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Título de Acceso Abierto
Diseño y optimización de un proceso de producción de muteínas de interferón-alfa2b humano con mayor actividad biológica mediante glicosilación en células de mamífero
Agustina Gugliotta Marcos Oggero Karina Valeria Mariño María Victoria Miranda Daniel Turyn Natalia Ceaglio
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En el presente trabajo de tesis se llevó a cabo la producción de IFN4N empleando células CHO-K1 y HEK293 como huéspedes y purificación. IFN4NCHO e IFN4NHEK fueron caracterizados en términos de su grado de glicosilación, farmacocinética y actividad biológica. El IFN4NCHO presentó una masa molecular aparente superior y N-glicanos altamente ramificados con un mayor contenido de ácido siálico respecto de la molécula obtenida a partir de HEK. Estudios de farmacocinética revelaron la existencia de diferencias significativas sólo en la etapa de absorción. Si bien ensayos de actividad biológica antiviral in vitro demostraron similitud entre ambas proteínas, la actividad antiproliferativa específica in vitro resultó dos veces superior para la variante obtenida en células HEK. El análisis de la actividad biológica antitumoral in vivo permitió confirmar estos resultados, demostrando la mayor potencia antitumoral del IFN4NHEK. Por otra parte se llevó a cabo la generación de nuevas muteínas hiperglicosiladas del hIFN-alfa2b, con el objetivo de optimizar la molécula IFN4N. El estudio de las nuevas moléculas permitió observar que el grado de glicosilación de las mismas se incrementó conforme aumentó el número de sitios potenciales para N-glicosilación, lo cual se tradujo en un incremento del tiempo de vida media plasmática. A su vez, las variantes carentes de la modificación R23N evidenciaron valores de ABE antiproliferativa in vitro superiores respecto del IFN4N. Los resultados de esta tesis revelan la importancia de encontrar el balance apropiado entre la actividad biológica in vitro y las propiedades farmacocinéticas para la obtención de un producto terapéutico innovador y efectivo.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
Interferon alpha; CHO-K1; HEK293; Glycoengineering; Antitumor activity; Pharmacokinetics; Interferón alfa; Glicoingeniería; Actividad antitumoral; Farmacocinética
Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 2017 | Biblioteca Virtual de la Universidad Nacional del Litoral (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
2017-03-15
