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La mayoría de los decápodos braquiuros y anomuros atraviesan una fase larvaria planctónica en las etapas tempranas de su ciclo de vida. Esta fase es una etapa crítica para la dinámica de las poblaciones básicamente por dos razones: 1) las mayores mortalidades de todo el ciclo de vida de los decápodos ocurren durante esta fase, y 2) las larvas son transportadas durante su vida planctónica, potencialmente lejos del ambiente parental. Una interacción entre el comportamiento de las larvas y procesos físicos determina el resultado de ese transporte y puede ser el factor responsable de buena parte de la variabilidad en la abundancia de las poblaciones. El conocimiento acerca del transporte larvario y la comprensión de los procesos que lo controlan tiene una importancia central en el diseño de estrategias de manejo y/o restauración de las especies de decápodos. En este trabajo se investigaron diferentes aspectos de la ecología larvaria de decápodos braquiuros y anomuros de la costa Atlántica de la región Patagónica, con énfasis en los braquiuros Platyxanthus patagonicus y Ovalipes trimaculatus, y el anomuro Munida gregaria, tres de las especies con potencial pesquero de la región. La vida larvaria puede dividirse en tres etapas cuyas características las hacen objeto de diferentes presiones ambientales: 1) la generación de la larva; 2) la vida larvaria estrictamente planctónica y 3) el asentamiento del último estadio larvario (megalopa), previo a la muda de metamorfosis, que transforma el último estadio larvario en el primer estadio juvenil estrictamente bentónico. En el Capítulo I se resuelven patrones estacionales de desove y eclosión de las tres especies objetivo. El Capítulo II describe y analiza algunos patrones espacio-temporales de distribución de las larvas de braquiuros y anomuros en el golfo Nuevo. El Capítulo III estudia las variaciones en diferentes escalas temporales, del asentamiento de megalopas y juveniles de braquiuros y anomuros sobre colectores artificiales en el golfo Nuevo. El Capítulo IV describe y analiza series temporales de datos meteorológicos y oceanográficos, y define una serie de procesos de importancia para el transporte larvario. En el Capítulo V se relacionan las variaciones temporales de distribución larvaria y el asentamiento con los patrones hidrodinámicos descriptos, en el marco de hipótesis alternativas sobre los mecanismos de transporte. Las tres especies con potencial pesquero estudiadas, presentan una estacionalidad marcada en sus ciclos reproductivos. Las hembras de M. gregaria comienzan a desovar en junio y se encuentran hembras incubando huevos hasta diciembre. En el laboratorio, el desarrollo embrionario demora aproximadamente un mes a la temperatura del ambiente (11ºC) y las hembras son capaces de producir puestas sucesivas dentro de una misma temporada. Las eclosiones secuenciales ocurren mayormente entre julio y diciembre. Las hembras de O. trimaculatus presentan un período reproductivo extenso con dos picos de desove consecutivos, seguidos por el desarrollo embrionario que concluye en períodos de eclosión en diciembre y febrero. El desarrollo embrionario en laboratorio demora aproximadamente 70 días a un régimen constante de temperatura de 11ºC. Las hembras de P. patagonicus desovan entre abril y mayo y la eclosión se produce entre octubre y diciembre. La estacionalidad de la presencia de larvas de estas tres especies en el plancton se corresponde con la estacionalidad reproductiva. Las larvas de P. patagonicus presenton máximos de abundancia entre octubre y noviembre, las de O. trimaculatus presentan dos picos de abundancia de zoeas, uno entre noviembre y diciembre y el otro en febrero, y las larvas de M. gregaria son muy abundantes entre julio y octubre. Se describe además, la estacionalidad de la abundancia de los diferentes estadios larvarios de otras 6 especies de braquiuros y anomuros: Pachycheles chubutensis, Leurocyclus tuberculosus, Leucippa pentagona, Halicarcinus planatus, Peltarion spinosulum y el género Cyrtograpsus. La distribución vertical de las zoeas de las nueve especies antes citadas no es homogénea en la mayoría de los casos. Las larvas de M. gregaria y P. spinosulum (que presentan grandes abundancias en invierno) se distribuyen cerca de la superficie durante el día y una pequeña fracción de sus larvas migra hacia aguas profundas durante la noche. Las zoeas de P. patagonicus se distribuyen en estratos intermedios y profundos de la columna de agua durante el día y migran hacia la superficie en proporciones variables durante la noche. Los estadios iniciales de Zoea (I y II) de O. trimaculatus se distribuyen en aguas profundas durante el día, mientras que los estadios más avanzados (Zoea III y IV) se concentran en aguas superficiales. En horas nocturnas todos los estadios de Zoea de la especie se concentran en la superficie manteniendo pequeñas proporciones en aguas profundas. Se propone que algunas especies costeras como P. chubutensis desarrollarían estrategias de retención ubicándose -al menos durante parte del día- en aguas profundas para no ser advectadas lejos del ambiente parental, mientras que otras como O. trimaculatus y Cyrtograpsus spp se concentrarían en aguas superficiales para desarrollarse en aguas abiertas con menor presión de predación y regresar a la costa en el estadio megalopa. Varias especies se asentaron sobre los colectores artificiales, algunas durante la primavera (P. spinosulum y M. gregaria) y otras durante el verano (P. chubutensis y Cyrtograpsus spp.). En todas ellas el asentamiento fue marcadamente estacional, con picos de intensidad diferentes en años consecutivos. Las series temporales de asentamiento alternaron períodos en los que las variaciones fueron abruptas y períodos con variaciones graduales, y la correlación entre las densidades de las especies que se asentaron simultáneamente fue muy baja en todos los casos. Se probaron tres diseños diferentes de colectores (uno de ellos el utilizado en el resto del trabajo) colocados en diferentes sitios y en diferentes momentos del año para capturar megalopas de O. trimaculatus y P. patagonicus sin obtener resultados positivos. Se registró y analizó información de diferentes variables meteorológicas y oceanográficas, a saber: intensidad y dirección de la corriente en diferentes estratos de la columna de agua, temperatura del agua en la superficie y el fondo en un área litoral de 15 m de profundidad, intensidad y dirección del viento, intensidad de la radiación solar, altura de marea y fases lunares. Se identificaron cuatro procesos costeros con potencial para transportar larvas de decápodos hacia la costa: 1) surgencias de aguas profundas generalmente asociado a vientos fuertes del oeste, 2) hundimiento de aguas superficiales generalmente asociado a vientos fuertes del este, 3) ondas internas de marea (oscilaciones de la termoclina), asociadas a mareas amplias y gran estratificación térmica de la columna de agua, y evidenciadas por fuertes fluctuaciones de la temperatura del fondo, y 4) ondas internas forzadas por la brisa, con período diurno y asociadas a la estratificación térmica de la columna de agua y a la persistencia de la brisa marina. La relación entre la intensidad del asentamiento de las cuatro especies más abundantes y las variables ambientales estudiadas sugirió un efecto de estos cuatro procesos costeros en el transporte de las megalopas hacia la costa. El asentamiento de M. gregaria varió significativamente en relación con la fase lunar y la amplitud de marea, y en menor medida con la brisa marina. Se propone que sus larvas se concentrarían en aguas profundas y serían transportadas por ondas internas de marea o de brisa. El asentamiento de P. spinosulum se vió fuertemente incrementado en períodos con incidencia de la brisa marina y amplitudes intermedias de marea. Se propone que las megalopas de esta especie serían concentradas en la superficie y transportadas por la brisa hacia la costa. Las especies con hábitos litorales asentadas en los colectores (P. chubutensis y Cyrtograpsus spp) no parecieron afectadas por los procesos costeros de alta frecuencia (brisa y marea), y se propone que las megalopas de ambas especies se concentrarían en aguas intermedias o profundas, transportándose hacia la costa en períodos de surgencias.

El estrés por calor en vacas gestantes es capaz de inducir modificaciones epigenéticas en el embrión en desarrollo, que luego se manifestarán en variaciones fenotípicas/funcionales en el animal adulto y en su descendencia. Ante situaciones de estrés en mamíferos, se estimula la síntesis y secreción de glucocorticoides, los cuales pueden tener un efecto inhibitorio sobre el eje hipotálamo-hipófisis-ovario y el ciclo estral en hembras. El objetivo de esta tesis fue evaluar la expresión del receptor de glucocorticoides (RGC) considerando probables modificaciones epigenéticas y estudiar la modulación de sus respuestas no genómicas, en ovarios de bovinos gestados en diferentes condiciones ambientales y de manejo. Nuestros resultados muestran que la concentración plasmática de cortisol fue mayor en animales cuyas madres tuvieron estrés calórico en los primeros meses de gestación, y menor en las hijas de vacas que tuvieron estrés calórico en los últimos meses de gestación. No hallamos asociación entre la exposición a ITH elevados durante el desarrollo intrauterino y la expresión génica ni proteica del RGC en el folículo preovulatorio. No obstante, sí observamos un patrón de metilación alterado en sitios CpG dentro de la región promotora de su gen, cercanos a sitios de reconocimiento de factores de transcripción. Además, hallamos una asociación de la expresión proteica del RGC con los intermediarios de señalización intracelular IRS1 total y fosforilada y con PI3K en folículo preovulatorio de los animales estudiados. Estos resultados aportan información novedosa acerca del impacto del estrés calórico prenatal en la modulación de la expresión del RGC y sus respuestas no genómicas a nivel ovárico.

Fil:Castagnino, Carlos Gustavo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Trabajo Final para optar al título de Especialista en Frutos Secos presentado en la Universidad Nacional del Comahue. Centro Universitario Regional Zona Atlántica. Especialización en Frutos Secos en 2016

El descanso nocturno y la selección de los sitios utilizados para tal fin son considerados un aspecto importante de la biología y ecología de los primates no humanos. Durante el descanso nocturno se produce el sueño que es un estado en el cual suceden cambios a nivel neuronal que afectan el desarrollo de los individuos. Los estudios relacionados al descanso nocturno en primates no humanos que abarcan simultáneamente el análisis de varios factores son escasos. El presente trabajo de tesis doctoral explora los distintos factores que afectan el agrupamiento nocturno, y los patrones de uso y selección de árboles y sitios dormideros utilizados para el descanso nocturno en una población de monos aulladores negros y dorados (Alouatta caraya), a través del análisis de nueve hipótesis no mutuamente excluyentes (H. social, H. de defensa del área de acción, H. relacionada al estrés, H. de las relaciones de parentesco, H. de depredación, H. de parasitismo, H. de confort, H. de proximidad al sitio de alimentación, y H. climática y de termorregulación). Los aulladores son primates que se agrupan en árboles dormideros para descansar (el área en el que se ubican dichos árboles es conocido como “sitio dormidero”). Estudiamos cuatro grupos sociales de monos aulladores negros y dorados en estado silvestre durante un año (junio 2012-julio 2013) que habitan en fragmentos de bosque en galería ubicados en la localidad de San Cayetano (27° 30´S, 58°41´W), Corrientes, Argentina. Registramos datos comportamentales, geográficos, meteorológicos, de estructura de la vegetación, características de los árboles y de los sitios dormideros utilizados, y fenología. Además, recolectamos muestras de heces para estudios parasitológicos (N = 451), genéticos (N = 29) y hormonales (N = 497). Los individuos permanecieron en los sitios dormideros en promedio 13 horas, de las cuales 10 horas eran dedicadas al descanso. El ingreso al sitio dormidero ocurrió antes de que anochezca y se retiraron del mismo cuando ya había amanecido. La formación de más de un grupo cohesivo para descansar durante la noche fue el patrón predominante y la composición de dichos grupos se vio afectada por factores sociales y genéticos. Las condiciones climáticas se relacionaron con cantidad de individuos en los grupos formados para el descanso nocturno, la cantidad de partes del cuerpo de cada individuo que quedan cubiertas y la cobertura de la copa de los árboles seleccionados. Las horquetas gruesas horizontales fueron las estructuras más frecuentemente utilizadas para descansar. Los árboles dormideros utilizados más frecuentemente fueron de las especies timbó (Enterolobium contortosiliqum), ficus (Ficus luschnathiana), espina corona (Gleditsia amorphoides) y guabiyú (Myrcianthes pungens). Los árboles y sitios dormideros fueron utilizados según un patrón cambiante en el que el cambio noche tras noche de árbol o sitio utilizado es más frecuente que el uso repetido. Los individuos seleccionaron los árboles de mayor tamaño entre los disponibles como árboles dormideros. Los eventos de defecación ocurrieron en similar proporción desde árboles dormideros y no dormideros, pero la altura de defecación en los árboles dormideros fue menor que la altura utilizada para descansar por las noches. Los cuatro grupos estudiados presentaron similitudes en la prevalencia y riqueza de las especies de parásitos intestinales, lo que se asocia con la similitud encontrada en las estrategias antiparasitarias relacionadas al uso de los árboles dormideros. La proporción y frecuencia de uso de los sitios dormideros ubicados en las áreas de uso compartido fue mayor que la de los ubicados en áreas de uso exclusivo. Los sitios dormideros fueron utilizados como sitios de alimentación o se encontraban muy cerca de ellos. Toda la información mencionada anteriormente sugiere que los aulladores negros y dorados presentan estrategias que: favorecen las relaciones sociales afiliativas entre individuos en contextos nocturnos y la defensa de los recursos, facilitan el agrupamientos entre individuos emparentados, disminuyen el riesgo de depredación al que están expuestos y, las oportunidades de contagio con parásitos intestinales, aumentan el confort durante el descanso, facilitan el consumo de recursos alimenticios y, disminuyen la exposición a condiciones climáticas adversas. El presente trabajo aporta información novedosa que puede ser utilizada en el desarrollo de planes de manejo de primates en estado silvestre en ambientes conservados o alterados y de primates en cautiverio. Los comportamientos relacionados al descanso nocturno mostraron estar sujetos al efecto de más de un factor actuando simultáneamente y al resultado de la interacción de los mismos. La modificación del ambiente provocada por la acción del hombre reduce la disponibilidad de recursos potencialmente utilizables por las poblaciones de monos. Esta alteración afecta negativamente al desarrollo de todas las estrategias comportamentales exhibidas por los monos, incluidas aquellas relacionadas al descanso nocturno, pudiendo provocar la desaparición o reducción de las poblaciones implicadas.

Se estudió la influencia de la actividad de agua (aw) sobre la producción de dos micotoxinas importantes en relación a la contaminación potencial del trigo: el deoxinivalenol producido por Gibberella zeae (Schweinitz) Petch (anamorfo: Fusarium graminearum Schwabe), tipico hongo de campo, y la citrinina producida por el hongo xerófilo Penicillium citrinum Thom, mejor adaptado a las condiciones del almacenamiento. Ensayos preliminares realizados a fin de establecer el tratamiento más efectivo para reducir la micota de los cariopses de trigo con la menor alteración posible de sus caracteristicas naturales, determinaron que la desinfección del sustrato se realizara a una dosis de 6 kGy (600 krad). Este tratamiento arrojó el menor recuento fúngico manteniendo una elevada viabilidad de los granos. El trigo desinfectado y acondicionado a diferentes niveles de aw (0,985; 0,945; 0,925 y 0,900), se inoculó con una cepa de Gibberella zeae (Schweinitz) Petch BAFC 210 productora de deoxinivalenol e incubó a 30°C por períodos de aproximadamente dos meses. La influencia de la aw se estudió a través de parámetros cinéticos obtenidos a partir de las curvas de acumulación de la toxina a los diferentes niveles de aw. La mayor acumulación de deoxinivalenol (1000 μg/kg) se detectó a aw 0,980. Respecto de las aw menores (0,945 y 0,925) el máximo nivel de deoxinivalenol detectado fue 80 μg/kg. No fue detectado deoxinivalenol a aw 0,900. Se estudió la influencia de la aw sobre el crecimiento de Penicillium citrinum Thom en trigo. El trigo acondicionado a distintos niveles de aw fue inoculado con la cepa de P. citrimlm Thom BAFC 729 productora de citrinina e incubado a 30°C. El desarrollo de P. citrinum Thom en trigo fue examinado durante 17 días en el caso de las actividades acuosas mayores (0,885; 0,825; 0,810 y 0,800), y durante diez meses en el caso de las actividades acuosas menores (0,775; 0,760). El crecimiento fungico fue medido semicuantitativamente a través de la observación microscópica de los granos. P. citrimlm Thom fue capaz de desarrollarse a aw 0,775 inclusive. La influencia de la awsobre la producción de citrinina en trigo se estudió en el rango de aw 0,800 - 0,885. El trigo acondicionado a distintos niveles de awe inoculado con la cepa BAFC 729 fue incubado a 30°C durante dos meses aproximadamente. A partir de las curvas de acumulación de citrinina se obtuvieron parámetros cinéticos. A medida que decreció la aw, la citrinina fue detectada más tardíamente y los máximos de acumulación decrecieron notablemente (20,2 mg/kg a aw 0,885; 606 μg/kg a aw 0,825 y 57 μg/kg a aw 0,810). No fue detectada citrinina en el sustrato de aw 0,800. Se presenta un método para la determinación de citrinina en trigo con adecuados atributos de desempeño analítico (recuperación 79%; RSDr variable entre 5,1% y 18,1%, según el nivel de contaminación en el rango 10 μg/kg - 200 μg/kg; límite de detección 10 μg/kg).

Fil:Montani, Mónica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Las actividades antrópicas como obras viales, las rectificaciones de cauces y canalizaciones, la explotación intensiva y la contaminación de acuíferos en áreas urbanas y rurales pueden producir modificaciones en una cuenca hidrográfica, afectando al funcionamiento geohidrológico natural. En relación a estos cambios producidos por las actividades humanas, el presente trabajo de tesis doctoral tiene como objetivo analizar la influencia de la actividad antrópica en la geohidrología de la cuenca del río Samborombón. Para esto se caracterizó geohidrológicamente a la cuenca del río, considerando el clima de la región, la geología, geomorfología y tipos de suelos así como la dinámica y química del agua superficial y subterránea. Realizada esta tarea, se identificaron sectores puntuales de la cuenca mediante sensoramiento remoto para el estudio en detalle de las diversas modificaciones antrópicas que afectan localmente a la geohidrología de la cuenca. Los resultados obtenidos fueron sintetizados en modelos conceptuales del funcionamiento geohidrológico. La cuenca posee un clima templado húmedo, donde la evapotranspiración supera a la precipitación en los meses de verano, siendo otoño e invierno los periodos de menor déficit hídrico, cuando se produce la recarga en los acuíferos a partir de las precipitaciones, y el excedente hídrico se traduce en inundaciones a nivel de cuenca. Dentro de la cuenca dos ambientes geomorfológicos contrastantes fueron reconocidos. Una llanura continental loéssica que abarca los sectores de cuenca alta y media y una planicie costera hacia el sector de cuenca baja. En la cuenca alta y media, dentro de la llanura continental, el acuífero freático alojado en sedimentos loéssicos y el semiconfinado subyacente contenido en las arenas fluviales son los utilizados por los pobladores para abastecimiento. El acuífero freático recarga de la infiltración directa de las precipitaciones, mientras que el semiconfinado lo hace indirectamente a partir del freático. El flujo subterráneo regional en el acuífero freático posee una dirección noroeste-sudeste descargando hacia la zona de la Bahía Samborombón. Asimismo este acuífero descarga localmente en ríos, arroyos o en áreas deprimidas. Por su parte, el acuífero semiconfinado tiene un flujo hacia sur-sureste, tendiente a descargar hacia la cuenca del río Salado. El agua en el acuífero freático es bicarbonatada-cálcica en las áreas de cabecera, dominando regionalmente las facies bicarbonatadas-sódicas, pasando a clorurada-sódica en las zonas de descarga. Por su parte, el acuífero semiconfinado posee agua de tipo bicarbonatada-sódica. En el ambiente de planicie costera, en la cuenca baja, el principal acuífero para abastecimiento lo constituyen las lentes de agua dulce alojada en cordones conchiles, las que presentan facies de tipo bicarbonata-sódica a cálcica y clorurada-sódica a magnesiana. El agua subterránea en la llanura costera y marisma adyacente a los cordones, se encuentra salinizada y sólo es utilizada para uso ganadero. El agua superficial presenta facies bicarbonatadas-sódicas en los sectores de cabecera a clorurada-sódica en el curso principal, aumentando su salinidad hacia la desembocadura en la Bahía Samborombón. La disolución y precipitación de carbonatos, así como el intercambio catiónico, son los principales procesos que condicionan la química del agua subterránea, en tanto que la disolución y precipitación de carbonatos y la evaporación son los que dominaron en el agua superficial. A nivel regional, se identificaron iones que presentan limitaciones para el consumo de agua según el Código Alimentario Argentino. Entre ellos, se destaca el nitrato y elementos traza como el fluoruro y arsénico, cuyo origen es natural derivado del loess. Los estudios realizados a escala regional no evidencian modificaciones geohidrológicas de importancia. Las actividades antrópicas realizadas en una cuenca principalmente rural no parecen afectar el funcionamiento geohidrológico, sin embargo, a escala de detalle se reconocieron sectores puntuales donde esta afectación adquiere gran importancia. Dentro de las principales conclusiones de la influencia antrópica a escala local en la geohidrología, se identifica la modificación de la geomorfología y la contaminación de acuíferos mediante actividades agropecuarias intensivas y pozos sépticos. La construcción de barrios cerrados y expansión de centros urbanos en la planicie de inundación y tributarios determinan cambios morfológicos importantes que modifican el escurrimiento superficial, poniendo a un gran número de habitantes en riesgo de inundación. Las obras viales soportadas por terraplenes restringen el ancho de la llanura de inundación, afectando al escurrimiento superficial. En contraposición, se observaron numerosos canales y rectificaciones que tienen como fin evacuar excedentes hídricos. Los suelos más fértiles de la cuenca y los acuíferos someros se ven afectados por las actividades mineras extractivas, comprometiendo particularmente en la planicie costera al sustrato del único bosque nativo del área. La agricultura y ganadería intensiva evidenciaron que son fuentes puntuales de contaminación de los acuíferos, en áreas donde el abastecimiento de agua de los pobladores depende de estos, alcanzando concentraciones de nitratos que superan las sugeridas por el Código Alimentario Argentino. El conocimiento geohidrológico de una cuenca hidrográfica es una herramienta de gran relevancia para realizar una adecuada planificación territorial. Entender el funcionamiento de estos sectores contribuye a la preservación del ambiente y al manejo y gestión de los recursos hídricos. Actualmente la cuenca evidencia un constante crecimiento poblacional lo que conduce a cambios en el uso de suelo que pueden deteriorar a los recursos hídricos de la cuenca si no se contempla una adecuada planificación.

El objetivo del trabajo de tesis fue identificar cambios tecnológicos que, introducidos en la elaboración tradicional de queso Reggianito, favorecieran la actividad de enzimas nativas de la leche, lipoproteína lipasa y plasmina, en vistas a incrementar la lipólisis y proteólisis y de esta manera acelerar la maduración de los quesos. Con el fin de incrementar la lipólisis, se ensayó un tratamiento mecánico de agitación y uno de homogeneización, que se aplicaron primero en modelos de quesos duros: minicuajadas y miniquesos. Además, se estudió el efecto del tratamiento térmico a la leche de elaboración. Se observó que los tratamientos más favorables para incrementar la lipólisis y la concentración de algunos compuestos volátiles derivados de la grasa fueron la ausencia de tratamiento térmico y la homogeneización. Respecto a la intensificación de la proteólisis, se evaluaron las variables: pH de drenado de suero, temperatura de cocción de la cuajada, e incorporación de una etapa de lavado de la cuajada, sobre la actividad de la enzima plasmina y su contribución a la proteólisis en pseudocuajadas modelo. El aumento del pH y el lavado de la cuajada afectaron positivamente la actividad de la enzima plasmina y aumentaron su acción en la proteólisis, lo que fue evidenciado en perfiles de péptidos solubles. No se detectó una influencia de la temperatura de cocción en la acción de la enzima. Finalmente, se diseñó una tecnología modificada teniendo en cuenta los resultados obtenidos en los modelos, que se validó mediante una experiencia de elaboración a escala piloto.

En este trabajo de tesis se presenta un estudio sobre los mecanismos por los cuales la actividad neuronal modularía el desarrollo y el trofismo del Sistema Nervioso Central. Se evaluó la influencia de concentraciones despolarizantes de KCI y de GABA sobre la proliferación de células granulares del cerebelo inmaduras y sobre la morfología y la supervivencia de neuronas diferenciadas in Vitro. Se disecaron cerebelos de ratas de 6 a 8 días de edad, y se obtuvieron suspensiones celulares que fueron sembradas en medio de cultivo libre de suero o bien en medio suplementado con un 10% de suero fetal bovino. Apartir de los estudios de incorporación de timidina ³H se observó que las células una vez sembradas poseen un pico proliferativo en las primeras 24 horas de cultivo, que desciende significativamente a las 48 horas y alcanza valores blanco luego de las 72 horas. El agregado de KCl 25 mM en el momento de la siembra conduce a un aumento de la síntesis de ADN del 34 ± 4% (n: 14), y este efecto es completamente bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM (bloqueante de canales de Ca²+ tipo L). El GABA(0.1-100μM) también induce un incremento de la proliferación de las células granulares inmaduras (23 ± 1%, n: 10) y dicho efecto también es bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM así como por bicuculina (antagonista de receptores GABAa) y picrotoxina (bloqueante del canal de Clˉ). La preincubación con un inhibidor de la quinasa -MEK1- de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), PD98059, bloquea en forma efectiva la proliferación celular inducida por KCl 25 mM y GABA. El efecto proliferativo del KCl parece ser debido a una directa activación de los canales de Ca²+ que se produce como consecuencia de la despolarización y no requiere de sustancias tróficas presentes en el suero o de glutamato que se podría liberar como consecuencia de Ia despolarización. Por el contrario, el mecanismo por el cual el GABA aumenta la proliferación es más complejo pues requiere de una membrana despolarizada y de la interacción de sustancias tróficas presentes en el suero. Al evaluar la influencia del GABA y de concentraciones despolarizantes de KCl sobre la neuritogénesis, se observó que ambos agentes producen un aumento de la complejidad de la red neurítica, cuantificada a través de la medición de la dimensión fractal de neuronas aisladas sembradas por 48 horas en cultivos de baja densidad. Este efecto es bloqueado por el agregado de nifedipina 10 μM. El tratamiento de los cultivos con KCl 25 mM promueve la supervivencia neuronal a los 7 días de la siembra, produciendo un incremento de la misma del 100 ± 20% (n: 6) cuando se la compara con la supervivencia celular en cultivos crecidos en KCl 5 mM (condiciones de reposo). Este aumento fue bloqueado por MgCl2 y nifedipina, pero no fue bloqueado por PD98059. Por el contrario, el tratamiento con GABA no afecta la supervivencia neuronal. Se concluye que altas concentraciones de KCl y el agregado de GABA inducen un aumento de la proliferación y de la complejidad neuronal debido al influjo de calcio a través de canales voltaje dependientes de tipo L y la consecuente activación de la cascada de la MAPK. El hecho de que el GABA no afecte la supervivencia neuronal parece estar relacionado con la pérdida de la capacidad del GABA para activar un influjo de calcio ya que el KCl sí aumenta la supervivencia. A diferencia de lo que sucede en el caso de la proliferación, el aumento de la supervivencia neuronal debido a concentraciones despolarizantes de KCl no parece ser mediado por la cascada de la MAPK.