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Fil:Affranchino, José Luis. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El presente trabajo de Tesis se basa en el estudio citogenético básico y evolutivo de especies de Heteroptera fitófagas de interés agroeconómico para nuestro país. Se analizó el complemento cromosómico y el desarrollo meiótico de las siguientes especies: Hypselonotus bitriangulifer bitriangulifer Berg (2n= 19/20= 16+2m+X0/16+2m+XX), Athaumastus haematicus (Stål, 1859), Leptoglossus impictus (Stål, 1859) y Phthia picta (Drury, 1770) (las tres especies poseen 2n= 21/22= 18+2m+X0, 18+2m+XX) (Coreidae); Largus fasciatus (Blanchard, 1843) y Largus rufipennis Laporte, 1832 (ambas con 2n= 13/14= 12+X0/12+XX) (Largidae); Lygaeus alboornatus Blanchard, 1852 (2n= 12= 10+XY/10+XX) (Lygaeidae sensu lato); Dysdercus albofasciatus Berg, 1878 (2n= 12= 10+neoXY/10+neoXX), Dysdercus chaquensis Freiberg, 1948, Dysdercus imitator Blöte, 1931 y Dysdercus ruficollis (Linnaeus, 1764) (las tres especies con 2n= 13/14= 12+X0/12+XX) (Pyrrhocoridae); Jadera haematoloma (Herrich-Schaeffer, 1847) y Jadera sanguinolenta (Fabricius, 1775) (ambas con 2n= 13/14= 10+2m+X0/10+2m+XX) (Rhopalidae). En este trabajo se han encontrado alteraciones numéricas y estructurales en las especies analizadas de las familias Coreidae, Largidae, Lygaeidae y Pyrrhocoridae. Teniendo en cuenta el número cromosómico diploide modal para Coreidae, en Hypselonotus bitriangulifer bitriangulifer se observó una fusión autosómica que trajo aparejado una reducción del número de pares de autosomas. Los resultados obtenidos en Lygaeus alboornatus (Lygaeidae) muestran que esta especie posee el número cromosómico diploide más bajo mencionado hasta el presente para la subfamilia Lygaeinae, el cual se habría originado a partir del complemento cromosómico diploide atávico a través de una fusión autosómica. En la población de Largus fasciatus (Largidae) se encontró un individuo portador de un cromosoma B, mientras que en una población de Dysdercus albofasciatus (Pyrrhocoridae) cuatro especímenes presentaron un cromosoma supernumerario, que por sus características se habría originado a partir de un autosoma. En una población de Largus rufipennis (Largidae) se encontró un individuo portador de una translocación recíproca desigual entre dos cromosomas no homólogos de tamaño mediano. Finalmente, se encontraron individuos con alteraciones en los cromosomas sexuales en especímenes de Jadera sanguinolenta y J. haematoloma, los que presentaron un polimorfismo cromosómicoen relación con el tamaño del cromosoma sexual. Con respecto a los sistemas cromosómicos de determinación del sexo en Heteroptera, se encontró un sistema sexual neo-XY en Dysdercus albofasciatus, que es original para el género, así como para la familia Pyrrhocoridae, y para Heteroptera en virtud de su origen.

En este trabajo de Tesis se estudiaron mediante citogenética clásica y molecular las nueve especies de escorpiones de la familia Buthidae descriptas para la Argentina, además de una especie aún no descripta. Se analizó el cariotipo, el desarrollo meiótico, la distribución de la heterocromatina constitutiva y la localización de las regiones organizadoras nucleolares y de repeticiones teloméricas. Todas las especies presentaron cromosomas holocinéticos y meiosis aquiasmática en machos, como es característico de la familia. Se observó una gran variación inter- e intraespecífica para el número diploide y las configuraciones meióticas en machos: Ananteris balzanii, 2n=14 (4II+VI); Tityus (Tityus) bahiensis, 2n=12 (2II+III configuración 2 + V), 2n=13 (4II+V, 3II+VII configuración 1, 3II+VII configuración 2), 2n=14 (4II+VI) y 2n=15 (6II+III configuración 1); Tityus (Tityus) confluens, 2n=5 (V configuración 1, V configuración 2) y 2n=6 (II+IV, VI); Tityus (Tityus) argentinus, 2n=9 (II+VII) y 2n=10 (5II, 3II+IV, X); Tityus (Tityus) sp. 1, 2n=32 (16II) y 2n=31 (14II+III); Tityus (Tityus) uruguayensis, 2n=31 (12II+VII, 10II+IV configuración 1+VII, 10II+IV configuración 2 +VII); Tityus (Archaeotityus) paraguayensis, 2n=16 (8II, 5II+2III, 6II+IV); Zabius birabeni, 2n=16 y Zabius fuscus, 2n=18 (9II, 7II+IV). Los multivalentes en meiosis I, producto de rearreglos cromosómicos, se encontraron en estado polimórfico en T. confluens, T. paraguayensis, Tityus sp. 1 y T. uruguayensis, y en estado polimórfico y politípico en T. bahiensis, T. argentinus y Z. fuscus. La segregación cromosómica en meiosis I fue balanceada, tanto en individuos homocigotas como heterocigotas estructurales. Las hembras partenogenéticas de distintas poblaciones de Tityus (Tityus) trivittatus presentaron 2n=6, sin variabilidad cariotípica. En la meiosis femenina en Z. fuscus se describió un estadio difuso y bivalentes en forma de anillo en profase I tardía; se discute el posible origen de estos bivalentes en el marco de una meiosis quiasmática o aquiasmática. La localización de la heterocromatina constitutiva mostró variaciones entre las especies. La mayoría presentó bloques terminales en todos los cromosomas e intersticiales en algunos, mientras que A. balzanii, T. paraguayensis y Z. fuscus presentaron bloques terminales en pocos pares cromosómicos. Las regiones organizadoras nucleolares se localizaron principalmente en un par cromosómico en posición terminal y asociadas a un bloque conspicuo de heterocromatina constitutiva; las excepciones fueron dos pares cromosómicos con NORs terminales en T. uruguayensis y la posición subterminal en A. balzanii. Las repeticiones teloméricas (TTAGG)n se localizaron exclusivamente en regiones terminales y permitieron el análisis detallado de la profase meiótica de machos y hembras. Los estudios poblacionales de T. confluens, T. bahiensis y T. argentinus permitieron proponer qué cromosomas estaban implicados en los rearreglos cromosómicos que originan los multivalentes, así como en las variaciones de los números diploides. La variabilidad cromosómica intraespecífica se debe principalmente a fusiones y, en menor grado, a translocaciones recíprocas. Los estudios citogenéticos pueden aportar datos para la delimitación y diagnosis de nuevas especies, como en T. uruguayensis y Tityus sp. 1. El estudio de una población de T. confluens permitió proponer que existirían cromosomas sexuales crípticos homomórficos XY/XX (macho/hembra), que en algunas especies se asociarían con la heterocigosis estructural en machos y la homocigosis estructural en hembras.

Los armadillos de la tribu Euphractini son un grupo de mamíferos xenartros, que se encuentran clasificados en 5 especies cuya distribución ocurre principalmente en la Argentina (salvo Euphractus sexcinctus). Por su condición filogenética basal en placentados, su biología requiere ser cuidadosamente revisada y estudiada. Se caracterizó citogeneticamente y desde el punto de vista reproductivo a Euphractini, para poder esclarecer posibles mecanismos de aislamiento reproductivo (MAR) acontecidos durante su historia evolutiva: 1). MAR post-cigóticos: mediante la caracterización citogenético-molecular de: 223 ejemplares (131 machos y 92 hembras) de Chaetophractus villosus, 2n=60 y NF=88; 103 ejemplares de Chaetophractus vellerosus, en sus dos distribuciones disyuntas, 2n=62 y NF 88-90 [48 ejemplares (28 machos y 20 hembras) de la distribución principal, incluyendo los márgenes de la misma, y 55 ejemplares (28 machos y 27 hembras) de la distribución secundaria]; 14 ejemplares (4 machos y 10 hembras) de Zaedyus pichiy, 2n=62 y NF=98; y 7 ejemplares (4 machos y 3 hembras) de E. sexcinctus, 2n=58 y NF=106. 2). MAR precigóticos: con el estudio de la morfología del tracto genital masculino en machos de Ch. villosus, y de la fisiología reproductiva, con estudio del ciclo reproductivo en machos de Ch. villosus y en hembras de Ch. villosus y Ch. vellerosus.

La familia Mymercophagidae, constituida por cuatro especies, son mamíferos xenartros con distribución endémica del Neotrópico. Al pertenecer esta familia a un grupo basal en placentados, es de particular interés para el establecimiento de las relaciones filogenéticas en mamíferos. Como constituyente de nuestra fauna autóctona su biología requiere ser cuidadosamente analizada. Se caracterizó citogenética-molecularmente a 39 ejemplares (20 machos y 19 hembras) de Mymercophaga tridactyla (2n=60 y NF=110-12) y 29 ejemplares (17 machos y 12 hembras) de Tamandua tetradactyla (2n=54 y NF 108). Se establecieron dos poblaciones cariológicas para M. tridactyla y una para T. Tetradactyla en su distribución Argentina. El par 1 al igual que otros pares cromosómicos, como los sexuales, resultaron estar compartidos en la familia. Se describió también la morfología de los tractos reproductivos en machos y hembras. El tracto reproductor femenino, reveló características arcaicas (seno-urogenital) presentes en otras especies de Xenarthra. Los machos de Tamandua tetradactyla presentaron inhibición testicular, en relacion con una variación en el tamaño del tracto reproductor y se caracterizó morfométricamente el espermatozoide. Tambien se determinó el ciclo hormonal en hembras de ambas especies resultando poliéstricas anuales.

El presente trabajo está conformado por dos bloques. Los animales incluidos fueron 12 pacientes externos o residentes del Servicio de Medicina y Cirugía de Grandes Animales, Hospital Escuela de la Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata. En el primer bloque se realizó una comparación de la citología del lavaje broncoalveolar (BAL) entre dos grupos de equinos según la presencia o ausencia de signos de enfermedad respiratoria inferior. En el segundo bloque se analizó la citología del BAL antes y después de un mes de estabulación en cinco de los seis equinos pertenecientes al grupo de animales asintomáticos, los cuales habían permanecido a campo durante los tres meses previos a este estudio. Los animales sintomáticos presentaron una amplia variación en la citología, con distintos incrementos relativos en las células inflamatorias, pero en todos los casos superando ampliamente los valores de referencia considerados normales y el promedio de los animales asintomáticos. No se pudo comprobar que diferentes perfiles citológicos se correlacionen con determinados signos clínicos. Se evidenció que es imposible la diferenciación definitiva entre asma leve-moderado y asma severo únicamente en base a la citología del BAL. En el grupo asintomático, los macrófagos fueron la célula predominante superando el valor de referencia y más del 50% se encontraban activados. En la primer muestra cuatro de los seis animales asintomáticos presentaron un aumento leve de neutrófilos y/o mastocitos, dejando en discusión la clasificación de estos equinos como asmáticos subclínicos. Si bien todos los animales se mantuvieron sin sintomatología durante el periodo de estabulación, hubo claras alteraciones en la citología a los treinta días. Se evidenció un aumento variable en la proporción de macrófagos activos, neutrófilos y mastocitos. El cambio más notorio se dio en los eosinófilos, ausentes en la primera muestra y luego presentes en todos los equinos (por encima del valor de referencia en tres de los cinco casos). Se concluyó que la estabulación produce un aumento en la actividad macrofágica y una inflamación leve sin el desarrollo de signos de enfermedad respiratoria inferior.

Bulbostylis Kunth includes approximately 150 species from tropical and subtropical habitats throughout the world. Some species can be found in temperate areas, with the southern limit of the genus in South America at 42 ° S. The genus has two important centers of diversity: África and South America (especially central Brazil). Most species are found in open habitats such as savannas often sandy soils and damp at least part of the year. This paper deals the genus Bulbostylis for Southern America (Brasil: Paraná, Santa Catarina y Rio Grande do Sul; Paraguay; Argentina; Chile y Uruguay) Taxonomic and anatomical studies were made to elucidate the nomenclatural problems and species delimitation. Maps showing the area of all recognized taxa were presented. Descriptions of the characters of taxonomic and identification keys were made. For the study area were recognized 19 specific names, varieties and forms. In herbarium consult were found abundant material with wrong identifications, possibly as a result of the similarity in the overall appearance of the plants and that the keys not involve stable characters for the taxa. As a result of this study were described and illustrated 24 species and 2 varieties. Were proposed as new synonyms 5 names, 11 varieties and 7 forms; lectotypes 5 species and 3 varieties; neotypes rises to the rank of species one form, was rehabilitated a new varietal name, has extended the range of four species, Bulbostylis arenaria (Nees) Lindm. B. capillaris (L.) C. B. Clarke, B. conifera (Kunth) C.B. Clarke, B. fendleri C. B. Clarke, B. filamentosa (Vahl) C. B. Clarke y B. fimbriata (Nees) C. B. Clarke were excluded from the study area and described six new species and a new variety. In the genus Bulbostylis as in other genera of Cyperaceae, the exomorphology fruit is one of the more stable characters for infra and intergeneric classification were described comparatively exomorphological characters of the fruit. We also performed the microanalysis of the fruit. In some way off the silicon bodies take different forms "silica phytolith" and not others, to see if there are differences in the formation of these two types of fruit, we analyzed the ontogeny of two species, Bulbostylis sphaerolepis (Boeck.) Beetle, forming silica bodies and B. communis M. G. López ined., that not formed silica bodies. The only phylogeny that is so far to the tribe Abildgaardiae takes only 6 species of Bulbostylis, which represent 4% of the genus. There are no records of morphological phylogenetic analysis, molecular or within the genus Bulbostylis, so this analysis is the first approach to elucidate interspecific phylogenetic relationships Due to phylogenetic hypothesis for Bulbostylis does not exist we propose here a morphological cladistic study, to explore the phylogenetic relationships to explore the phylogenetic relationships of the species to Austral America Bulbostylis and discuss the groupings established by Clarke (1908), suggestions were based on fruits observations were also analyzed behavior and the value of certain characters. Debido a que no existen hipótesis de filogenia disponibles para Bulbostylis, se hace aquí un estudio cladístico morfológico para explorar las relaciones filogenéticas de las especies de Bulbostylis de América Austral y discutir los agrupamientos establecidos por Clarke (1908) y los aquí sugeridos sobre la base de las observaciones de los frutos. Se analiza además el comportamiento y el valor de ciertos caracteres. New chromosome counts were presented for the genus, it shows that the studied species possess holokinetic chromosomes and notes that present different chromosomes numbers with the same DNA content, size of stomata and pollen grains remained unchanged, confirmed that the karyotype evolution through agmatoploidy or simploidy, not by polyploidy. That was confirmed and documented forming pseudomonads in the genus Bulbostylis.

Se ha descripto que la ingesta crónica y/o aguda de altas concentraciones de etanol durante la gestación produce el síndrome de alcoholismo fetal (FAS). El objetivo principal de este estudio fue profundizar los conocimientos sobre los efectos deletéreos del consumo preconcepcional de etanol y sus consecuencias sobre el desarrollo preimplantativo del embrión. Machos adultos y hembras prepúberes de ratón Fl de (C57 x CBA), ingirieron etanol al 10, 5 y 2.5% en el agua de bebida por 30 días. A los 27 días del tratamiento se indujo la ovulación. Se estudio la calidad de las gametas, la tasa de fecundación y el grado de desarrollo preimplantativo alcanzado por embriones in vitro e in vivo (hasta dia 4), y adicionalmente la incidencia del consumo de etanol en la maduración sexual de las hembras. La administración crónica de etanol al 10 y 5% produjo retraso en la maduración folicular. Como consecuencia, los ovocitos ovulados presentaron altos índices de activación espontánea, partenogenética, y la capacidad de sintesis de PGE por el complejo cúmulo-ovocitario fue reducida con el consumo del 10 y aumentada con el consumo del 5% de etanol. La tasa de fecundación in vitro e in vivo fue reducida cuando las hembras fueron tratadas con ambas dosis de etanol. Los ovocitos intactos de las hembras tratadas no fueron penetrados por los espermatozoides, y los ovocitos haploides oviductales permanecieron sin ser fecundados. El etanol afectó tanto la maduración del ovocito, la regulación y control de su calidad por las células del cúmulo, y también posiblemente la membrana plasmática ovocitaria y otros componentes celulares, lo que resultó en la pérdida de fecundabílidad. El consumo crónico de etanol al lO y 5%, en la fase preconcepcional de las hembras, produjo, tanto en el desarrollo in vitro como in vivo, tasa embrionaria diaria reducida, debido al crecimiento retrasado, al arresto embrionario en estadios de mórulas y en blastocistos tempranos, en los días 2, 3 y 4 (in vivo) y 5 de desarrollo in vitro, con ambas dosis de etanol. Asimismo, fue evidente la alta tasa de fragmentación embrionaria temprana, desde día 2 con etanol al 10%, y menor y más tardía en las hembras tratadas con etanol al 5%. El consumo de etanol al 10% produjo aumento de embriones anormales. El impacto del alcohol en el desarrollo embrionario fue menor con la dosis del 5%, debido a retraso y pérdida embrionaria de reducida intensidad. Se puede concluir que la dosis mínima perjudicial para la gameta femenina y el desarrollo ulterior del embrión preimplantativo, administrada cronicamente a hembras prepúberes, fue el etanol al 5%. Los efectos del consumo crónico de etanol al 5% podrian deberse en parte a las acciones "subcrónicas" del etanol en los días periovulatorios.

Es de actual importancia el desarrollo y uso de extractos vegetales en el control biorracional de plagas e insectos. Existe además una creciente inclinación por el uso de extractos naturales como parte de la dieta o en aplicaciones benéficas como ungüentos o lociones. Por otra parte, hay un intenso avance en la búsqueda e implementación de técnicas alternativas al uso de animales en la evaluación de la toxicidad de drogas y compuestos químicos. Estas razones motivaron el interés por llevar a cabo estudios de citotoxicidad y genotoxicidad, sobre extractos acuosos y metanólicos de dos vegetales autóctonos regionales de Argentina y parte de la zona subtropical de América: Vallesia glabra o Ancoche e Ilex paraguaiensis o Yerba Mate. Se efectuaron por lo tanto estos estudios, aplicando técnicas in vitro basadas en cultivos celulares, sometidos a tres tipos de exposiciones : I ) aguda ll ) repetida Ill ) crónica La Citotoxicidad se evaluó mediante a) ensayos de coloración (Cristal Violeta, Rojo Neutro) o por medición de actividades enzimáticas (Láctico deshidrogenasa, Succinato deshidrogenasa) o por determinación de la Concentración de Proteínas. b) Eficiencia de Clonado La Genotoxicidad se determinó por medición del Indice de Daño del ADN en el Ensayo del Cometa. Mediante exposiciones agudas se concluyó que los extractos metanólicos de Ancoche presentaron mayor comportamiento citotóxico que los acuosos para los ensayos que indican viabilidad celular (RN, CV, Proteínas, MTT) y menores para los que indican daño celular (LDH). Mediante el ensayo de Eficiencia de Clonado el extracto acuoso de Ilex paraguaiensis mostró ser más tóxico que el metanólico. El extracto acuoso de Ancoche a bajas concentraciones brindó cierto grado de protección de los cultivos. Las exposiciones repetidas evidenciaron aumento de las respuestas en el pasaje sexto. Las exposiciones crónicas de los cultivos con los extractos durante nueve pasajes consecutivos permitieron observar un aumento de la repuesta citotóxica a partir del cuarto (extracto metanólico) o del quinto (extracto acuoso) tratamiento para Ancoche. En exposiciones crónicas de los cultivos con los extractos durante nueve pasajes consecutivos permitieron determinar un aumento de la repuesta citotóxica a partir del cuarto (extracto acuoso) o del quinto (extracto metanólico) tratamiento para Yerba Mate. Las Cl50 que se determinaron por estos ensayos fueron: Ancoche en extracto acuoso : 500 μg / ml Ancoche en extracto metanólico : 250 μg / ml Yerba Mate en extracto acuoso : 1500 μg / ml Yerba Mate en extracto metanólico : 2000 μg / ml Sería interesante profundizar estas evaluaciones con estudios in vitro complementarios que permitan caracterizar mejor estos productos y asociar, si fuera posible, actividad biológica con estructura química.