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El objetivo de este trabajo fue caracterizar las respuestas electrofisiológicas de la célula receptora olfativa al ácido benzoico, presentes en las hembras de la mariposa del gusano de la seda Bombyx mori. Nuestros estudios permiten concluir que la célula receptora al ácido benzoico es un receptor especialista ya que responde máximamente a su compuesto llave y tiene un espectro idéntico para compuestos menos efectivos. Mediante estudios de estructura-actividad con substituyentes halogenados del ácido benzoico, se determinó que un factor crítico para el reconocimiento del sitio receptor es la generación de un efecto inductivo por el halógeno substituyente. Este efecto es mayor para halógenos más electronegativos (flúor) y para la posición meta. Cuando fue estimulada con iodo benzeno, la célula receptora al ácido benzoico respondió con una inhibición durante el estímulo y con una excitación post-estímulo. En base a diversos experimentos propusimos un modelo para la acción de sustancias excitatorias e inhibitorias a nivel receptor olfativo. En dicho modelo, sustancias como el iodo benceno actuarían directamente sobre los canales iónicos (proceso inhibitorio rápido y transitorio, no dependiente de segundos mensajeros), o sobre el sitio receptor del ácido benzoico (proceso excitatorio posterior y dependiente de segundos mensajeros). La célula receptora al ácido benzoico mostró un aumento de su actividad basal en el aire del laboratorio sin filtrar. Por medio de experimentos combinados de cromatografía gaseosa- electroantenograma y registro de células únicas encontramos que dicho aire contenía ácido benzoico y benzaldehido (estimulantes de la célula receptora al ácido benzoico en la sensilia tricodea) y nonanal (estimulante de la sensilia coelocónica). El umbral de la célula receptora al ácido benzoico se halla por debajo de una carga de estímqu de 0.01 μg de ácido benzoico por papel de filtro. Se analizó la composición química del meconio, producto de excreción de la pupa y único estímulo natural capaz de activar a la célula receptora del ácido benzoico. El meconio está compuesto por una gran cantidad de ácido succínico y ácido benzoico y cantidades menores de otros ácidos. La cantidad estimada de ácido benzoico presente en el meconio de machos y hembras fue 8.4 μg y 4.2 μg por 100 μl de meconio, respectivamente. De los componentes hallados, el único componente activador de la célula receptora al ácido benzoico fue el ácido benzoico. Sin embargo cuando éste fue adicionado al meconio, la respuesta disminuyó significativamente. Concluimos que el meconio obstruye estructuralmente el papel activador del ácido benzoico. Así, el ácido benzoico relevante para la hembra de B. mori no es aquel que está presente en el meconio. Fuentes alternativas de ácido benzoico en la planta de mora serían los frutos mismos de la mora y/o la reacción de defensa de la hoja que resulta en la producción de ácido benzoico como fitolexina. En ambos casos el ácido benzoico sería señal de buena “calidad”de planta y por ende de sustrato adecuado para la oviposición. Estas respuestas pueden sin embargo haber sido modificadas por innumerables generaciones de selección y cultivo de B. mori en sericultura.

En el presente estudio se ha analizado la variación de proteinas de reserva y enzimáticas en especies del género Bulnesia mediante electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida. Los resultados del análisis electroforético de proteinas seminales en las 8 especies del genero, revelaron la existencia de dos grupos de cuatro especies cada uno que correspondieron a los dos subgéneros reconocidos en una revisión taxonómica (Palacios & Hunziker, 1984). Estos están constituidos por B. schickendantzii y B. foliosa, B. retama y B. chilensis (subgénero Bulnesia) agrupadas en la parte inferior del fenograma (Figura 4) y por B. arborea, B. carrapo, B. bonariensis y .B. sarmientoi (subgénero Gonopterodendron), reunidas en la parte superior de la misma figura. A su vez, dentro de las agrupaciones subgenéricas hay pares de especies con elevada similitud, tales como B. arborea-B. carrapo, B. foliosa-B. schickendantzii y B. retama-B. chilensis. Estos pares de especies afines también se reconocieron a través de métodos de ordenación (componentes principales). Las especies, delimitadas en un espacio tridimensional, se situaron próximas entre si de acuerdo a los dos subgéneros reconocidos taxonómicamente y dentro de cada subgénero, se situaron más próximos los pares más similares (Figura 6). El estudio de homologias de las proteinas seminales también señaló que B. bonariensis y B. sarmientoi fueron los taxones que se diferenciaron por una mayor distancia taxonómica promedio dentro del subgénero Gbnopterodendron, siendo ésta de magnitud muy poco menor que la que separa ambos subgéneros (Figura 4). La escasa homologia proteica indica que se trataría de entidades relativamente aisladas, lo que concuerda con el hecho que B. bonariensis es el único octoploide, siendo las demás especies todas diploides (Poggio, 1977b, 1980). Por otro lado B. sarmientoi es muy especializada en cuanto a su exomorfologia, ya que es la única especie que presenta reducción extrema del número de foliolos (2) y carpelos (3) (Crisci et al., 1979). Además, dentro del subgénero Gonopterodendron con semillas exalbuminadas, es la única especie del grupo que posee flores pequeñas, actinomórficas y estilo recto. Es interesante también señalar que los pares de especies con mayores similitudes también fueron señalados en un estudio numérico en el cual se utilizaron caracteres exomorfológicos (Crisci et a1., 1979) demostrando la congruencia de los datos proteicos con la exomorfologia. El estudio de la variación isoenzimática fue realizado en tres especies del Subgénero Bulnesia: B. foliosa, B. schickendantzii y dos poblaciones de B. retama (en algunos sistemas isoenzimáticos tres poblaciones de esta última especie). Los sistemas isoenzimáticos analizados fueron: aminopeptidasa, alcohol dehidrogenasa, glutamato dehidrogenasa, malato dehidrogenasa, superóxido dismutasa, 6-fosfogluconato dehidrogenasa, esterasa y aspartato aminotransferasa; en total se analizaron 24 loci. En cada una de las poblaciones se determinó el número de alelos de cada locus, se calcularon las frecuencias alélicas para determinar si las frecuencias genotipicas observadas se ajustaban a las esperadas para el equilibrio de Hardy-Weinberg (Tabla 25). Se determinaron también parámetros diferentes para comparar la variabilidad genética intra y/o interpoblacional: porcentaje de loci polimórficos , frecuencia media esperada de heterocigotas por locus (Nei, 1975), número medio de alelos por locus (Crow y Kimura, 1970) (Tabla 26) e indices de fijación F de Wright (Tablas 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 22 y 23). Se calcularon además los indices de identidad genética media (I) y distancia genética (D) (Nei, 1972) (Tabla 27). En base a la matriz de distancias genéticas, utilizando el método de análisis de agrupamientos de medias no ponderadas (UPGMA) se construyó el fenograma correspondiente (Fig. 34A). Los valores de identidad genética entre el par de especies B. schickendantzii y B foliosa (I=0.83) están en el orden sugerido para especies cogenéricas por Thorpe (1982), y los valores de identidad entre las dos poblaciones de B. retama (I=0.86) están comprendidas dentro de los limites para especies coespecificas (Fig. 34B, Tabla 27). El valor de identidad genética entre estas dos poblaciones coespecificas sería consecuencia del efecto fundador ya que la población peruana de B. retama habria sido originada por transporte a larga distancia, a partir de una o unas pocas semillas transportadas por aves migratorias provenientes de Argentina. El análisis de la reducida variabilidad presentada por la población de Perú, sería el resultado de una serie de sucesos: efecto fundador, "cuello de botella", deriva, y caracteristicas de la biologia reproductora (autocompatibilidad, apoyada por evidencias indirectas y a través de los indices de Fijación de Wright, los cuales han señalado una desviación de las frecuencias de heterocigotas observados con respecto a los esperados de acuerdo a Hardy-Weinberg). Todos ellos junto con la posibilidad de nuevas presiones de selección en un ambiente nuevo, han jugado probablemente un importante papel en la determinación de la estructura genética de esta población. El estudio de esta población por lo tanto constituye un aporte más al conocimiento de la variación y estructura genética de plantas colonizadoras. La congruencia entre los resultados provenientes de variados tratamientos con los datos electroforéticos provenientes de proteinas (enzimáticas o no), ha mostrado una vez más, el valor y la confiabilidad de esta técnica como un método adecuado para evaluar similitudes y establecer filogenias.

En esta tesis se estudió la reacción de reducción de oxígeno (RRO) sobre electrodos de óxido de Ti modificado con Pt, en una solución de 0,010M HClO4 a 25°C. El óxido de Ti fue crecido potenciodinámicamente sobre un sustrato de vidrio/Ti (electrodo vidrio/Ti/TiO2). Se empleó la técnica de electrodeposición sobre el sustrato de vidrio/Ti previo al crecimiento del óxido, con el método de potencial constante y a diferentes tiempos de deposición (1 ≤ td ≤ 10 segundos). La mejor respuesta electroquímica se obtuvo con el electrodo de Ti/Pt/TiO2 (td = 10 segundos), que indicó un potencial de inicio de la RRO de 0,86V vs ENH (electrodo normal de hidrógeno). Los resultados obtenidos por voltamperometría cíclica revelan la estabilidad del óxido de Ti en presencia del Pt, bajo las condiciones experimentales establecidas en la presente tesis.

Se construyó una celda con electrodo de pared-tubo (EPT) para el estudio electroquímico de sisternas hidrotérmicos hasta 215°C y 100 bar. La celda contiene un chorro incidente sobre una pared (electrodo) donde las condiciones hidrodinámicas en la región de estancamiento están bien definidas y son equivalentes a las del electrodo de disco rotatorio y el EPT tiene accesibilidad uniforme. Se estudiaron cuatro cuplas redox: Fe2+ / Fe3+, I2 / I-, quinona / hidroquinona y Fe(CN)6(3-) / F(CN)6(4-). Se obtuvo información de transporte en solución (coeficientes de difusión) y de cinética de transferencia de carga (coeficientes de transferencia de carga y constantes cinéticas). Se determinaron los parámetros de activación de dichos procesos. Finalmente se analizó la información obtenida teniendo en cuenta modelos de transporte en solución y de transferencia de carga.

La presente investigación trata pués, de la embiología de las siguientes especies, que pertenecen a la familia de las Loasaceae: Blumenbachia catharinensis, B. hieronymi, B. insignis, B. urens, Caiophora cernua, C. silvestris, Loasa bergii, L. triphylla, L. vulcanica y Mentzelia laevicaulis. Las flores son pentámeras, hermafroditas y actinomórficas. Se encuentran solitarias en la axila de las hojas o agrupadas en inflorescencias cimosa. Los sépalos son persistentes, y los pétalos son cuculados con excepción del género de la Mentzelia. Los estambres son indefinidos, reunidos en fascículos opuestos a los pétalos. Alternando con los pétalos se encuentran escamas petaloides cuculadas que funcionan como nectarios y que contienen estaminoidios. Sólo faltan estas estructuras en el género de la Mentzelia. El ovario es ínfero, unilocular con tres o cinco placentas parietales sobre las que se insertan numerosos óvulos pédulos o dispuestos horizontalmente. El fruto es una cápsula multiseminada recta o retorcida en espiral. Los órganos florales se encuentran recubiertos de tricoma de diversos tipos. Los óvulos son anátropos o hemianátropos, unitegumentados y tenuinucelados. Carecen de hacecillos vasculares. Algunas veces las células de la parte calazal se organizan en una hipóstasis. El tegumento comienza a diferenciarse casi al mismo tiempo en que la célula arquesporial. El número de capas del tegumento varía entre 7-15 cuando el saco embrionario ha alcanzado ya la madurez. En todoso los géneros, excepto el de la Mentzelia, las células de la epidermis externa del tegumento aumentan de volumen y sus núcleos pueden alcanzar un tamaño considerable. La parte más interna del mismo aparece como un endotelio cuya formación comienza ya durante la diferenciación de las tétradas de megasporas. El arquesporio es unicelular y la arquespora funciona directamente como la célula madre de las megasporas sin formación de células parietales. El tegumento crece sobre ella originándose así un largo canal micropilar curvado hacia la placenta. La célula madre de las megasporas se divide dos veces sucesivas dando lugar a la formación de una tétrada de megasporas. En la mayor parte de los casos las tétradas son lineares, pero ocasionalmente se han observado también tétradas en forma de T. En algunos casos se desarrolla más de una célula madre y aunque sólo una forma el saco embionario, la otra es también capaz de experimentar cierto desarrollo ulterior. La megaspora calazal invariablemente origina el saco embionario. Mediante sucesivas divisiones forma un saco embrionario de tipo Polygonum que muestra la organización habitual. Las antípodas son efímeras o pueden persistir hasta que varias células endospermáticas se hayan formado. En general los restos de una de las sinérgidas persisten aún después de la fucundación. La otra probablemente se destruye durante la entrada del tubo polínico. En el género de la Mentzelia las sinérgidas se desintegran sin formar células y la ovocélula se encuentra adherida lateralmente en la estrangulación que separa la parte micropilar del saco embrionario de la parte calazal. Sólo la parte media o la parte calazal del saco se encuentra tapizada por un endotelio y en la mayoría de los casos las células tegumentarias que tapizan la parte micropilar del saco embrionario poseen gruesas paredes. En todos los casos el endosperma es Celular. La división del núcleo endospermático primario separa una cámara calazal de otra micropilar. El núcleo de esta última cámara no contribuye a la formación del endosperma propiamente dicho, sino que da lugar a un haustorio micropilar. El endosperma propiamente dicho se forma a partir de divisiones que proceden de la cámara calazal. Esta cámara separa también después de la segunda división, un haustorio calazal. Algunos de los estratos celulares en la parte superior de esta cámara dan lugar a un tejido de función aparentemente haustorial. En la Mentzelia laevicaulis ambos haustorios micropilar y calazal se forman a partir de la segunda división en la cámara micropilar y calazal respectivamente. El haustorio micropilar puede ser enteramente cenocítico o algunos de sus núcleos pueden encontrarse separados por paredes y en ciertos casos puede presentar ramificaciones. El haustorio micropilar y también el tejido de aparente función haustorial, derivado de los estratos celulares superiores de la cámara calazal persisten en la semilla. El haustorio calazal puede ser celular o uninucleado y puede presentar además ramificaciones. Se reabsorbe durante el desarrollo del endosperma y del embrión. La zigota se alarga después de la fecundación formando un largo tubo. El embrión pertenece al tipo Solanáceo. La primera división de la zigota es transversal dando lugar a una célula apical y una célula basal. Una nueva división en ambas células da lugar a una tétrada linear. El embrión posee una radícula recta y dos cotiledones laminares. De los 7-15 estratos celulares tegumentarios presentes en el óvulo, solo unos pocos permanecen en la semilla. La epidermis posee espesamientos que también se observan ocacionalmente en las capas hipodérmicas. La pared de la antera consiste en un endotecio que posee espesamientos fibrosos, dos capas intermedias, que son en general efímeras y el tapete que es del tipo secretorio con células bi o multinucleadas. La formación de tétradas es de tipo simultáneo y la formación de la pared tiene lugar por medio de una estrangulación. El polen al tiempo de la dehiscencia es trinucleado. Las características embriológicas son similares a las encontradas en las familias de las gamopétalas, mostrando una estrecha afinidad con las Hydrophyllaceae y las Boraginaceae.

Fil:Galati, Beatriz Gloria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El objetivo general de este trabajo fue estudiar el desarrollo del grano de polen, del megagametófito, el endosperma y el embrión, como así también la anatomía de las estructuras esporofíticas relacionadas con estos procesos, en diez taxones de Poaceae, correspondientes a las tres subfamilias (Pooideae, Chloridoideae y Panicoideae) más ricamente representadas en la región de la depresión del Salado, Provincia de Buenos Aires. Los objetivos particulares fueron: ● Describir la Microsporogénesis y la Microgametogénesis. ● Realizar el estudio ontogenético ultraestructural de los cuerpos de Ubisch con el fin de aportar datos que ayuden a dilucidar su posible función y participación en la formación de la pared del grano de polen. ● Describir la Megasporogénesis y Megagametogénesis. ● Realizar el estudio ultraestructural del saco embrionario pre- y post-fertilización, a fin de aportar datos sobre el rol que cumplen las antípodas. ● Describir la Endospermogénesis, la Embriogénesis, el desarrollo total de los tegumentos seminales y las capas del pericarpio del fruto. ● Realizar el estudio anatómico del óvulo y del microsporangio. ● Relacionar las características embriológicas particulares de los taxones con las subfamilias a las cuales pertenecen. Todas las especies estudiadas, a excepción de Paspalidium geminatum, presentan un desarrollo normal del grano de polen, el cual se libera en estadio tricelular. La ontogenia del megagametófito corresponde al tipo Polygonum, con antípodas haustoriales bien desarrolladas y en número variable de acuerdo a las especies. En Paspalidium geminatum se observó la formación de varios gametófitos femeninos en distintos estadios de desarrollo en un mismo óvulo. En Stenotaphrum secundatum y Melica brasiliana son pocos los óvulos que forman megagametófitos viables, y una gran cantidad de óvulos abortivos fue observada. Por lo tanto, estas tres especies podrían tener una tendencia a un desarrollo de tipo apomíctico. El presente trabajo constituye un aporte original debido a que nada se conocía previamente sobre la embriología de estas especies nativas de Argentina. También representa una contribución a favor del desarrollo socio-económico del país, pues aporta información sobre la reproducción de algunas gramíneas útiles, nativas de una zona relevante desde el punto de vista de la producción agropecuaria en la Provincia de Buenos Aires. Dichos datos podrán ser de aplicación para proyectos donde genetistas y otros investigadores se dediquen al mejoramiento de pastizales.