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Staphylococcus aureus es el agente causal de infecciones de importancia médica y veterinaria. Las infecciones por S. aureus suelen ser recurrentes o persistentes a pesar de la presencia de anticuerpos específicos circulantes y asociados a mucosas, y del uso de antibióticos a los cuales la bacteria es susceptible. Entre las infecciones persistentes que S. aureus puede ocasionar, la infección intramamaria (lma) crónica constituye la patología infecciosa más prevalente de los bovinos destinados a la lechería. Hasta el presente, no se cuenta con una vacuna efectiva de uso práctico que permita prevenir las infecciones lma estafilocóccicas. La hipótesis de este trabajo de investigación postula que la administración de una vacuna viva atenuada por la ruta local lma sería un método idóneo para inducir una respuesta inmune adaptativa efectiva en la glándula mamaria contra S. aureus. En el marco de esta hipótesis, el objetivo general de este trabajo de investigación es proveer conocimiento acerca de las respuestas inmunes, tanto humorales como celulares, que es necesario inducir en la glándula mamaria para prevenir las infecciones por S. aureus. Se obtuvo una cepa viva atenuada de S. aureus (CVA A523) por termosensibilidad, la cual se utilizó como cepa prototípica en los estudios de inmunidad de la glándula mamaria. Para demostrar la hipótesis propuesta se desarrolló un modelo de infección lma por la cepa 8325-4 ɸ11 de S. aureus. Las lesiones histológicas observadas concordaron con las descriptas durante la mastitis bovina. La inmunización con la CVA A523, por la ruta local lma durante la etapa final de la preñez, confirió protección en la glándula mamaria frente a la infección experimental. La protección se evidenció a través de una significativa reducción en el número de UFC remanentes en la glándula mamaria de los ratones inmunizados luego del desafio experimental con la cepa virulenta parental de S. aureus. La inmunización por la ruta sistémica intraperitoneal indujo la presencia de elevados niveles de IgG circulantes pero no otorgó protección frente al desafío lma. La protección inducida mediante la inmunización lma se correlacionó con la presencia de elevados niveles de IgA e IgG en leche así como también con la presencia de poblaciones de linfocitos T capaces de producir IFN-γ frente al estímulo in vitro o durante la infección in vivo por S. aureus. La presencia en forma conjunta de anticuerpos específicos y de linfocitos capaces de producir citoquinas de tipo Th1 inducidos por la inmunización local constituye una estrategia promisoria para prevenir el establecimiento de la infección lma crónica por S. aureus en un huésped vacunado. Se requerirán futuros ensayos controlados de inmunización en bovinos con CVA para extender la validez de nuestros hallazgos a rumiantes destinados a la lechería.

El gluten es una mezcla heterogénea de proteínas, principalmente gliadinas y gluteninas, que al ser ingerido es degradado por enzimas del tracto gastrointestinal. Algunos péptidos derivados de gluten son resistentes a la degradación enzimática y pueden encontrarse en el lumen intestinal y desencadenar respuestas inmunes tanto adaptativas, como innatas. Entre los péptidos derivados de gliadina resistentes a la degradación se encuentra el péptido p31-43, que no se une a moléculas de MHC de clase II y en consecuencia no es capaz de inducir una respuesta adaptativa específica. Existen numerosos estudios in vitro acerca de la toxicidad de p31-43, sin embargo, en la actualidad se desconoce su receptor celular y no se han descripto en profundidad sus efectos in vivo. En el presente trabajo de tesis se utilizó un modelo murino de enteropatía inducida mediante la administración intraluminal de p31-43, así como también se desarrolló un modelo de administración de p31-43 por vía intragástrica, de modo de estudiar mecanismos de la respuesta innata en intestino delgado. En este modelo intentamos reproducir algunos aspectos de la patogenia de enfermedad celíaca (EC). Esta es una enteropatía crónica que se desencadena en individuos genéticamente predispuestos ante el consumo de proteínas de gluten y bajo la influencia de otros factores ambientales. EC tiene una prevalencia global del 1 % y se caracteriza por la presencia de atrofia vellositaria e hiperplasia de criptas en intestino delgado, así como también, por un marcado incremento en el infiltrado linfocitario en lamina propria y en el epitelio intestinal. En este trabajo de tesis se observó que la enteropatía murina inducida, es específica de la secuencia de aminoácidos de p31-43 y dependiente de la vía de IFN tipo I. Además, corroboramos que p31-43 induce apoptosis tanto in vitro, como in vivo. Por otro lado, se caracterizó las propiedades estructurales y de agregación de p31-VI 43. Se observó que posee una estructura del tipo poliprolina II y que forma agregados proteicos en solución estables a pHs intestinales (3-8), cuyo tamaño se incrementa con la concentración y evolucionan en el tiempo a estructuras más complejas. Finalmente, observamos que las moléculas de NLRP3 y Caspasa-1 estaban implicadas en el daño. Por lo que consideramos que los agregados de p31-43 podrían ser sensados por el inflamasoma NLRP3 y ejercer efectos inflamatorios vía Caspasa-1.

En el presente trabajo se estudia el efecto mutagénico de una mostaza nitrogenada: clorhidrato de metil- bis (cloroetil amina N óxido) MUSTRON, de una polietileneimina: trietilene- tiofosforamida THIO TEPA y de tratamientos en que 1a acción de esos agentes se combina con 1a de los Rayos X. Con THIO TEPA se obtiene una curva de sensibilidad en espermatogénesis con máximosy mínimos característicos. El oocito maduro (estado 14) demuestra mayor sensiblidad a 1a acción de ambos alquilantes que estados anteriores de su desarrollo. Los tratamientos combinados indican un modo de acción e interacción distinto para cada uno de los agentes. En todas las experiencias con machos y con hembras el THIO TEPA mostró mayor eficiencia mutagénica que el MUSTRON.

Fil:Abalde, Roberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Tesis (Magister en Ciencias Agropecuarias)--UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2015.