Catálogo de publicaciones

Fil:Leiguarda, Ramón Héctor. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La presencia de escherichia coli fue investigada en 120 muestras de carne de cerdo provenientes de 2 frigoríficos, 5 supermercados y 5 carnicerías, de distintos puntos comerciales de la provincia de Córdoba y categorizados según su calidad higiénica sanitaria observada, en categoría 1 (muy bueno), 2 (bueno) y · (Regular). Un total de 131 aislamientos de E. coli fueron seleccionados, identificados y analizados mediante el método de difusión en disco de Kirby-Bauer para determinar su resistencia a un panel de 18 antimicrobianos. Los estudios microbiológicos se realizaron de acuerdo a al información proporcionada por el National Comittee for Clinical Laboratory Standards para microorganismos aislados de animales para resistencia y sensibilidad. Los porcentajes de resistencia total, considerando los tres tipos de establecimientos involucrados, oscilaron entre el 0% mínimo (para Ceftiofur) y máximos del 61,3% para trimetoprima-sulfametoxazol en carnicerías y del 62,8% para estreptomicina en frigoríficos. Los valores promedios fueron máximos para las siguientes drogas en orden decreciente: trimetoprima-sulfametoxazol, Tetraciclina, estreptomicina, sulfisoxazol, ampicilina, cefalotina, doxiciclina y nitrofurantoína. Por otro lado, los valores deresistencia a ciprofloxacina y tetraciclina fueron significativamente más altos en supermercados que en frigoríficos, los de estreptomicina se observaron significativamente más altos en frigoríficos y carnicerías y los de trimetoprima-sulfametoxazol en supermercados y carnicerías (p< 0.01). Teniendo en cuenta los distintos establecimientos faenadores y locales de comercialización con sus respectivas categorías se observaron los siguientes resultados para los antibióticos analizados: en los supermercados, la resistencia fue significativamente mayor para doxicilina y tetraciclina para los establecimientos clasificados en la categoría 3 (regular) y para sulfametoxazol y trimetoprima-sulfametoxazol en los establecimientos de categoría 2 (buena) (p < 0.05). Además en las carnicerías, se observaron niveles estadísticamente superiores sólo para fosfomicina y nitrofurantoína en aquellos locales de categoría 3 (regular) (p < 0.05). Se registraron 5 categorías de patrones de resistencia (simple, doble, triple, cuádruple, y quíntuple o mayor). Los patrones simple (resistencia a un sólo antibiótico) y doble (a 2 drogas) fueron los más frecuentes, con el porcentual del 41 % y del 30% entre las cepas de E. coli resistentes aisladas en todos los establecimientos, aunque no existieron diferencias significativas en las comparaciones entre los establecimientos (p > 0.05). Sólo el 3,8% de las cepas manifestó un patrón de resistencia quíntuple o mayor. Con el análisis multivariado de varianza se precisó que las variables fosfomicina, tetraciclina y trimetoprima-sulfametoxazol en los frigoríficos, ampicilina, cefalotina, doxiciclina, nitrofurantoína, sulfadimetoxina, sulfisoxazol, trimetoprima-sulfametoxazol y tetraciclina en los supermercados, y doxiciclina, fosfomicina, nitrofurantoína, tetraciclina y sulfisoxazol en las carnicerías, son factores de riesgo significativos de resistencia, es decir que las cepas de E. coli resistentes a estas variables o antibióticos, tienen probabilidad significativamente mayor de aparición en los establecimientos de deficientes condiciones higiénico-sanitarias que en aquellos con aplicaciones de normas bromatológicas establecidas.

Fil:Türk, Ernesto F.H.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Freijo, José María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El estudio de la radiación γ en el rango de energías alrededor de los 10¹² eV (1 TeV) se ha convertido en un campo de la Física de gran actividad con la instalación y puesta en funcionamiento de nuevos y más sensibles instrumentos y se encuentra en posición de responder algunas de las más importantes preguntas acerca del origen del flujo observado de radiación cósmica, la naturaleza de los procesos que permiten acelerar las partículas hasta veolcidades relativísticas y de las fuentes generadoras de fotones energéticos y las interacciones que ellos sufren, así como muchas otras. Conocer y entender esta nuva banda del espectro electromagnético nos proveerá nuevas ideas de la forma en que el universo funciona y cómo estos objetos son capaces de producir tales energías dentro del marco de las teorías fisicas actuales y los límites que ellas imponen. Es en este marco que la detección de cualquier fuente emisora de radiación γ en el rango de los TeV adquiere singular importancia y la validación por grupos independientes, altamente prioritaria. Existen numerosos reportes de fuentes que no han sido confirmados posteriormente, aunque muchas de ellas fueron intensivamente observadas por otros instrumentos; sin embargo, existen unas pocas fuentes que tienen confirmación independiente de más de un grupo, como la Nebulosa del Cangrejo y AE Aquarii. Este último sistema, una variable cataclísmica, ha sido detectado por dos grupos, Durham y Potchesftroom, ambos ubicados en el hemisferio sur; pero también es visible desde el hemisferio norte, lo que motivo que sea observada por el Observatorio Whipple en un intento de determinar la validez de los resultados anteriores y poder comparar el comportamiento de los tres detectores. En el Capítulo 1 se encontrará una revisión de la astronomía de radiación γ en Alta y Muy Alta Energía, así como las técnicas de detección y producción y absorción de fotones γ. También se desarrollan los principios físicos de la radiación Cerenkov, así como su detección. En el Capítulo 2 se encontrará la Técnica Atmosférica Cerenkov, el Observatorio Whipple, donde las observaciones que componen esta tesis fueron obtenidas, la Técnica de Imágenes y Métodos de Análisis utilizados en este trabajo. En el Capítulo 3 se introduce un nuevo método para evaluar el espectro de energías de una fuente, la Relación de Dureza. En el Capítulo 4 se desarrolla todo lo concerniente a AE Aquarii, previas detecciones y los resultados obtenidos en esta tesis. El Capítulo 5 desarrolla las conclusiones generales y se hace una breve revisión del futuro de la Astronomía de Radiacion γ y de MAE. Se desarrollan una serie de Apéndices: El Apéndice I define los parámetros utilizados para analizar los datos; el Apéndice II resume las observaciones obtenidas sobre AE Aquarii; el Apéndice III es un estudio preliminar sobre un nuevo púlsar, PSR1951 +32 y el Apéndice IV muestra los gráficos resultantes de los extensos análisis realizados sobre AE Aquarii.

En general, los procesos que conducen a la evolución de las galaxias se pueden dividir en: internos, por ejemplo, eventos de formación estelar, supernovas y externos, por ejemplo, interacciónes de marea, barrido por presión cinética, fusiones. Las observaciones de hidrógeno neutro (HI) son una excelente herramienta para estudiar las interacciones entre galaxias o entre galaxias y su entorno. La línea de 21cm (HI) proporciona información espacial y cinemática del gas. Nos permite derivar la masa total del HI gas en una galaxia, estudiar las fases fría y tibia del medio interestelar y, además, señalar las ubicaciones de posibles regiones de formación estelar. Usando las observaciones de archivo del Autralia Telescope Compact Array y nuevas obtenidas con el Giant Metrewave Radio Telescope, analizamos galaxias que pertenecen a diferentes entornos. Estudiamos, en primer lugar, la región central del grupo de galaxias IC 1459. El grupo contiene alrededor de diez galaxias; la mayoría de ellas son galaxias de tipo tardío, pero la central, la cual da nombre al grupo, es una galaxia elíptica de tipo temprano. Nuestra búsqueda de emisión extendida de HI utilizando datos de archivo de ATCA reveló la presencia de un complejo de nubes cerca de la galaxia IC 1459. También, se observa en este grupo la distribución de morfología-densidad, siendo las galaxias NGC 5264 y NGC 7418A deficientes en HI. Proponemos entonces, que el complejo de nubes de HI se originó principalmente por las interacciones de mareas entre las galaxias IC 1459, NGC 5264 y NGC 7418A. Continuamos nuestra investigación estudiando la galaxia enana KK 69. Esta galaxia es parte de un pequeño grupo ubicado cerca de la región de baja densidad, Gemini-Leo. Encontramos un desplazamiento entre la región de alta densidad estelar observada en las imágenes ópticas, y la región de alta densidad del gas HI detectada con el GMRT. Propusimos que KK 69 es una galaxia enana de transición, que evoluciona de una galaxia enana rica en gas (enana irregular) a una enana pobre en gas (enana esferoidal). Por primera vez, en esta galaxia, se pudo llevar a cabo la descomposición del medio interestelar en las fases fría y tibia del gas neutro. Aproximadamente el 19% de la masa total del HI se encontró en la fase de fría; este valor excepcional es una característica común con la galaxia enana Leo T perteneciente al Grupo Local. Aunque la componente fría del gas es el combustible principal para el proceso de formación de estrellas, la galaxia no está formando estrellas en la actualidad. Terminamos nuestro proyecto estudiando la galaxia Fourcade-Figueroa, una galaxia espiral vista de canto, situada detrás del lóbulo sur de la galaxia Cen A. Combinamos los datos ATCA disponibles con las nuevas observaciones dedicadas en GMRT en el plano de visibilidades, definidas por las proyecciones de las líneas de conexión entre pares de antenas. El disco de la galaxia está deformado en la región noroeste de la galaxia. Modelamos la distribución de masa de la galaxia a partir de la curva de rotación obtenida con nuestros datos y encontramos que el halo de materia oscura que mejor ajusta es el de Navarro, Frenk y White.

La supervivencia de las células neuronales depende de un estricto balance entre diversos factores pro y antiapoptóticos. La pérdida de este delicado equilibrio puede conducir a la muerte celular por apoptosis como se manifiesta en accidentes cerebro-vasculares y en enfermedades neurodegenerativas. La muerte neuronal puede ocurrir en forma directa, donde el daño per sé induce la disminución del número de células viables o bien indirectamente, involucrando la activación de células de la glía, las cuales liberan citoquinas proinflamatorias, nitritos y especies reactivas del oxigeno, agentes causantes de la degeneración neuronal. La deficiencia de oxígeno (hipoxia) en el sistema nervioso central es un factor de estrés que induce múltiples respuestas. A nivel celular, la exposición a hipoxia puede inducir una desregulación metabólica con pérdida de la homeostasis y muerte celular. Además, durante dicho proceso se desarrolla un microambiente proinflamatorio generado por la activación de la glía, lo cual afecta indirectamente a las células neuronales. Dado el impacto de las secuelas que pueden originarse, se desarrollaron diferentes líneas de investigación con el fin de prevenir el daño neuronal y sus consecuencias. La eritropoyetina (Epo) es una citoquina pleiotrópica, originalmente definida por su rol en la eritropoyesis. Sin embargo, el hallazgo de receptores específicos en tejidos no hematopoyéticos, expandió su acción biológica y farmacológica. La utilización potencial de los efectos no hematopoyéticos de la eritropoyetina recombinante es uno de los aspectos más promisorios en la investigación de la acción farmacológica de esta hormona. De hecho, la Epo ha sido asociada a la prevención de apoptosis de células neuronales sometidas a agresiones tales como privación de nutrientes o factores de crecimiento. Si bien se propone a la Epo como factor de protección celular frente a estímulos apoptóticos, poco se sabe acerca de la modulación de su acción en diferentes estadios de diferenciación neuronal. Por otro lado, resultados de investigaciones utilizando diversos modelos experimentales le han adjudicado a la Epo una acción antiinflamatoria, aunque aún se desconoce el rol que puede presentar este factor sobre la microglía ante un daño tisular. En este trabajo se planteó, como objetivo general, el estudio del efecto modulador y/o neuroprotector de la Epo frente a daños inducidos por hipoxia y por otros estímulos. Para el estudio de la acción antiapoptótica de Epo frente al daño por hipoxia se utilizó un modelo in vitro de cultivos de la línea de origen neuronal SH-SY5Y. Además de disminución de la viabilidad celular y aumento significativo de la apoptosis, la exposición a hipoxia indujo alteraciones morfológicas tales como disminución del área celular y pérdida de la adhesión celular en cultivos indiferenciados. Como resultado del pretratamiento de estos cultivos con Epo, fueron prevenidos los efectos de la posterior exposición a hipoxia. En esta acción antiapoptótica de la Epo se encontraron involucrados la vía mediada por PI3K y el incremento de los niveles de los factores antiapoptóticos Bcl- 2 y Bcl-xL. Actualmente, se reconoce que los mecanismos de muerte celular son marcadamente diferentes en el cerebro inmaduro y en desarrollo por lo que, en el siguiente paso de este trabajo se realizó una comparación de la acción de Epo entre estadios inmaduro y maduro de células de origen neuronal. Los resultados obtenidos sugieren que la diferenciación celular, mediada por el agente diferenciador ácido retinoico (atRA), aumenta el umbral de resistencia celular ante diferentes agentes proapoptóticos, como staurosporina (STP), TNF-α o hipoxia. Este hallazgo se encontró asociado a la activación de la vía de supervivencia celular PI3K y a una regulación positiva del factor antiapoptótico Bcl-2, lo que explicaría, al menos parcialmente, la disminución de la susceptibilidad celular. En los cultivos de células neuronales diferenciadas con atRA no se pudo detectar un efecto protector de la Epo frente a la exposición a STP. Esta observación coincidió, a su vez, con la ausencia de modulación de los factores Bcl-2 y Bcl-xL por Epo. Además, la acción de Epo fue afectada por la modulación negativa de la expresión de su receptor observada en los cultivos diferenciados por atRA. Como se mencionó anteriormente, la inflamación se encuentra involucrada de manera crónica en enfermedades neurodegenerativas como también en procesos de isquemia cerebral y es una de las principales causas de muerte neuronal. En base a trabajos previos en los que se reportó un efecto antiinflamatorio de la Epo en distintos tejidos, se investigó si la Epo podía presentar un efecto modulador en cultivos de células de microglía murina EOC-2 activados por hipoxia química y se estudió el comportamiento de la hormona frente a estímulos proinflamatorios. No se observó un efecto antiinflamatorio clásico de Epo frente al estímulo de hipoxia química. Sin embargo, los resultados mostraron una acción directa de la Epo sobre la microglía incrementando los niveles de iNOS, enzima responsable de la síntesis de óxido nítrico. Además, la Epo mostró acción antioxidante previniendo la formación de especies reactivas de oxígeno e impidió la proliferación de las células de microglía inducida por hipoxia química en ausencia de Epo. Estos hallazgos sugieren que si bien la Epo no impide la activación de la microglía, podría reducir el daño potencial implicado, contrarrestando la inflamación a largo plazo mediante una acción antioxidante y antiproliferativa. En base a los resultados obtenidos, resultó interesante investigar la acción de la Epo en modelos de interacción microglía-neurona. Se observó el efecto neuroprotector de Epo ante la exposición de cultivos de células neuronales SH-SY5Y a medios condicionados obtenidos en cultivos de microglia estimulados por hipoxia. Esta acción citoprotectora de Epo también fue observada en cultivos de las células neuronales expuestas a medios condicionados de cultivos de macrófagos (células RAW) estimulados con LPS-IFNγ. Los resultados obtenidos en este trabajo aportan nuevos conocimientos sobre la acción de la Epo sobre células neuronales y de microglia. Por un lado, la Epo presenta acción neuroprotectora ante el daño directo inducido en células indiferenciadas por diversos agentes proapoptóticos como también ante un ambiente proinflamatorio inducido por la activación, tanto de células de microglía como de macrófagos. Si bien la Epo no presentó una acción antiinflamatoria clásica sobre la microglia, sí mostró un efecto antioxidante y antiproliferativo. De esta manera, se podría sugerir que la acción de la Epo atenuaría la activación de la microglía y, de esta forma, contribuiría a prevenir el desarrollo de un cuadro proinflamatorio mayor, disminuyendo el riesgo de la aparición de efectos perjudiciales para el sistema nervioso. Dada la búsqueda constante de nuevos fármacos para el tratamiento de enfermedades neurodegerativas y la existencia de la eritropoyetina recombinante humana, el conocimiento de la acción antiapoptótica y moduladora de dicha hormona sobre células del sistema nervioso puede constituir un aporte importante a sus características terapéuticas ya conocidas.

Se investigó la presencia de Neosartorya fischeri y su capacidad toxicogénica ya que es el hongo resistente al calor más frecuentemente reportado que causa contaminación en productos a base de frutas procesadas por calor. Presenta ascosporas extremadamente resistentes que son capaces de sobrevivir a la pasteurización rutinaria aplicada a la mayoría de productos a base de frutas y la contaminación puede aparecer post-pasteurización por germinación de estas ascosporas. N. fischeri produce principalmente Fumitremorgenos A, B y Verruculogeno, toxinas tremorgénicas que son neurotoxinas que a bajas dosis producen temblores por largos períodos de tiempo y no causan efectos adversos en animales, pero pequeños incrementos en las dosis pueden ser letales. Se estudiaron 10 muestras de frutillas naturales cosechadas a granel en la zona de Coronda con tratamiento térmico de 80ºC por 15 minutos y 20 muestras de pulpas de frutillas envasadas para agregar a yogur. Se logró desarrollar una metodología analítica por Cromatografía líquida que permitió estudiar la capacidad de producción de Fumitremorgenos A, B y Verruculogeno. Los aislados pertenecientes a la especie N. fischeri poseen capacidad para producir Fumitremorgenos A, B y Verruculogeno en condiciones de laboratorio, algunos de ellos con capacidad para sintetizar las 3 toxinas; pero dicha capacidad no se manifiesta cuando son cultivados en frutillas. En pulpas para adicionar a yogur no se observó presencia de mohos viables. La incorporación de frutillas contaminadas con dichos mohos a productos lácteos o de panadería podría dar lugar a síntesis de las toxinas con el riesgo toxicológico que ello implica.

El monofluorfosfato de sodio es utilizado con fines terapéuticos en pacientes con osteoporosis. Habitualmente dicha medicación es acompañada con la administración de sales de calcio (Ca2+). Luego de una dosis oral de monofluorfosfato de sodio una fracción es absorbida en el estómago mientras que en la luz intestinal el remanente es absorbido como fluoruro luego de la hidrólisis por la fosfatasa alcalina intestinal (FAi). Experimentos previos demostraron que el Ca2+ en concentración 50 mM inhibe no competitivamente la FAi de rata. La FAi tiene máxima expresión en duodeno y si bien no tiene aún un rol definido a nivel intestinal es llamativo que: 1) Su expresión es regulada por la calcitriol al igual que las proteínas que participan en la absorción de Ca2+. 2) La distribución del transportador TRPV6 tiene el mismo patrón que la FAi. 3) La FAi se expresa a nivel intestinal coincidiendo con el sitio de mayor absorción del catión. 4) La distribución de los dos mecanismos de transporte de Ca2+ (activo y pasivo) en intestino delgado sea similar a la distribución de las dos isoformas de FAi. El objetivo de este proyecto de tesis fue estudiar la interacción entre el Ca2+ y la FAi y el efecto de dicha interacción sobre el proceso de absorción del catión. Para cumplir con los objetivos se purificó FAi a partir del duodeno de ratas adultas y se produjo un anticuerpo por su inoculación a cobayos. Con la FAi purificada se hallaron los parámetros de fijación de Ca2+ a la FAi. Los resultados hallados indican que el Ca2+ se une a la FAi siguiendo un modelo de “n” sitios independendientes e igual afinidad. La constante de afinidad fue 19.1±8.4 mM-1 con 7.8±4.4 sitio de unión. El efecto del Ca2+ sobre la actividad de FAi se investigó espectrofotométricamente (1) y por electroforesis (2). En ambos casos la actividad de FAi mostró un efecto bifásico dependiendo de la concentración de Ca2+. A concentraciones de Ca2+ menores a 10 mM la actividad se incrementó linealmente, mientras que con concentraciones de Ca2+ mayores a 20 mM la relación fue inversa [ 1) r = 0.946; r = -0.703; (2) r = 0.721; r = -0.773] Se investigaron los cambios estructurales de la FAi purificada de rata producidos por incubación de la enzima con Ca2+ 50 mM por cromatografía de exclusión molecular y Western blot. Se detectaron dos fracciones de la enzima: 168±6 kDa (con actividad enzimática) y 425±45 kDa (sin actividad nzimática). El punto isoeléctrico de la enzima resultó más alto en la presencia de Ca2+ (0 mM = 4.35±0.02; 50 mM = 4.85±0.06) , pero fue el mismo para la enzima y la forma agregada. El tratamiento con EGTA después de la adición de Ca2+ no restauró la actividad enzimática, pero produjo desagregació de la enzima y aparición de sus monómeros, indicando que el Ca2+ podría ser requerido para la acción de la enzima o estar involucrado en la estabilidad de la estructura dimérica. Empleando el modelo de intestino aislado in situ y determinación histoquímica se determinó el efecto de las diferentes concentraciones de Ca2+ in vivo sobre la actividad de la FAi. No se observó el efecto bisfásico hallado in vitro, sino se observó un aumento significativo de la actividad de la enzima en la membrana a medida que se incrementó la concentración de Ca2+. Los resultados de expresión de FAi en la membrana no mostraron diferencias significativas entre los grupos afirmando que las diferencias de la actividad observadas por histoquímica no se deben a un cambio de expresión Estos datos sumados a que la FAi modifica su expresión de acuerdo a los niveles de calcitriol hacen sospechar que podría actuar en el mecanismo de absorción de Ca2+. La FAi hidroliza éster monofosfóricos generando fosfato y protones y existe evidencia de que la disminución del pH del lumen intestinal modificaría la actividad de los canales de Ca2+ TRPV6. Se realizaron experimentos de sacos duodenales evertidos a fin de determinar el pH y la absorción de Ca2+ en función de diferentes concentraciones de Ca2+ luminal (1, 10, 50 y 100 mM). Se observó un descenso significativo del pH en solución mucosa de los grupos con 10, 50 y 100 mM. La fracción de absorción disminuyó a medida que se incrementó la concentración de Ca2+, aralelamente al descenso de pH. Los experimentos indican que el fosfato generado por hidrólisis no sería el responsable de la disminución de la fracción de absorción. Finalmente cuando los experimentos de sacos evertidos duodenales fueron llevados a cabos en presencia de L-fenilalanina se observó un descenso de pH significativamente menor con un incremento en la fracción de absorción en todos los grupos experimentales. Estos resultados fortalecerían la hipótesis que el pH regularía la entrada de Ca2+ por vía transcelular y la FAi sería sensora de las concentraciones de Ca2+ luminal e impediría el ingreso de cantidades tóxicas del catión al enterocito.