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Teniendo de marco estos procesos que inciden en la problemática del pecado y el delito en la Europa bajomedieval, el objetivo general de la presente tesis radica en analizar la configuración de las nociones de pecado y crimen tomando como punto de partida y anclaje el corpus legislativo de Alfonso X el Sabio. La Castilla bajomedieval se revela a este respecto como un buen escenario de trabajo. Esta región presencia una de las grandes codificaciones del derecho del siglo XIII. El intenso trabajo jurídico de la Corona de Castilla en este período se traduce en un caudal de fuentes de singular riqueza. Por otra parte, genera gran interés la coexistencia espacial de culturas radicalmente distintas —cristianos, judíos, mudéjares— que caracteriza a esta región. Cabe recordar que judíos y moros no eran concebidos en el siglo XIII como pueblos de religión diferente sino como pueblos de ley diferente. Por otra parte, la convivencia entre estas comunidades atraviesa desde el siglo XIII una creciente tensión social y lo cultural con una agudización de actitudes intransigentes.

Las moléculas de adhesión han sido implicadas en la metástasis y la progresión tumoral. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la expresión y el rol de las moléculas de adhesión, en particular PECAM-l/CD31 en las células tumorales humanas. PECAM-l/CD31 es una glicoproteína de 130kDa perteneciente a la superfamilia de Inmunoglobulinas. Se encuentra presente en células endoteliales, plaquetas y en la mayoría de los leucocitos. Sin embargo, en este trabajo se demostró, por inmunofluorescencia y Western blot, la presencia de la molécula en líneas de células de melanoma y de adenocarcinoma. La expresión cuantitativa y cualitativa de PECAM-l/CD31 sobre las células tumorales es diferente a la de los leucocitos y células endoteliales, ya que en las células tumorales la expresión es menor, y además, los anticuerpos monoclonales dirigidos contra los dominios-2 y —6 no reaccionan con la molécula. La expresión de PECAM-l/CD31 sobre la superficie de las células tumorales fue modulada por interacciones célula-célula, siendo mayor en las células provenientes de cultivos sub-confluentes y en las células desprendidas espontáneamente de monocapas de células tumorales confluentes. La fijación y la permeabilización de las células tumorales reveló la presencia de reservorios intracelulares de PECAM-l/CD31. Por otro lado, la expresión de PECAM-l/CD31 aumentó y disminuyó en presencia de citocalasina B y brefeldina A, respectivamente. Las células de melanoma se adhirieron a células endoteliales y a proteínas de matriz extracelular. En el primer caso, la adhesión fue parcialmente mediada por PECAM-l/CD31, ya que la transfección de las células de melanoma con un oligonucleótido antisentido para PECAM-l/CD31, disminuyó la expresión de esta molécula y su adhesión. Lo mismo sucedió al tratar las células tumorales con anticuerpos dirigidos contra los dominios-1, —3 y —4/—5. En cambio la adhesión a las distintas proteínas de matriz extracelular fue mediada por las integrinas α1 (para colágeno IV); α3 (para matrigel, laminina, colágeno IV y colágeno I); α4 y α5 (para fibronectina); α6 (para matrigel) y β1 (para matrigel, colágeno IV, colágeno I y fibronectina). Finalmente, la coligación de PECAM-l/CD31 con anticuerpos dirigidos contra el dominio 3 en las células de melanoma y adenocarcinoma, tiene un efecto inhibitorio sobre la proliferación celular. Los resultados obtenidos en el presente trabajo, indican que existe un reservorio intracelular de PECAM-l/CD31 en células tumorales que probablemente module la expresión de CD31 en la superficie celular. Además sugieren un rol de esta molécula en el crecimiento tumoral y en la metástasis.

Se optimizaron las condiciones de fermentación en medio líquido (FEL)y sólido (FES) para obtener extractos con alta actividad pectinliasa y poca pectinesterasa a partirde la cepa Aspergillus niger 148, seleccionada entre 165 cepas. Se caracterizaron cinéticamente las fermentaciones para: azúcares reductores y proteínas en el medio de fermentación; biomasa (ajustó al modelo logístico siendo inversa a la evolución del pH); producción de las tres enzimas del complejo pectinolítico y conidiación (en FES) En FEL,se estudió el efecto combinado de la aw y la represión catabólica por glucosa, observándose efectos diferencialesen cada enzima. Los pesos moleculares de las pectinasas se determinaron por SDS-PAGE siendo: pectinliasa: 48,2 kDa; poligalacturonasa: 39,1 kDa; pectinesterasa: 26,9 kDa. Se utilizóun diseño experimental de red de Doehlert y una metodología de superficies de respuesta, para comparar el efecto de pH, aw y tiempo en la producción de pectinasas por FES y FEL. Una FES realizada a aw 0,981 y pH 7 por 3 días permitió obtener un extracto rico en pectinliasa [65% de las proteínas totales). Se caracterizo la entalpía y temperatura de desnaturalización y la temperatura de transición vítrea de la pectinliasa deshidratado y parcialmente purificada en función de la humedad . Estudios cinéticos comparativos de la desnaturalización y pérdida de actividad pectinliasa del extracto deshidratado o en solución, indicaron que el principal mecanismo de pérdida de actividad enzimótica en solución sería la desnaturalización a diferencia del sistema deshidratado, donde la pérdida de actividad de la enzima no se vio asociada con la desnaturalización