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El herpesvirus equino 1 (EHV-1) es uno de los patógenos más importantes de los equinos, debido a que puede causar signología respiratoria, nerviosa y abortos. En los potrillos el virus puede además desencadenar síndrome neonatal y provocar su muerte en las primeras 48 horas de vida. El EHV-1 posee un ciclo de replicación de 18 ~ 20 horas en células epiteliales. La apoptosis es un tipo de muerte celular programada mediante la cual la célula activa enzimas que desencadenan cambios bioquímicos y morfológicos conduciendo a su muerte. Los virus pueden interferir o desencadenar apresuradamente la apoptosis en las células que infectan con diferentes propósitos. Muchos herpesvirus modulan la apoptosis de las células infectadas para asegurar su supervivencia y la propagación de su progenie. Con el objeto de conocer si el EHV-1 interfiere con la apoptosis de las células infectadas, se evaluó su efecto en cultivos de células heterólogas y homólogas infectadas a las 3, 9 y 18 h posinfección (pi) de su ciclo de replicación, y posteriormente, se estudió la apoptosis en pulmones de ratones BALB/c a las 24, 48, 72 y 96 h pi. Se aplicaron técnicas que evidenciaron cambios morfológicos y bioquímicos característicos de la apoptosis y se compararon los resultados con controles negativos y positivos (éstos últimos inducidos a la apoptosis con sorbitol). Los resultados de los ensayos in vitro permiten inferir que el EHV-1 interfiere en la muerte por apoptosis de las células infectadas hacia la mitad de su ciclo de replicación. Los resultados obtenidos in vivo no presentaron diferencias significativas entre los animales control e infectados. Sin embargo, con los datos obtenidos y teniendo en cuenta las variabilidad de la cinética celular del órgano, la apoptosis podría estar actuando como un mecanismo para facilitar la propagación del virus a través de células fagocíticas.

La hepatozoonosis canina es una infección causada por protozoos del género Hepatozoon. H. canis tiene como hospedador definitivo a la garrapata Rhipicephalus sanguineus. En Argentina se identificó por primera vez en el año 1999, desde entonces, se han reportados casos en numerosas provincias del país. En este trabajo se estudiaron 4255 muestras de sangre canina, procedentes del Gran Mendoza, remitidas a Diagnovet Laboratorio Veterinario en el período comprendido desde enero de 2015 a diciembre de 2016. Se evalúa la presencia de Hepatozoon sp. en frotis sanguíneos, obteniendo valores de parasitemia relativa y parasitemia absoluta, también realizando un análisis detallado de los cambios hematológicos de las muestras positivas a esta técnica. Se observó la presencia de H. canis en el 1,5% de las muestras procesadas, con una mayor cantidad de casos en los meses calurosos. Los cambios hematológicos fueron diversos e inconsistentes para un diagnóstico certero de la enfermedad. El 51,56% de las muestras presentaban anemia, y de estas el mayor porcentaje era arregenerativa. El 36% de los casos hubo trombocitopenia. El leucograma fue predominantemente inflamatorio (71,87%). En este estudio se observó un nivel bajo de parasitemia. En el recuento relativo el 50% de los casos presentaron menos del 1% de leucocitos con gamontes, y en el recuento absoluto el 70% de los casos tuvieron valores menores a 100 gamontes/µl. El frotis sanguíneo es un método rápido, de bajo costo y específico que permite llegar al diagnóstico en forma muy sencilla, siendo un elemento de suma importancia para el diagnóstico de ésta enfermedad. El uso de otros métodos de diagnóstico de mayor sensibilidad, como los moleculares y serológicos, podría incrementar la detección de animales positivos. La detección precoz facilita la implementación de un tratamiento eficaz para todos los portadores detectados, enfermos sintomáticos y animales asintomáticos (portadores sanos), reservorio para el hospedador definitivo.

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) representa un grupo muy importante de patógenos emergentes, causante de diarrea y severas enfermedades en seres humanos, tales como colitis hemorrágica o síndrome urémico hemolítico (SUH). El SUH afecta mayormente a niños menores de 5 años, es la principal causa de insuficiencia renal aguda, una de las más importantes de insuficiencia renal crónica y puede causar la muerte. El bovino es el principal reservorio y los alimentos contaminados, la principal vía de contagio al hombre. Argentina posee la mayor incidencia a nivel mundial de SUH y una alta prevalencia de VTEC en bovinos y alimentos derivados. El serotipo O157:H7 es el mayormente involucrado en los casos de enfermedad en el mundo, y en Argentina, también el más frecuentemente asociado al SUH. Sin embargo, no todos los aislamientos de O157:H7 tienen la misma capacidad de infectar y de causar enfermedad en el hombre. Estudios filogenéticos determinaron que las cepas O157:H7 integran subpoblaciones de dispersión mundial, las cuales diferirían en relación a su asociación con enfermedad. A partir del análisis comparativo de genomas, se han descripto varios métodos de subtipificación molecular, los cuales analizan distintas regiones y tipos de variación en el genoma. La combinación de los datos obtenidos por esta variedad de metodologías puede ofrecer una visión más amplia y robusta sobre la estructura poblacional y la virulencia de este serotipo. En este contexto se plantearon como objetivos conocer la diversidad genética de VTEC O157:H7 de Argentina, en particular de aquellas cepas que están circulando en la región pampeana, e identificar subtipos asociados a patogenicidad y virulencia. Para ello, se usaron distintos métodos de subtipificación molecular, tales como polimorfismos específicos de linaje (LSPA6), polimorfismos de nucleótido simple (SNP) (rhsA 3468 C>G y tir 255 T>A), análisis de múltiples loci VNTR (MLVA), y determinación de filogrupos. Por otro lado se analizó la presencia de genes relacionados con virulencia, tales como genes que codifican factores putativos de virulencia (FPV), genes codificados en plásmidos, de genes que codifican efectores no codificados en LEE (nle), presentes en islas de patogenicidad y genes que codifican factores de adherencia. Como complemento, se evaluó también, la actividad citotóxica de los aislamientos. El 98 % de ellos pertenecieron al linaje I/II (2 % al linaje II). El 100 % presentó el alelo del SNP (8_rhsA) correspondiente al clado 8. Un alto porcentaje de aislamientos presentó en alelo tir 255 T>A T, asociado a hipervirulencia, y fue asignado al filogrupo E. Según el MLVA se encontró una amplia diversidad genética. Todos los aislamientos mostraron el perfil plasmídico ehxA-espP-katP-stcE y poseyeron los genes ehaA, elfA, iha y lpfA variantes lpfA1-3, lpfA2-2 y ECSP_0242. Las frecuencias de los genes ECSP fueron 95 % ECSP_2687, 88 % ECSP_3286, 86 % ECSP_3620, 53 % ECSP_2870/2872 y 44 % ECSP_1733. Los aislamientos se agruparon en once perfiles nle, el 46 % fueron positivos para todos los genes nle, mientras que los aislamientos restantes, excepto dos, carecieron de nleF mostrando la OI-71 incompleta. Todas las cepas O157:H7, excepto el aislamiento identificado como linaje II, fueron citotóxicas en células Vero. Los resultados indican que las cepas de la región pampeana de Argentina son un grupo filogenéticamente homogéneo que presenta diversidad genética en relación a sus perfiles MLVA y de genes nle. La pertenencia de los aislamientos al clado hipervirulento 8 y al linaje I/II, la alta prevalencia del alelo tir 255 T>A T y de genes de factores putativos de virulencia, permite asignar a la mayoría de las cepas O157:H7 de esta región un alto riesgo para la salud pública.

Las Ciencias del Bienestar Animal y de los Animales de Laboratorio se asocian ineludiblemente, para evaluar científicamente cómo los procedimientos experimentales y las condiciones de alojamiento impactan sobre la calidad de vida de los animales. En particular en investigación oncológica, se han redactado guías de recomendaciones pero éstas fallan en describir cómo se pueden discernir alteraciones sutiles en el bienestar. De esta forma, el objetivo principal consistió en determinar el impacto de la línea tumoral humana A549 en el bienestar de ratones del stock NLAE:NIH(S)-Fox1nu trasplantados con la misma y en evaluar el efecto del enriquecimiento ambiental sobre el desarrollo tumoral. Para alcanzarlo se evaluó por un lado la fisiología de los ratones a través de la concentración de los metabolitos de la corticosterona en materia fecal, de cambios en la condición corporal y del análisis de parámetros sanguíneos y por el otro las frecuencias de comportamientos espontáneos que realizaron en la caja donde habitaban normalmente y la performance en distintas pruebas de comportamiento. Además, para poder alcanzar dichos objetivos se desarrollaron dos nuevas metodologías: una técnica de medición de los tumores subcutáneos no aversiva y una prueba para para evaluar el sesgo en el juicio ante un estímulo ambiguo. En líneas generales, no se evidenciaron alteraciones significativas en los parámetros de fisiología y de comportamiento que indicarían una alteración severa en el bienestar de los ratones. Sin embargo, sí se manifestaron algunas modificaciones sutiles que convalidan la interpretación de que el trasplante tumoral no es un procedimiento inocuo para estos animales. Con respecto al enriquecimiento ambiental, resultó llamativa la diferencia en el desarrollo tumoral entre machos y hembras por lo que se postuló que la inhibición del desarrollo tumoral se debió al estrés asociado al aumento de los comportamientos agonistas en la caja como consecuencia del enriquecimiento ambiental y no por dicha modificación ambiental.

La presencia de residuos antimicrobianos en calostro y leche puede ocasionar alteraciones en el normal crecimiento y desarrollo del tracto gastrointestinal de los lechones afectando las etapas de lactancia, recría y terminación. Entre los antibióticos más utilizados en las producciones intensivas en nuestro país y Latinoamérica se encuentran la fosfomicina (FOS) y la oxitetraciclina (OTC). El objetivo general de esta Tesis fue estudiar la eliminación calostral-láctea de los antibióticos FOS y OTC en cerdas luego de su administración durante el peri-parto y los potenciales efectos de dichas concentraciones antibióticas sobre la morfo-fisiología intestinal y los parámetros zootécnicos/productivos de la camada. Se desarrollaron tres objetivos específicos. 1. Estudiar la disposición de los antibióticos FOS y OTC en calostro y leche de cerda, luego de la administración IM durante el peri-parto. Cuarenta y cuatro cerdas gestantes fueron inducidas al parto el día 114 de gestación con 1 mL de PGF2α vía IM y divididas en cinco grupos experimentales: cerdas Control: tratadas con solución fisiológica, cerdas FOS1: tratadas con una dosis IM de FOS de 15 mg/Kg al momento de la inducción al parto, cerdas OTCLA: tratadas con una dosis IM de OTC LA (larga acción) de 20 mg/Kg al momento de la inducción al parto, cerdas FOS3: tratadas con tres dosis IM cada 24 h de FOS de 15 mg/Kg y cerdas OTC3: tratadas con tres dosis IM cada 24 h de OTC de 6 mg/Kg. Se recolectaron manualmente muestras de calostro y leche al inicio del parto (0 h) y a las 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24 y 48 h post-parto, las cuales fueron analizadas por HPLC. La FOS disódica según un plan posológico mono y multidosis mostró perfiles de eliminación calostrales y lácteos diferentes (FOS1 AUC0-48: 8,56 ± 2,09 y FOS3 AUC0-48: 80,62 ± 60,66 μg.h/mL). La concentración media de FOS eliminada en el calostro para FOS1 fue de 0,83 ± 0,04 μg/mL durante las primeras 10 h y para FOS3 de 1,55 ± 0,36 μg/mL durante las primeras 24 h pos parto. Para la OTC ambas curvas de eliminación calostral-láctea presentaron perfiles similares, aunque los valores obtenidos para OTCLA (AUC0-48: 28,36 ± 16,71 μg.h/mL) fueron levemente mayores a los cuantificados para el grupo OTC3 (AUC0-48: 18,91 ± 5,92 μg.h/mL). La concentración media de OTC eliminada en el calostro durante las primeras 24 h después del inicio del parto fue de 0,78 ± 0,18 y 0,48 ± 0,07 μg/mL para OTCLA y OTC3 respectivamente. Los cambios hormonales que explican el pasaje de la fase calostral a la fase láctea impactan en la eliminación de FOS en calostro y leche, mientras que para el caso de la OTC ésta influencia no sería tan importante. Las concentraciones de FOS eliminadas en calostro y leche se mantuvieron por encima de la CIM90 durante más de 8 h para bacterias patógenas de importancia productiva e involucradas en procesos infecciosos de mastitis y/o metritis (Escherichia coli y Streptococcus sp. CIM90: 0,5-0,25 μg/mL, IV respectivamente). Sin embargo, los valores de OTC cuantificados en calostro y leche no alcanzaron la CIM90 en ningún momento para Escherichia coli (CIM90: > 64 μg/mL) y Streptococcus suis (CIM90: 64 μg/ml). 2. Determinar el consumo de calostro, la ingesta de concentraciones de FOS y OTC y su impacto sobre los parámetros zootécnicos de la camada luego de la administración de dichos antibióticos a cerdas durante el peri-parto. Cuatrocientos treinta y seis lechones progenie de las cerdas de los grupos Control, FOS1, FOS3 y OTC3 fueron divididos en cuatro grupos de 110 animales cada uno aproximadamente. Se realizó el estudio del consumo medio de calostro por lechón (g/Kg PV) y la producción de calostro por cerda (g) durante las primeras 24 h después del parto, la determinación de la ingesta de FOS y OTC (mg/Kg PV) con el calostro, el efecto de la ingestión de calostro con antibióticos sobre los parámetros zootécnicos de la camada donde se evaluó el escore de vitalidad al nacimiento, el número de lechones nacidos totales (NT) y nacidos vivos (NV), el número de muertos durante la lactancia, el número de lechones destetados a los 21 días de vida y el peso de los lechones en diferentes momentos de la lactancia. El tratamiento de las cerdas durante el peri-parto con FOS u OTC no afectó la producción de calostro, ni el consumo por parte de los lechones. Tampoco tuvo influencia sobre los parámetros zootécnicos de sus respectivas camadas. 3. Evaluar los efectos de FOS y OTC sobre la morfo-fisiología intestinal de los lechones neonatos. Treinta y dos lechones neonatos, hijos de 8 cerdas libres de antibióticos, fueron divididos en cuatro grupos y alimentados artificialmente con calostro según el siguiente esquema: lechones Control*: calostro sin antibióticos, lechones FOS1*: tratados con 0,26 mg/Kg PV de FOS, lechones FOS3*: tratados con 0,50 mg/Kg PV de FOS y lechones OTC3*: tratados con 0,13 mg/Kg PV de OTC. Los animales fueron eutanasiados a las 12 y 24 h de lactancia. Las concentraciones de FOS y OTC administradas con calostro vía oral en lechones no afectaron el recuento de enterobacterias, bacterias ácido-lácticas y relación E/BAL, pH gastrointestinal y producción de acido acético a las 12 y 24 h de lactancia. Se observó un incremento en las UFC de las bifidobacterias en los lechones tratados con FOS3* sobre los lechones OTC3*. La estimación matemática de la superficie de absorción intestinal no presentó diferencias significativas. Se observó efecto de lugar de muestreo para el recuento de las células caliciformes, siendo mayor a nivel de íleon en vellosidades y criptas. También se observó efecto de los tratamientos en las criptas. En el estudio de la actividad de las disacaridasas intestinales, el efecto del lugar de muestreo presentó diferencias significativas, siendo superiores los niveles encontrados en el duodeno que en las otras porciones del intestino estudiado para lactasa, maltasa y sacarasa. Los resultados obtenidos para sacarasa y maltasa no fueron concluyentes. La variabilidad de los resultados puede adjudicarse a la categoría de animales empleada más que a un efecto de tratamiento, ya que la V actividad de ambas enzimas es baja durante la lactancia y adquiere mayor importancia en la etapa de recría cuando los cerdos reciben alimento sólido. Se debe tener en consideración que concentraciones de antibióticos eliminadas por calostro pueden inducir el desarrollo de resistencia bacteriana. Los resultados obtenidos en esta Tesis son innovadores y relevantes para la producción porcina, por lo que este trabajo estimula la concientización sobre el uso adecuado de los antimicrobianos en la sala de partos.

En el presente trabajo se plantea la incorporación de herramientas tecnológicas del curso de Teriogenología que tiene como propósito invitar a los estudiantes de 4º año de la carrera de Ciencias Veterinarias a que conozcan y utilicen algunas de ellas y, a través de pautas marcadas por la docente así como a través de preguntas disparadoras, incentivarlos a la búsqueda de fuentes bibliográficas confiables y actualizadas, a la lectura y comprensión de textos científicos, estimularlos al intercambio de ideas y conocimientos basados en fundamentos científicos y proponerles la producción colaborativa de material de estudio. Para ello se utilizaron como herramientas tecnológicas la producción de un wiki y el foro académico. El uso de tecnologías de la información y de la comunicación (TIC) dentro del área de la educación ha provocado el surgimiento de nuevos espacios para el desarrollo del proceso de enseñanza-aprendizaje dentro del ámbito educativo universitario. La utilización de plataformas educativas a nivel universitario permite que las clases presenciales adquieran una extensión en la virtualidad. De este modo el proceso de enseñanza-aprendizaje pasa de ser meramente expositivo por parte del docente y memorístico desde el lado del estudiante, a un proceso de tipo constructivista por parte del estudiantado. La implementación de herramientas tecnológicas, como la mensajería interna, los wikis y los foros académicos,en las plataformas educativas permite la interacción entre los docentes, los estudiantes y los materiales educativos, contribuyendo a la producción de nuevos conocimientos a partir del intercambio y la reflexión; construyendo de manera colaborativa su propio aprendizaje. Como objetivo general se planteó: Implementar nuevos recursos dentro del Aula Virtual a través del uso de herramientas colaborativas aplicadas al curso de Teriogenología.

Trabajo Final (Especialización en Tecnologías Multimedia para Desarrollos Educativos) -- UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2020