Catálogo de publicaciones

Resumen temporalmente no disponible. La presente obra no cuenta con resumen provisto por el autor.

Las bajas temperaturas y las sequías representan dos de los principales factores limitantes del crecimiento y distribución de los árboles. El efecto del estrés sobre las plantas depende, entre otros factores, de los mecanismos de resistencia que posean. Las hojas son consideradas el “cuello de botella” en el continuo del transporte de agua suelo-planta-atmósfera, dado que pequeñas variaciones en el sistema vascular foliar podrían tener importantes consecuencias en el transporte hídrico a nivel de planta y limitar fuertemente la productividad y el éxito competitivo de las plantas. El objetivo de esta tesis fue caracterizar eco-fisiológicamente especies arbóreas típicas del dosel del Bosque Atlántico semideciduo (BAs) en términos de su resistencia al déficit hídrico y a las bajas temperaturas. Para esto se establecieron relaciones funcionales entre la fenología de las especies, sus propiedades hidráulicas y morfo-anatómicas foliares, sus tasas de crecimiento y economía de agua y carbono en diez especies del BAs en la provincia de Misiones. Los resultados de este trabajo mostraron que existen relaciones de compromiso entre los rasgos funcionales de las especies. Estas relaciones se ven reflejadas en las estrategias ecológicas de utilización de recursos y en la capacidad de resistir eventos de estrés generados por las bajas temperaturas o por los déficits hídricos. Las especies deciduas fueron capaces de tolerar en mayor grado los eventos de a sequía, disminuyendo su capacidad de resistencia a las bajas temperaturas. Las especies siempreverdes, en cambio, presentaron mecanismos que les permitieron tolerar las temperaturas congelantes, pero no así los déficits hídricos.

El creciente interés funcional y comercial de los productos probióticos fue la motivación de este trabajo de Tesis que estudiará espectos microbiológicos, propiedades relacionadas y herramientas para la cuantificación de microorganismos pertenecientes al género Bifídobacterium, uno de los géneros actualmente utilizados en la formulación de probióticos. Este trabajo consta de una Introducción que contiene una reseña histórica del concepto de probiótico y los criterios de selección de microorganismos para la formulación de productos. Se describirán aspectos tecnológicos y fisiológicos asociados a esta selección, detallando particularmente los conocimientos y evidencias científicas actuales de dos de ellos: la adherencia a epitelio intestinal y la competencia con microorganismos enteropatógenos. En el Capítulo I se presentará el desarrollo de un ensayo enzimático para la determinación cuantitativa de bacterias del género Bifídobacterium. Se detallarán las condiciones de optimización del ensayo y se demostrará su aplicabilidad en diferentes sistemas, tanto en modelos para estudios de adherencia como en la determinación de bifidobacterias en productos lácteos. En el Capítulo II se desarrollará un estudio sistemático de las propiedades superficiales de las bifidobacterias a fin de obtener información acerca de los mecanismos moleculares involucrados en la adherencia de estos microorganismos, considerada como un criterio de selección de bacterias para la formulación de probióticos. En el Capítulo III se estudiará otro aspecto de selección de bacterias probióticas: la competencia con enteropatógenos. Se analizará el mecanismo de acción de las bifidobacterias sobre bacterias patógenas aisladas de muestras clínicas en un modelo in vitro, compuesto por células epiteliales en cultivo. Finalmente se realizará una Discusión General acerca de las evidencias científicas aportadas en este trabajo de Tesis y las inquietudes para futuras investigaciones sobre probióticos.

Flourensia campestris (FC)y F. oolepis (FO), son arbustos nativos que crecen en zonas áridas de Córdoba, formando comunidades ('chilcales')de alto valor ecológico en estos ecosistemas. Estos ambientes se hallan expuestos a diversos factores de estrés abiótico a los que las plantas se han adaptado. Esta tesis se centró en dilucidar adaptaciones morfológicas y funcionales claves que les permitan a estas especies crecer y persistir en su ambiente natural. Los estudios arquitecturales, y exo- y endomorfológicos demostraron que ambas especies comparten características xeromórficas, lo cual les confiere ventajas adaptativas. Asimismo, la presencia de Micorrizas Arbusculares (MA)y Septados Oscuros (DSE)podría aumentar la competitividad de estas especies. FC y FO mostraron plasticidad en relación a su respuesta frente a variaciones en las condiciones ambientales entre ciclos de crecimiento. Las relaciones entre la biomasa total producida por cada tipo de módulo (vegetativo y reproductivo)y la biomasa en hojas resultó positiva y significativa. El número de hojas, y el número y tamaño de las semillas fueron las variables más afectadas. La germinación está controlada por la temperatura, y la viabilidad de las semillas se relacionó con las condiciones ambientales en las que se produjeron. La viabilidad se mantuvo relativamente constante durante un año, disminuyendo luego en forma abrupta, lo cual sugiere que a campo el banco de semillas dependería de los aportes continuos de la reproducción sexual. Los extractos acuosos de hojas de FC poseen un potente efecto inhibitorio sobre la germinación y el crecimiento de Lactuca sativa, mientras que los de FO sólo afectaron el crecimiento de tallo y raíz. Mediante fraccionamiento cromatográfico bio-guiado y técnicas espectrales se aisló e identificó el (-)-ácido hamanásico A ((-)AHA), como el principal metabolito responsable del efecto fitotóxico, siendo este trabajo el primero en reportar la actividad fitotóxica de (-)AHA y su presencia en FC. En FO el (-)AHA se encuentra en muy bajas concentraciones. En ambas especies, las características descriptas, les otorgarían ventajas adaptativas para su supervivencia, aumentando la competitividad en las comunidades de las que forman parte.

El maíz (Zea mays L.) presenta una gran diversidad de razas que pueden agruparse según sus características y usos diferenciales. La mayor parte del maíz sembrado en la provincia de Misiones corresponde a poblaciones locales, en las cuales el abandono de las tradiciones asociadas con su uso conduce a su erosión genética. La información acerca del comportamiento agronómico y características nutricionales de estos materiales es escasa. Con el objetivo de evaluar el potencial agronómico y nutricional de poblaciones de maíz de la provincia de Misiones, aportar al conocimiento de la diversidad genética, y contribuir a su conservación, revalorización y utilización, se estudiaron 16 poblaciones locales de diferente origen y fecha de colecta y 3 testigos comerciales exógenos utilizados en la región mediante descriptores agromorfológicos, de calidad nutricional y moleculares asociados al locus Opaco-2 (se incluyeron 2 testigos QPM exógenos portadores del gen opaco-2). Los resultados obtenidos permitieron detectar la existencia de variabilidad agromorfológica, molecular y nutricional. La diversidad mostró diferencias en cuanto a su origen y momento de colecta, reflejando procesos de selección, sustitución y/o contaminación con materiales comerciales, realzando la importancia del uso de métodos que combinen la conservación de recursos genéticos in situ con aquella realizada en bancos de germoplasma. Se identificaron materiales con características sobresalientes para concentración de proteína, almidón, aceite y composición de ácidos grasos, así como poblaciones que igualaron y/o superaron el desempeño agronómico de los testigos. La detección de materiales de buen comportamiento agronómico y con características de calidad diferencial, demuestra el potencial genético presente en el germoplasma local, lo que permitirá su revalorización como recursos de uso directo por parte de las comunidades autóctonas y facilitará la selección preliminar para su utilización en programas de mejoramiento. Teniendo en cuenta que no existe información previa para estas variables en el germoplasma local, ni trabajos previos de selección para dichos caracteres, los resultados obtenidos proveen información valiosa para el diseño de estrategias de conservación y uso de los recursos genéticos locales.

El flujo neto de agua es registrado minuto a minuto en el ciego de rata control y adaptada a una dieta rica en potasio; en el colon humano y en monocapas de líneas celulares HT29y CaCo2. Este flujo de agua es correlacionado con la diferencia de potencial, la corriente de cortocircuito y los flujos unidireccionales de Na+, Cl- y Rb+ con los siguientes resultados: 1) Existe en todos estos epitelios un flujo neto de agua absortivo que es función lineal de los gradientes osmóticos o hidraúlicos aplicados. La diferencia de potencial es positiva con una resistencia de aproximadamente de 100 λ.cm2, valores típicos de epitelios abiertos. 2) Una fración del flujo neto observado en condiciones basales está asociado al transporte de iones y es Na+ dependiente. 3) La presencia de un gradiente osmótico transepitelial induce un potencial de difusión positivo en el ciego de rata control, no ocurriendo lo mismo con un gradiente de presión hidrostática. 4) Otros mecanismos de transporte se distinguen en el ciego de rata cuando estas son alimentadas por 12 días con dieta incrementada en su concentración en KCl. 5) El ciego de rata es en este caso sensible al amiloride debido a la adaptación al potasio, no observándose este efecto en animales controles. 6) La absorción de agua en el colon humano es dependiente de Na+ y Cl-, siendo afectada por AMPcy norepinefrina. 7) En el colon humano existen epitelios espontáneamente secretorios; en ellos podría estar incrementada la concentración de AMPc intracelular. La norepinefrina 1.10^(-6) M, incrementa la absorción de agua, probablemente por inhibición del componente secretor del flujo de agua. 8) En monocapas celulares diferenciadas (CaCo2),existe un flujo neto asociado a transporte secretor que se correlaciona estrechamente con flujos netos secretorios de Na+ y Cl-. 9) En las células CaCo2, también se observó un transporte diferencial de manitol y glucosa a 37°C; este último 100 veces mayor es sensible al amiloride. 10) Las monocapas epiteliales de CaCo2 y HT29, en ausencia de Ca++ ven incrementado su flujo neto de agua hasta 10 veces, mientras que la resitencia transepitelial es no significativamente distinta de cero. Se observa por criofractura que en esta condición las bandas de las uniones estrechas están desorganizadas. Para su mejor comprensión esta tesis ha sido dividida en capítulos y en cada uno de ellos se muestran los resultados encontrados en cada línea experimental, dando a continuación una discusión detallada de estos. En el último capítulo, Conclusiones generales, se dan modelos hipotéticos que surgen de reunir estos datos y los de la literatura para proponer posibles mecanismos para el movimiento de agua e iones en el intestino grueso. Esta experimentación fue realizada en el Laboratorio de Biomembranas del Departamento de Fisiología y Biofísica de la Facultad de Medicina, UBA, bajo la dirección del Dr Mario Parisi, a quien quiero agradecer muy especialmente por su excelente disposición en todo momento para la discución de las ideas y el análisis de los resultados y por sobre todo enseñarme un riguroso desarollo de las ideas y del método científico. Cabe asimismo el agradecimiento a su entereza y comprensión en los dificiles momentos transcurridos en el período de realización de este trabajo. Parte de esta tesis fue realizada en Francia, en el Instituto Pasteur (París) y en Le Centre D'Etudes Nuclaires de Saclay (Saclay). Es por ello que quiero agradecer a los Dres. Jacques Bourguet, Pierre Ripoche y Daniel Louvard, quienes gentilmente dispusieron lo necesario para la realización de la experimentación en cultivos celulares y también por su hospitalidad durante mi estadía allí. Este agradecimiento abarca a mis colegas de ambos institutos que siempre me brindaron toda su hospitalidad y confianza. Quiero agradecer a Cristina Ibarra, por intermedio de quien meinicié en el estudio del transporte de epitelios, a Claudia Capurro y Ricardo Dorr, mis colegas y amigos durante todos estos años, con quienes hemos discutido primariamente estos resultados y sobre todo por su atenta lectura de este trabajo y su acertada critica que contribuyó a su mejoramiento. Agradezco a la Universidad de Buenos Aires y al Conicet los subsidios acordados, con lo que se solvento parcialmente este trabajo. Finalmente, debo agradecer a la Fundación Antorchas, la Fundación Roemmers y al INSERM(Francia), quienes subvencionaron parte de este trabajo de tesis.

Fil:Giménez, Hilda B.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.