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El presente trabajo tiene como objetivos: - Aislar y tipificar cepas de Lactobacillus delbruecki i subespecie bulgaricus a partir de fermentos industriales y yogures comerciales. Estudiar sus características metabólicas en leche y medio de cultivo. - Determinar su actividad proteolítica en leche. Analizar la influencia de la concentración de aminoácidos solubles y la temperatura de desarrollo sobre esta actividad metabólica. - Optimizar las condiciones de conservación a fin de mantener las aptitudes metabólicas de interés en la elaboración de productos fermentados: viabilidad celular y capacidad acidificante.

Las bacterias lácticas (BL) poseen numerosas propiedades benéficas para la salud del hospedador, entre las cuales se destaca su capacidad inmunomoduladora y anti-inflamatoria. Aunque la mayoría de los efectos benéficos de los probióticos requieren del contacto directo células-bacterias, algunos informes han demostrado que ciertos compuestos extracelulares secretados por BL, tales como proteínas/péptidos, son capaces de regular ciertas vías de señalización y respuestas celulares y promover así protección contra enfermedades inflamatorias. El objetivo de este trabajo de Tesis Doctoral fue profundizar en el estudio de los mecanismos celulares y moleculares a través de los cuales compuestos secretados por BL ejercen su actividad anti-inflamatoria mediante el empleo de modelos in vitro e in vivo y establecer las bases tecnológicas para el desarrollo de un producto anti-inflamatorio?.Ensayos in vitro empleando un modelo de células RAW 264.7 desafiadas con lipopolisacárido (LPS), permitió seleccionar a Lactobacillus reuteri CRL1098 por producir un compuesto de naturaleza peptídica en el sobrenadante de su cultivo (LrS 1098) capaz de estimular la producción de IL-10 y disminuir marcadores pro-inflamatorios como TNF-α, IL-6, COX-2, Hsp-70 y óxido nítrico (NO). También se demostró que LrS 1098 disminuye la apoptosis de células RAW 264.7 inducida por LPS.Para identificar los mecanismos moleculares por medio de los cuales LrS 1098 es capaz de modular la respuesta inflamatoria in vitro, se evaluó su acción sobre intermediarios claves de distintas vías de señalización intracelular. Se demostró que LrS 1098 induce la respuesta anti-inflamatoria mediante la activación de la vía ERK 1/2 y a través de la inhibición de la vía de PI3K/Akt y de la translocación de la subunidad p65 del factor NF-κB al núcleo.Para validar las propiedades anti-inflamatorias de LrS 1098, se ajustó un modelo in vivo de daño pulmonar agudo (DPA) inducido por LPS en ratones BALB/c. La administración intranasal de LrS 1098 redujo los parámetros evaluados de daño al tejido pulmonar, disminuyó el reclutamiento de células inmunes a las vías aéreas y la secreción de citoquinas pro-inflamatorias al pulmón. LrS 1098 demostró ejercer una actividad anti-inflamatoria más potente que la dexametasona empleada en el modelo in vivo.Por otra parte, se establecieron los aspectos tecnológicos para el desarrollo de un producto anti-inflamatorio. Se diseñó un medio de cultivo simplificado de bajo costo (medio PETG) para la producción de biomasa por L. reuteri CRL1098 empleando un diseño factorial fraccionario. Se evaluó la influencia de distintos nutrientes y diferentes parámetros (agitación, pH, fase de crecimiento) sobre el crecimiento de este microorganismo. Se formuló también un medio de producción de bajo costo (buffer citrato con el agregado de glucosa) en donde el microorganismo fue capaz de producir el compuesto anti-inflamatorio.Los resultados obtenidos en este trabajo de Tesis Doctoral representan un avance sobre el conocimiento de los mecanismos moleculares de acción de bacterias lácticas. Al mismo tiempo, valida in vivo la capacidad anti-inflamatoria de Lactobacillus reuteri CRL1098 y sienta las bases para el desarrollo de un producto para la prevención y tratamiento de desórdenes inflamatorios.

El propósito del trabajo ha sido la investigación de las principales características limnológicas de la laguna La Brava (S.E. de la provincia de Buenos Aires). Las tareas de campaña se llevaron a cabo en un ano; las de laboratorio requirieron 15 meses. En la introducción se procura dar un esbozo del estado de los conocimientos limnológicos en Sud América. Los capítulos que siguen tratan los tópicos descriptos a continuación: *Generalidades: Descripción de los materiales gue se coleccionaron y de los métodos que se emplearon para estudiarlos. El autor cree que los cuerpos de agua de la provincia de Buenos Aires pueden ser clasificados en siete tipos, que difieren en origen, características químicas, sedimentos y productividad en plancton. La Brava pertenece al cuarto tipo, donde agrupa lagunas muy jóvenes y poco productivas, que ocupan la parte más baja de cuencas tectónicas. *Morfometría: Se comentan aquí el mapa batimétrico, los perfiles del fondo, la distribución de las profundidades, etc. y se aplican las fórmulas hidrométricas más importantes. *Sedimentación: Con cuadros de análisis químicos, granulométricos y de resumen. También se han tenido en cuenta los principales materiales autóctonos y alóctonos que contribuyeron a formar los limos del fondo. Se comentan detalladamente las razones por las cuales se adaptaron los métodos aplicados en este capítulo. A continuación se demuestra con varios ejemplos la imposibilidad de hacer la génesis del sedimento si no se conocen las condiciones del ambiente en gue se depositaron y maduraron los materiales originarios. *Química del agua: Se estudia el ciclo de las sales a través del año y luego se dá un análisis detallado de una de las muestras. *Principales ambientes: Se han diferenciado dos: de laguna marginal, entre la costa y el Scirpo-Jussieuaetum, y de laguna interna que ocupa el resto del cuerpo de agua. Se los compara en situación, desarrollo, caracteres del sedimento y factores ligados más importantes. *Otras observaciones: Se han hecho curvas para el ciclo anual del pH y del volumen de plancton.