intermediario, esta unidad repetitiva truncada no obstante pudo ser polimerisada. El polímero truncado formado tiene la estructura de una celulosa sustituida alternadamente por residuos de manosa y tiene un potencial interés industrial. El transposón, responsable de la mutación, fue localizado dentro del gen gumk. Por lo tanto, este gene codificaría la glicosil transferasa IV, que cataliza la transferencia de ácido glucurónico al trisacárido manosil-celobiosa. La segunda mutante estudiada resultó ser capaz de sintetizar in vitro el lípido pentasacárido, unidad de repetitiva, con cualquiera de los tres dadores de azúcares utilizados: UDP-Glc, GDP-Man y UDP-GlcA, pero incapaz de polimerizar estas unidades. El Tn5, en la cepa N °70, fue localizado 15 bp "upstream" del sitio de iniciación del gen gumB (primer gen del grupo). Esto suguiere que gumB está involucrado en el proceso de polimerización. Un segundo aspecto desarrollado en este trabajo de tesis fue el efecto de los grupos no glicosídicos en el proceso de polimerización. Se demostró que los niveles más altos de polimerización, en el EPS producido por la cepa mutante N° 25, fueron obtenidos cuando 30 % de las unidades repetitivas truncadas se encontraban acetiladas. Por otra parte, el fosfoenolpiruvato (dador de los grupos piruvatos) se comportó, sobre este polímero, como un regulador positivo en las reacciones de polimerización. En la cepa silvestre solo se observó cierta inhibición en la reacción de polimerización con ambos dadores de grupos no glicosídicos estudiados. Es importante destacar que la unidad truncada que sintetiza la cepa N° 25 no posee grupos piruvatos en su estructura. Finalmente, estudios preliminares mostraron la obtención in vitro de glucanos β -( 1,2 ) lineales y cíclicos utilizando diferentes preparaciones de X. campestris. Algunos resultados preliminares suguieren un posible rol de estos glucanos en el proceso de infección.

En el transcurso de esta tesis se han propuesto y desarrollado distintas técnicas para aumentar, por un lado, la capacidad de almacenamiento de filtros a usar en correladores ópticos y por otro, la cantidad de procesos de reconocimiento que pueden realizarse en simultáneo. Básicamente las técnicas propuestas pueden dividirse en aquellas orientadas para sintetizar filtros sobre material fotográfico, es decir materiales en donde la función a representar viene codificada como variaciones de amplitud; y aquellas desarrolladas para implementar los filtros sobre moduladores sólo de fase. Se presentan dos métodos para generar filtros múltiples sobre película diapositiva color. En ambos el registro se lleva a cabo mediante el empleo de copiadoras digitales de alta resolución. El primero de ellos utiliza una apropiada combinación de colores del sistema RGB para almacenar diferentes partes de la información en canales independientes. El filtro así generado es utilizado en un correlador tipo Vander Lugt en el que se emplea una iluminación multiespectral. De esta manera es posible incrementar la cantidad de información a codificar en un filtro tradicional tantas veces como canales de color independientes se dispongan. El segundo método presentado se basó en la capacidad del material fotográfico para representar distintos niveles de gris. El método propuesto permite registrar directamente la función que representa la interferencia entre el haz objeto y la onda de referencia sin recurrir a los métodos binarios tradicionales para generar CGH, de este modo el filtro se comporta como un verdadero interferograma. Estos nuevos filtros poseen las mismas ventajas que tiene un holograma real por sobre el digital binario, como son la reconstrucción de tan sólo los órdenes 1,0 y —1 y la posibilidad de manejar libremente la orientación y frecuencia de la onda portadora. Así, en los filtros compuestos por varios hologramas es posible seleccionar la posición de la respuesta al impulso brindada por cada uno de ellos sin distorsiones ni pérdidas de la información. La segunda parte de la Tesis está orientada al diseño de filtros compuestos para ser utilizados en correladores en donde tanto la información de la escena de entrada como la correspondiente al filtro es representada en pantallas de TV de cristal líquido (LCD). Se estudian las configuraciones de polarización, para la luz incidente y emergente de las LCD, de modo que la utilizada para representar la escena module sólo la amplitud de la onda incidente y la correspondiente al filtro sólo la fase. Dadas estas características los filtros diseñados contienen información sólo de fase y se obtienen al registrar directamente los valores de fase de los objetos a reconocer en lugar de una codificación en amplitud de los mismos. Los mismos presentan la ventaja de no reproducir en su respuesta al impulso la imagen conjugada; por consiguiente al implementarlo en un correlador no se forma la señal de convolución y libera esa zona del plano de salida para procesar más información. Este nuevo diseño nos permite aumentar no sólo la capacidad de almacenamiento de los filtros sino la cantidad de identificaciones simultáneas que pueden llevarse a cabo.