Catálogo de publicaciones

Fil:Alvarez Herrero, Ramón. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Valino, A. L. (2017). Obtención de desoxinucléosidos y desoxinucleótidos mediante el uso de biocatalizadores. (Tesis de posgrado). Bernal, Argentina: Universidad Nacional de Quilmes.

1) Se efectuó una revisión de las publicaciones sobre la síntesis de ésteres nicotínicos de polialcoholes y de monosacáridos. Las síntesis publicadas tuvieron, en general, como objetivo el estudio de las propiedades farmacológicas de dichos ésteres. 2) Se analizaron los distintos aspectos estudiados hasta el presente sobre la reacción del amoníaco con acetatos y benzoatos de monosacáridos, con formación de 1,1-bis(acilamido)-1-desoxi-alditoles y N-acil-glicosilaminas. 3) Se hizo una revisión de las publicaciones sobre las transformaciones que sufren los azúcares libres en medio amoniacal y en particular sobre aquellas relacionadas con la formación de compuestos heterocíclicos: pirazinas e imidazoles sustituidos. 4) Se llevó a cabo la síntesis de la penta-O-nicotinil-D-glucosa (XCVIII) por tratamiento de la D-glucosa con una mezcla de clorhidrato de cloruro de nicotinilo y piridina en medio clorofórmico, obteniendo 72,6% de (XCVIII) pura y de punto de fusión superior al publicado en la literatura (8). Utilizando el mismo método que en el caso anterior se preparó, con un rendimiento del 88%, la penta-O-nicotinil-D-galactosa (C) como un sólido amorfo de [α]27,D +133°; este producto había sido descripto como un jarabe por Strong y col. (9) quienes no indicaron constantes físicas. 5) Se sintetizó la penta-O-nicotinil-D-manosa (XCIX)(rend. 72,5%), la tetra-O-nicotinil-L-arabinosa (CI) (Rendi 75%) y la tetra-O-nicotinil-D-xilosa (CII) (Rend. 79%), compuestos que no han sido descriptos en la literatura. 6) Se estudió la reacción de amonolisis, con amoníaco acuoso al 25%, de los ésteres nicotínicos sintetizados; el producto de mayor rendimiento de cada reacción se aisló por cristalización, mientras que las demás sustancias fueron separadas por cromatografía en columna de celulosa. Se sintetizaron además los derivados acetilados de los productos de amonolisis. De la amonolisis de la penta-O-nicotinil-D-glucosa se aisló 16% de N-nicotinil-D-glucofuranosilamina (CIII), 3,8% de 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-D-glucitol (CIV) y 7,6% de 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-6-(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)-pirazina(XC). De la amonolisis de la penta-O-nicotinil-D-manosa se obtuvo 22,5% de 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-D-manitol (CX) y 3,8% de 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-6(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)-pirazina (XC). De la amonolisis de la penta-O-nicotinil-D—galactosa se aisló 28% de 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-D-galactitol (CXII) y 1,4% de N-nicotinil-D-galactofuranosilamina (CXIII). De la amonolisis de la tetra-O-nicotinil-L-arabinosa se aisló 26% de 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-L-arabinitol (CXV) y 3,15% de N-nicotinil-L-arabinofuranosilamina (CXVI). De la amonolisis de la tetra-O-nicotinil-D-xilosa se aisló, por cromatografía en columna de celulosa, 13,2% de 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-D-xilitol (CXIX). 7) Las estructuras de cadena abierta de los 1,1-bis(nicotinamido)-1-desoxi-alditoles y la naturaleza de los ciclos de las N-nicotinil-glicofuranosilaminas se determinó por oxidación con metaperyodato de sodio, discutiendo las posibles etapas de sobreoxidación de estas últimas. 8) La estructura de la 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-6-(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)-pirazina(XC), aislada de las amonolisis de la penta-O-nicotinil-D-glucosa de la penta-O-nicotinil-D-manosa, se demostró estableciendo la ubicación de los sustituyentes en el anillo pirazínico por oxidación con agua oxigenada con lo que se obtuvo el ácido 2,6-pirazindicarboxílico (CVII), que se identificó por su punto de fusión y mediante la preparación de su éster metílico (CVIII) por tratamiento con diazometano. El número y la ubicación de los grupos hidroxilo en las cadenas laterales se determinó por oxidación con metaperyodato de sodio y por su espectro de R.M.N., que resultó análogo al de su isómero, la 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-5-(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)-pirazina, cuya estructura ya había sido demostrada por otro camino por Kuhn y col. (80). Se preparó el derivado heptacetilado de (XC), cuyo espectro de R.M.N. confirmó la estructura propuesta. 9) Se discutieron las posibles reacciones que podrían conducir a la formación de la 2-(D-arabino-tetrahidroxibutil)-6-(D-eritro-2,3,4-trihidroxibutil)-pirazina (XC) en la reacción de amonolisis de la penta-O-nicotinil-D-glucosa y de la penta-O-nicotinil-D-manosa. 10) Se discutieron los resultados obtenidos comparándolos con los publicados para las reacciones de amonolisis de benzoatos de monosacáridos y se llegó a la conclusión que el grupo nicotinilo favorecería la formación de nicotinamida, lo cual reduciría el número de grupos acilo disponibles para la migración intramolecular O→N.

El objetivo de la tesis fue obtener un producto en polvo para consumo con elevada capacidad antioxidante a partir de yerba mate. Para ello se abordaron una serie de objetivos particulares: seleccionar y adaptar técnicas de evaluación del contenido de polifenoles y de la capacidad antioxidante de los extractos; evaluar la influencia de la materia prima mediante la comparación de diferentes fracciones y procedencias geográficas; y optimizar la obtención de los extractos y su posterior secado. El contenido de polifenoles y la capacidad antioxidante se determinaron mediante los métodos de Folin-Ciocalteu y del radical DPPH, usando principalmente ácido clorogénico y Trolox como estándares. El uso de la fracción de hojas del material cosechado durante el inicio del periodo de cosecha permitió obtener extractos con alto contenido de polifenoles y alta capacidad antioxidante, ya que la fracción hojas posee mayor concentración de polifenoles totales que la fracción palos. En cuanto a las soluciones extractivas, tanto el agua como soluciones acuosas binarias de metanol y de etanol mostraron ser eficaces en la extracción de dichos compuestos fenólicos, lográndose extracciones cercanas al 55 % del valor máximo posible. La pérdida de polifenoles durante el secado spray usando maltodextrinas como agentes de secado fue despreciable, sugiriéndose que los compuestos que contribuyen al valor del contenido de polifenoles del producto en polvo son muy estables a las temperaturas ensayadas, o sus posibles productos de hidrólisis durante el proceso de secado mantienen su capacidad antioxidante. Los resultados confirman la potencialidad del mate soluble como un alimento funcional. Palabras Claves: yerba mate; antioxidantes; extracción; mate soluble; Illex paraguariensis

Identificación botánica: • Annona cherimola Mill (Annonaceae) “Chirimoya”: un ejemplar de herbario, fue depositado en el Museo de Botánica y Farmacognosia “Carlos Spegazzini”: LPE1165. Reserva de exsicata. • Descripción botánica: reconocimiento taxonómico, descripción de la hoja macroscópica y microscópica con identificación de elementos histológicos y reacciones histoquímicas con formaron cristales característicos de diagnóstico como constituyentes, base para un futuro control de calidad. Elaboración de extractos: • Elaboración de infusión de las hojas de A. cherimola. • Elaboración de extractos de las hojas de A. cherimola. • Elaboración de extracto DCM de las hojas de A. cherimola. • Ensayos fitoquímicos sobre los diferentes extractos: - Extracto metanólico, extracto acuoso y fracción n-butanólica se caracterizó la presencia de polifenoles, flavonoides. Se reporta por primera vez, en esta especie utilizando distintos sistemas de TLC, la presencia de ácido cafeico, 2 flavonoides: rutina y isoquercetina, todos confirmados por UHPLC. - Fracción n-butanolica: reacción de caracterización de saponinas. - Extracto cloroformo 2: se caracterizó la presencia de alcaloides. - Extracto DCM se caracterizó la presencia de terpenoides, esteroides Se reporta por primera vez, en esta especie utilizando distintos sistemas de TLC y UHPLC, la presencia de terpenoides: ácido ursólico y ácido oleanólico. Ensayos in vitro de la actividad antineoplásica de extractos: Ensayos in vitro de la actividad antineoplásica de los diferentes extractos y fracciones obtenidas para selecciónar el más activo, en estirpes celulares de LLC-B, resistentes a terapias habituales. Mostrando actividad de 68% a una dilución 1/512 Los linfocitos normales no son afectados significativamente por estos extractos sugiriendo un alto nivel de selectividad y seguridad biológica de los mismos. Realizados en el INCUCAI Realización Nanoliposomas: Realización de NLP cargados con infusión de A. cherimola con/sin anticuerpos monoclonales específicos anti-CD20 en células de LLC-B resistentes a fármacos habituales. • NLP sin anticuerpo monoclonal marcado con Rodamina realizados en UNQ Lab. De Biomembranas. • NLP recubiertos con anti-CD20 marcado con Rodamina realizados en Centro de Research Clinique Hayen, Hospital Saint Louis. Pruebas de caracterización NLP: tamaño, potencial, cuantificación de los Fosfolípidos de los liposomas, penetración a distintas concentraciones. Ensayos in vitro de la actividad antineoplásica de Nanoliposomas: • Actividad Citotoxicidad de NLPs con “Chirimoya” contra células de LLC-B, tanto sin tratamiento, como células resistentes a Fludarabina; además de baja toxicidad en PBMCs de donantes sanos. • Actividad apoptótica promedio de 68% (NLP sin anticuerpo) y 71% (NLP con anticuerpo) a diluciones 1/1024 y baja toxicidad en PBMCs de donantes sanos. Concluyendo • Se avanzó en el conocimiento botánico y fitoquímico de esta especie encontrando elementos característicos para su correcta identificación. Y se describieron por primera vez la presencia de ácido cafeico, rutina, isoquercetina, ácido ursólico y ácido oleanólico. Considerando los resultados de los ensayos biológicos realizados, es lógico suponer que la actividad de los extractos de hojas de A. cherimola sería el producto de una acción sinérgica entre las acetogeninas presentes y compuestos encontrados. • Con los extractos obtenidos a partir de Annona cherimola, se investigó la actividad antitumoral in vitro sobre linfocitos B de voluntarios sanos y en enfermos de LLC-B, determinandose que el extracto acuoso presenta la mayor actividad. • Se evaluó la internalización de los nanoliposomas dentro de los lifocitos B de los pacientes enfermos y la actividad apoptótica resultantes mediante microscopía confocal. • Desde el punto de vista técnológico moderno e innovador se encapsuló el extracto acuoso de Annona cherimola en nanoliposomas con anticuerpo monoclonales (forma farmaceutica nanoparticulada) con gran especificidad y seguridad, selectivos para dirigir este sistema de adminitración (delivery) de fármacos a su células blanco, en este caso Linfocitos B. Para maximizar los efectos terapéuticos y minimizar los efectos secundarios, que combinados con los tratamientos clásicos, podrían tener un efecto sinérgico beneficioso, presentandose como una estrategia prometedora para una patología que no dispone de un desarrollo técnologico suficiente para las necesidades actuales.

El objetivo del presente trabajo de investigación fue la deshidratación por métodos combinados de frutos de carozo, nectarinas Caldesi (Prunus persica var. nectarina) y ciruelas D´ente (Prunus doméstica L.). Se utilizaron dos técnicas sucesivas de conservación: ósmosis directa seguida de secado por aire, para lo cual se ensayaron distintas variables de estudio (tipo y concentración de la solución osmótica, temperatura osmótica, relación fruta/solución, temperatura de secado y tiempo de procesamiento). Del tratamiento osmótico, se evaluó la humedad, la pérdida de agua, el contenido de sólidos solubles, la ganancia de sólidos y los coeficientes efectivos de difusión de agua y de sólidos. Del secado por aire caliente se obtuvieron cinéticas de pérdida de humedad a las cuales se les ajustaron modelos teóricos y se analizó la influencia de las variables del proceso sobre la pérdida de humedad, los parámetros cinéticos y de transferencia de masa. El producto deshidratado por técnicas combinadas fue evaluado en cuanto a los parámetros de calidad color (mediante el colorímetro Minolta y el análisis de la imagen), textura (Firmeza), capacidad de rehidratación y contenido de antioxidantes (Fenoles Totales, Flavonoides). La pérdida de humedad, la velocidad de secado y el coeficiente efectivo de difusión se incrementaron con respecto al aumento de la temperatura de secado. Asimismo se observó que todos los tratamientos presentaron únicamente el período de velocidad decreciente, durante el secado con aire, por lo que el tratamiento osmótico favoreció la pérdida de humedad en las muestras. El secado por métodos combinados permitió disminuir la actividad acuosa mediante la eliminación del agua y la incorporación de solutos provenientes del tratamiento osmótico. La estabilidad del producto fue comprobada mediante el almacenamiento, sin producirse modificaciones importantes en la apariencia. Los parámetros de calidad fueron influenciados fundamentalmente por la temperatura de secado y por las condiciones de deshidratación osmótica. El estudio y análisis del tratamiento combinado junto a la evaluación de la calidad final de los frutos deshidratados permite optimizar el proceso de modo de lograr un secado eficiente que permita prolongar la vida útil de los frutos de carozo pero sin perder los atributos de calidad que garantizarán la aceptación del producto por parte de los consumidores.

El huevo de gallina es un producto de la actividad avícola cuya comercialización como tal, sin ningún tipo de procesamiento ulterior, le otorga la característica de “commodities”. La posibilidad de incorporar valor agregado a este producto permitiría incrementar su precio de venta, entrando en los circuitos de consumo de las denominadas "specialties". Muchos estudios científicos identificaron y caracterizaron los componentes del huevo demostrando que son muy importantes como fuente de nutrientes en la dieta humana. Numerosas actividades biológicas han sido asociadas a éstos, incluyendo actividades antibacterianas, antivirales, inmunomoduladoras y anticancerosas; indicando la importancia de los mismos en la salud humana, en la prevención y tratamiento de enfermedades. Entre dichos componentes, se encuentran las grasas con sus ácidos grasos, cumpliendo un rol de gran relevancia. Ya se conoce que, existe una asociación entre el consumo de ácidos grasos saturados y la incidencia de trastornos cardiovasculares en seres humanos; habiéndose reportado al ácido linolénico (C18:3 n-3) como indispensable para el desarrollo de cerebro en ratas; y que el consumo de ácidos grasos poliinsaturados omega-3, en particular el ácido eicosapentanoico (C20:5 n-3) y el docosahexaenoico (C22:6 n-3) han mostrado tener efectos benéficos sobre la salud humana. Se ha demostrado también que el consumo de huevos con mayor contenido en ácidos omega-3 permite reducir el riesgo de ateroesclerosis y ataques cardíacos, al tiempo de producir estímulos en el desarrollo neonatal del cerebro y la retina. Existe también evidencia que el desbalance en la relación omega-6/omega-3 es un factor de riesgo mayor para enfermedades cardiovasculares, cerebro-vasculares, cáncer y reacciones alérgicas. Los ácidos grasos omega-6 y omega-3 compiten por las mismas enzimas pero tienen diferentes roles biológicos, por lo que un correcto balance entre ellos es de considerable importancia. Las dietas occidentales son deficientes en omega-3 y altas en omega-6; entonces, se recomienda incrementar la ingesta de los primeros. Los animales no pueden sintetizar estos ácidos grasos, por lo que son considerados como esenciales y deben proporcionarse en la dieta. El objetivo de este trabajo fue modificar la composición lipídica de los huevos, mediante programas específicos de alimentación de las gallinas, lo que permitió incorporar valor agregado a los mismos favoreciendo una diferenciación en aspectos de calidad relacionados con la salud humana. En la sección Avicultura del INTA Pergamino se realizó una experiencia utilizando 480 pollas Shaver Brown alojadas a razón de dos aves por jaula. Cada tratamiento contó con 4 réplicas de 12 aves cada una distribuidos en bloques aleatorizados. La experiencia se inició a las 24 semanas de vida de las aves y tuvo una duración de 3 períodos de 28 días cada uno. Se evaluó el efecto del agregado a la dieta de diferentes fuentes de ácidos grasos omega-3 de origen vegetal, solas o en combinación con aceite de girasol alto oleico, sobre el contenido de ácidos grasos en huevos. Los tratamientos evaluados fueron los siguientes: 1. Lino semilla (15 %) + AGAO (1,5 %) * 2. Colza semilla (25 %) + AGAO (1,5 %) 3. Chía semilla (25 %) + AGAO (1,5 %) ** 4. Chía expeller (25 %) + AGAO (1,5 %) 5. Lino aceite (6%) 6. Chía aceite (6%) 7. Aceite comercial RCR 18% omega-3 (6%) *** 8. Control maíz -soja + AGAO (1,5%) 9. Control maíz -soja - Aceite Soja 10. Cobre tribásico **** En base a estas materias primas se formularon dietas diseñadas para producir huevos con niveles más altos de ácidos grasos poliinsaturados del tipo omega-3, mayor contenido de ácidos grasos monoinsaturados y con menor contenido de colesterol. El reemplazo de aceite de soja por aceite de girasol alto oleico, permitió aumentar los ácidos grasos monoinsaturados y disminuir los ácidos grasos poli insaturados, contribuyendo a lograr una mejor conservación en góndola. La inclusión de semilla de lino permitió aumentar la proporción de ácidos grasos omega-3 y disminuir la relación omega-6 / omega-3 por debajo de 4, nivel recomendado desde un punto de vista médico. Con la inclusión de cobre tribásico se pretendió reducir el nivel de colesterol. De esta manera, el desarrollo de huevos ricos en omega-3 cubriría la creciente demanda de los consumidores, que buscan alimentos que ofrezcan mayor protección para la salud y beneficios terapéuticos. Estos productos, diferenciados por su mejor calidad nutricional y con ventajas para la salud humana, tienen un valor comercial superior a los tradicionales, brindando oportunidades de mercado a las empresas que los produzcan. En el presente estudio además del perfil de ácidos grasos en materias primas y huevos, se midieron variables relacionadas a la respuesta zootécnica: postura (%/ ave/ día); consumo de alimento (promedio de cada período de 28 días); peso del huevo (g) tomando una muestra al finalizar cada período; y la mortalidad. Con esta información se calculó la masa de huevo/ ave/ día y la conversión alimenticia. También se estudió la calidad interna (Unidades Haugh) y externa (mg/cm2 de cáscara) del huevo. En general, la respuesta zootécnica obtenida con las distintas dietas fue superior a la que se registra en condiciones prácticas, con niveles de postura superiores al 97%. Este resultado brinda confiabilidad respecto al aporte de nutrientes de las distintas dietas. No obstante, hubo algunas diferencias respecto del control. Con semillas de lino, colza y chía se observó un aumento en la conversión por kg de huevo. Con los distintos aceites no se observaron diferencias respecto del control. La calidad interna y externa del huevo disminuyó con la edad del ave sin que se observen efectos adversos de los tratamientos en calidad interna. La calidad de cáscara se vio afectada en el caso de los tratamientos con semillas de colza, chía y expeller de chía. Con los niveles más altos de inclusión de las distintas fuentes de omega-3 fue posible modificar el perfil de ácidos grasos en huevo, lográndose un aumento en el contenido de omega-3 de hasta 8 veces respecto del control, utilizando semilla de chía (1,4% a 11.3%). Con la combinación aceite de girasol alto oleico y semilla de colza, el contenido de ácidos grasos monoinsaturados se incrementó 1,4 veces (36.6% a 49.9%). Por otra parte se logró una reducción de la relación omega-6/omega-3 (de 9.36 a 1.56) al incluir semilla de chía. El uso de cobre tribásico permitió una leve disminución (no significativa) del nivel de colesterol.

En este trabajo proponemos e implementamos una nueva técnica para la optimización de imágenes del microscopio de gran apertura numérica. En estos sistemas la teoría escalar de la difracción no es una buena aproximación, por lo que para el desarrollo y validación de nuestra técnica, proponemos un modelo numérico original de la teoría vectorial de la difracción. Este modelo permite calcular, en el plano imagen, el campo eléctrico producido por un emisor puntual. Éste basa en una modificación del principio de Huygens-Fresnel, utilizando ondas secundarias esféricas vectoriales, en combinación con un método de integración de Monte Carlo. Aplicando este modelo estudiamos la formación de imágenes en el microscopio, considerando objetos autoluminosos no polarizados, y comparando las predicciones hechas por las teorías escalar y vectorial de la difracción, para microscopios con distintas aperturas numéricas. A partir de estos estudios desarrollamos una técnica de procesamiento de imágenes en el espacio de las frecuencias, a la que denominamos pseudodeconvolución. Ésta se basa en la corrección de la transformada de Fourier de la imagen por un factor dado por la relación simulada entre la función transferencia y una función transferencia meta, con mejores características para la resolución y el contraste. Nuestros estudios con simulaciones numéricas muestran que es posible obtener una mejora en la resolución de entre un 10 y un 15%, y una mejora cualitativa en el contraste. Aplicamos finalmente esta técnica a imágenes experimentales, verificando los resultados obtenidos en las simulaciones numéricas.

El objetivo general del siguiente trabajo es contribuir al mejoramiento de los conocimientos básicos que permitan evaluar y mejorar las tecnologías de biorremediación. Los objetivos específicos son: • Aislar a partir de suelos de la Patagonia semiárida, microorganismos degradadores de PAH capaces de resistir condiciones ambientales de la región. • Evaluar la aplicabilidad de las estrategias ABA de bioaumento sobre la biorremediación de suelos patagónicos contaminados con PAH y con mezclas complejas de los mismos. • Estudiar los cambios producidos en la estructura y función de las comunidades microbianas de suelos contaminados por efecto del inoculante y de las variaciones en las condiciones abióticas. • Incursionar en el estudio de los mecanismos moleculares presentes en las bacterias degradadoras de PAH aisladas de suelos de la Patagonia semiárida y seleccionadas como inoculantes por su adaptación a las condiciones ambientales típicas de la región (resistencia a la desecación, déficit de nutrientes, entre otros).

El objetivo de este trabajo es estudiar el comportamiento de una cepa de Rhizobium japónicum, seleccionada en base a su capacidad simbiótica y actividad nitrogenásica, para luego incorporarla en un soporte inerte a base de turba, estudiando la supervivencia del microrganismo a diferentes temperaturas y ante diferentes condiciones de operación, en un intento por fijar la tecnología y los recaudos a adoptar para fabricar industrialmente un inoculante con turbas nacionales, adaptado para nuestra zona sojera.