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La relación entre hombres y mujeres en cuanto al padecimiento de la tuberculosis pulmonar es 7/3 a favor de los primeros. Las hormonas sexuales pueden ser un factor a tener en cuenta en esta diferencia, dado los efectos inhibitorios de la testosterona sobre la activación de macrófagos y la producción de citocinas pro-inflamatorias, mientras que los estrógenos son más proclives a inducir la producción de estos mediadores. En función de estas cuestiones, en una primera etapa el presente trabajo de tesis estuvo orientado a comparar la evolución de la tuberculosis en ratones machos y hembras en base a la utilización de un modelo de enfermedad progresiva. Ratones BALB/c, machos y hembras se asignaron al azar en dos grupos: castrados o con operación simulada y se infectaron por vía intratraqueal con una alta dosis de la cepa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Los ratones fueron sacrificados a diferentes momentos y en sus pulmones se determinaron la carga bacilar, la reacción inflamatoria, expresión de ARN mensajeros para diferentes citocinas, la supervivencia y niveles de testosterona en suero. Los ratones machos no castrados mostraron mayor mortalidad y carga bacilar durante la enfermedad avanzada respecto de las hembras y machos castrados. En comparación con los machos sin manipular, las hembras y machos castrados mostraron una mayor inflamación en todos los compartimentos de pulmón, como así también una reacción granulomatosa y desarrollo de neumonía más precoz, mientras que entre los orquitectomizados y las hembras no hubo diferencias significativas. Las hembras y machos castrados mostraron una mayor expresión de mARN para TNFα, IFNγ, IL-12, iNOS e IL-17 respecto de los machos no castrados, durante el primer mes de la infección. Los niveles de testosterona de los machos se hallaron aumentados durante la infección tardía. La orquitectomía al día 60 post-infección produjo una disminución significativa de la carga bacilar en coexistencia con una mayor expresión de TNFα, IL-12 e IFNγ. Resulta claro que en el modelo analizado, los ratones machos resultaron más susceptibles a la tuberculosis y este fenómeno fue revertido por la castración lo cual habla del rol de la testosterona en este déficit de la respuesta defensiva. La lógica para el estudio en pacientes tuberculosos se contextualizó en torno a la naturaleza crónica de la tuberculosis y la reacción inflamatoria acompañante la cual está implicada en una serie de cambios metabólicos e inmuno-endócrinos típicos de la enfermedad. Para profundizar en torno a esta problemática nos propusimos explorar en primer término las variaciones en cuanto a los componentes del eje hipotálamo-hipofisario- gonadal y su relación con las citocinas claramente inmunopatológicas en tuberculosis, en pacientes varones con enfermedad activa. Se utilizaron muestras de plasma de 36 casos no tratados con TB pulmonar, HIV negativos en quienes se determinaron los niveles de TNFα, IFNγ, TGF-β, IL-6, cortisol, dehidroepiandrosterona, testosterona, progesterona, estradiol, hormona luteinizante (LH) y la hormona folículo-estimulante (por ELISA), en simultáneo con 21 voluntarios sanos sin contacto con pacientes tuberculosos y edad similar (media general 40 ± 16.8 años, desvío estándar). Los pacientes mostraron disminución de los niveles de testosterona en presencia de altas cantidades de LH, junto con concentraciones aumentadas de IFNγ, IL-6 y TGF-β. Dado que esta disociación entre LH elevada y testosterona descendida sugería la existencia de algún fenómeno inhibitorio a nivel gonadal, se procesaron muestras histológicas testiculares de necropsias de pacientes que mueren de tuberculosis para la inmunomarcación de IL-1β, TNFα, IL-6 e IFNγ, habida cuenta que estas citocinas podría interferir con la síntesis de esteroides. Secciones histológicas testiculares mostraron abundante presencia de IL-1β, TNFα, IL-6 e IFNγ en macrófagos intersticiales, células de Sertoli y algunas espermatogonias. A partir de esta evidencia se decidió trabajar con células de Leydig murinas (línea celular TM3) la cual fue expuesta a diferentes concentraciones de citocinas de ratón relevantes en la inmunopatología de la tuberculosis como TNFα, IFNγ TGF-β. En el tratamiento in vitro de células de Leydig con estas citocinas condujo a una notable reducción de la producción de testosterona. Ello pone de relieve las implicancias de la respuesta inflamatoria sobre la síntesis de esteroides gonadales con todas las eventuales repercusiones que esto podría tener en torno a las acciones de este andrógeno sea como hormona anti-inflamatoria, inmunomoduladora, anabólica y obviamente de la reproducción.

Fil:Coulombié, Félix Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

INTRODUCCIÓN: La interacción de MICA con el receptor activador de citotoxicidad NKG2D (expresado en células NK y linfocitos T Ɣδ y αβ CD8+), desencadena una respuesta citotóxica contra células que expresan MICA. MICA se induce por estímulos de estrés, infecciones, neotransformación o linfocitos T activados con fitohemaglutinina. OBJETIVOS: a) estudiar la expresión de MICA en linfocitos T activados con estímulos fisiológicos; b) investigar los mecanismos moleculares involucrados y; c) investigar las consecuencias funcionales de dicha expresión. RESULTADOS: Por Western Blot, RT-PCR y citometría de flujo se observó que MICA se induce en linfocitos T presentes en células mononucleares de sangre periférica (CMSPs) por estimulación con células alogeneicas, por microagregación del complejo TCR/CD3 o por coestimulación con la molécula CD28 y PMA. Los niveles de expresión de MICA alcanzaron una meseta a los 4-7 días post-estímulo. Empleando inhibidores farmacológicos, observamos que la expresión de MICA inducida por la microagregación del complejo TCR/CD3, o la coestimulación a través de CD28 y PMA involucran a Lck/Fyn, ERK1/2, calcineurina, p38 MAPK, p70 56 y Jak. Asimismo, la inhibición farmacológica de NF-kB bloqueó la expresión de MICA en linfocitos T activados de la misma manera. Detectamos un sitio de unión KB localizado en el primer intrón del gen de MICA, y por ensayos de supershift observamos que esta secuencia une a los dímeros p65(RelA)/p50 y p50/p50 presentes en extractos nucleares de linfocitos T activados. Asimismo, la sobreexpresión de RelA en células HeLa por transfección transitoria incrementó los niveles de MICA, confirmando que la expresión de dicho gen es regulada por NF-kB. Además, por Western Blot observamos que CMSPs estimuladas con las citoquinas mitogénicas IL-2 e IL-4, lo mismo que linfocitos T polarizados hacia un perfil Th1 o Th2 inducen la expresión de MICA. Linfocitos T CD4+ purificados y activados con PMA e Ionomicina, pero no linfocitos T CD4+ presentes en CMSPs, expresan MICA en su superficie. Por ensayos de transwell, observamos que este fenómeno se debe a un factor soluble liberado por CMSPs activadas. Además, linfocitos T CD4+ activados con PMA e Ionomicina son blancos de citotoxicidad por células NK autólogas activadas con IL-2 (LAK). El bloqueo de la interacción MICA-NKG2D con AcMo anti-MICA mostró que MICA juega un rol menor en dicha respuesta. CONCLUSIONES: MICA se induce en linfocitos T activados por estímulos fisiológicos e involucra a la señalización de Lck/Fyn, ERK1/2, calcineurina, p38 MAPK, p70 56k, Jak y al factor de transcripción NF-kB. La expresión de MICA en superficie de linfocitos T tiene un rol menor en la lisis por células NK activadas. En esta tesis se describen por primera vez algunas de las vías de transducción de señales y un factor de transcripción involucrados en la expresión de MICA. Los resultados presentados sugieren además que la interacción MICA-NKG2D podría constituir un nuevo mecanismo de regulación de la respuesta inmune adaptativa.

La enfermedad de Chagas es causada por el parásito intracelular Trypanosoma cruzi, afecta entre 6 y 8 millones de personas a nivel global y es la principal causa de miocarditis infecciosa en el mundo. Las zonas afectadas incluyen todo America y actualmente tambien se encuentran casos en Europa debido a la migración. Durante la etapa crónica de la enfermedad es muy bajo el porcentaje de pacientes adultos que reciben tratamiento etiológico para la infeccion, a pesar de haberse encontrado una tasa de negativización serológica de alrededor del 20%, una caída significativa de títulos serológicos cercana al 50% y una menor tasa de progresión luego del tratamiento con benznidazol. Una de las principales limitaciones del tratamiento es la aparición de efectos adversos, con una tasa de suspensión aproximada de entre el 17 y 31 % en pacientes tratados con benznidazol, y la lenta movilización de los niveles de anticuerpos. Contrariamente a la idea general de que la suspensión del tratamiento ante la aparición de efectos adversos constituye una expresión de falla terapeútica, en un estudio realizado por el grupo de médicos colaboradores se observó que una proporción de los pacientes con esquema incompleto de tratamiento con benznidazol, alcanzaron la seroconversión. En un modelo experimental de infección en ratones se ha demostrado que esquemas más cortos de tratamiento con benznidazol lograban curar la infección. El objetivo de este trabajo fue comparar la evolución de la respuesta celular y humoral en pacientes con enfermedad de Chagas crónica que recibieron el tratamiento completo o incompleto con benznidazol. También se planteó determinar si el grado de inmunocompetencia previo al tratamiento se asociaba con el éxito terapéutico en los pacientes con esquemas más cortos de tratamiento. Como estudio anexo, se planteó explorar los procesos inmunológicos que median la aparición de efectos adversos. Se incorporaron 93 pacientes adultos, treinta y tres de ellos recibieron tratamiento incompleto con benznidazol debido a la aparición de efectos adversos a los 10 días tratamiento en promedio. El efecto adverso más común fue la aparición de exantema maculopapular. La mediana de seguimiento fue de 84 meses (rango = 24-141). A distintos tiempos postratamiento se evaluó la presencia de anticuerpos específicos para T. cruzi por técnicas serológicas convencionales y por un ensayo de multiplex utilizando proteínas recombinantes derivadas de T. cruzi. Los niveles de anticuerpos específicos para T. cruzi disminuyeron significativamente tanto en los pacientes con tratamiento incompleto como con tratamiento completo, encontrándose que la disminución en el primer grupo fue más lenta pero alcanzó la misma proporción de seronegativizaciones por serología convencional. A través del ensayo de multiplex también se evidenció una caída en los niveles de anticuerpos específicos para proteínas recombinantes del parásito en ambos grupos de pacientes tratados. Para analizar la respuesta celular, se cuantificó el número de células productoras de IFN-γ en respuesta a antígenos derivados de T. cruzi utilizando el ensayo de ELISPOT. Se observó que la cantidad de células productoras de IFN-γ disminuyeron significativamente tanto en pacientes con tratamiento incompleto como con tratamiento completo. Posteriormente, se analizó la expresión de un grupo de marcadores fenotípicos en linfocitos T CD4+ y CD8+ cuya expresión se altera en presencia del antígeno. Se encontró una disminución en el porcentaje de linfocitos T activados, un incremento en el número de linfocitos T vírgenes y de memoria central y un aumento en la modulación del receptor de IL-7 en ambos grupos. La funcionalidad de los linfocitos T CD4+ específicos para T.cruzi cambió luego del tratamiento, encontrándose un mayor impacto luego del esquema completo de tratamiento. Los resultados de PCR no brindaron suficiente información respecto a falla terapéutica, dado que la mayoría de los pacientes mostraron PCR no detectable al inicio del tratamiento y estos resultados no se modificaron luego del tratamiento parasiticida. El seguimiento minucioso de pacientes que recibieron esquemas más cortos de tratamiento con benznidazol confirma que tanto el grupo de pacientes con tratamiento completo así como aquellos que recibieron esquemas más cortos muestran cambios en la respuesta humoral y celular compatibles con una reducción de la carga parasitaria. A partir del estudio de los procesos inmunológicos que median las reacciones adversas al benznidazol, se pudo comprobar la presencia de linfocitos T CD4+ y CD8+ en biopsias de piel de los pacientes con dermatitis originadas durante el tratamiento con esta droga. En los pacientes que presentaron dermatitis severa también se observó un aumento en los niveles séricos de FAS-L soluble que en algunos casos se acompañaba por un aumento en los niveles de IL-5 e IL-13 en el momento de la reacción adversa. Utilizando la técnica de ELISPOT para IFN-γ, IL-2, e IL5 y de proliferación por tinción con CFSE, sólo en tres, de un total de veinte pacientes con esquema incompleto evaluados, se pudo detectar células productoras de IFN-γ reactivas al benznidazol. Por lo tanto, estos resultados junto con la presencia de linfocitos T hallados en las lesiones de piel durante la dermatitis inducida por benznidazol, son indicios de un proceso de hipersensibilidad retardada. Los resultados de este trabajo de tesis confirman la utilidad de marcadores de la respuesta celular y humoral específicas para T. cruzi para evidenciar el éxito terapéutico en pacientes que han recibido tratamiento incompleto. Estos resultados también enfatizan la necesidad de realizar el seguimiento clínico y serológico de pacientes con tratamiento incompleto y abren la posibilidad del uso de dosis más bajas de benznidazol.

Se evaluó en bovinos la respuesta inmune humoral y celular inducida después de la vacunación con vacunas contra HVB-l y el subsecuente desafío con la cepa LA de HVB-l. Los animales fueron vacunados intramuscularmente (IM) con vacunas inactivadas contra HVB-I conteniendo aceite mineral , aceite mineral con Avridine (emulsiones agua en aceite), o aceite no mineral (squalane) con un sulfolipocliclodextrin (SL-CD/S/W, emulsión aceite en agua). No se registraron diferencias significativas en los niveles de anticuerpos inducidos por las 3 vacunas evaluadas. Sin embargo la respuesta celular fue más elevada y temprana cuando estaba incluido en la formulación vacunal el SL-CD/S/W. Se evaluó la eficacia de las vacunas después del desafpio intranasal con la cepa virulenta LA de HVB-I. Los animales vacunados con SL-CD/S/W tuvieron menor excreción viral y menores síntomas clínicos que los animales controles sin vacunar. Cuando se relacionaron los niveles de IgG2 e IgG1 con la reducción de excreción viral se observó que, independientemente del adyuvante utilizado, el grupo que presentó al momento del desafío, niveles de la relación IgG2/IgG1 mayores a l fue el grupo que presentó menor número de animales con excreción viral. Además los animales inoculados con SL-CD/S/W no presentaron reacciones adversas. Todos estos factores combinados con la gran eficacia y la fácil manipulación del aceite biodegradable hace de la vacuna formulada con este nuevo adyuvante una importante contribución para la industria de vacunas veterinarias.

La alergia a las proteínas que contiene la leche de vaca (LV) es la alergia alimentaria más frecuente en nuestro país, y en muchas regiones del mundo, y se presenta principalmente en niños menores de 3 años (6 á 8%). La alergia puede presentarse desde los primeros meses de vida debido a la exposición temprana a las proteínas de leche de vaca, y se estima que en el 80-90% de los pacientes aproximadamente se inducen los mecanismos de tolerancia específica a partir de los 3 a 6 años de vida que permiten un adecuado control inmunológico de estos alergenos en la mucosa gastrointestinal. Para su tratamiento la primera elección terapéutica es la dieta de supresión, evitando toda estimulación antigénica. Sin embargo, en lactantes significa una tarea muy difícil y debe reemplazarse por un sustituto lácteo, que generalmente son hidrolizados extensivos de las proteínas de LV. Un sustituto alternativo frecuentemente empleado en nuestro medio son las fórmulas a base de proteínas de soja. Aunque suelen ser tolerados por la mayoría de los pacientes la literatura internacional describe que un 15-40% de los pacientes alérgicos a las proteínas de LV no toleran las proteínas de soja, aún cuando no han sido previamente expuestos a la soja. Nuestro grupo ha descripto la existencia de reactividad cruzada entre las proteínas de LV y de soja lo cual permite explicar la intolerancia descripta (Rozenfeld et al.2002; R Curciarello et al. 2008; Smaldini et al. 2011). Otra dificultad que el médico debe considerar con la familia del chico alérgico, y no es menor, es el hecho que las proteínas de la leche (y de la soja) son frecuentemente utilizadas por la industria alimenticia como suplemento por sus propiedades funcionales. Esto determina que la educación del paciente y su entorno en cuanto a qué alimentos pueden comer y cuáles no es un punto fundamental en el tratamiento. Inclusive estas proteínas también pueden presentarse como alergenos ocultos no declarados por el fabricante, o como contaminantes de un alimento. A partir de estas observaciones, en este trabajo se decidió optimizar un modelo murino de alergia a proteínas de leche bovina, previamente desarrollado por el grupo, para su posterior empleo como herramienta in vivo para distintos tipos de estudios. En este trabajo de tesis, el mismo se ha empleado para evaluar potenciales estrategias terapéuticas basadas en la inmunomodulación. De esta manera hemos logrado re-direccionar el sistema inmune, o la respuesta inmune Th2-dependiente específica de alergenos de la leche bovina administrando por mucosas proteínas de membrana de Brucella abortus, bacterias muertas del género Actinomycetales, y proteínas de leche de vaca o de soja. En los 3 casos los mecanismos inmunológicos inducidos son diferentes, pero tienen en común que cuando el animal alérgico y tratado es expuesto a proteína de leche bovina por vía oral, los síntomas inducidos son más suaves en comparación con un ratón alérgico no tratado. Estos resultados son alentadores para el desarrollo de futuras terapias inmunomodulatorias a aplicar en pacientes con alergia alimentaria explotando la posible modulación de la inmunidad sistémica a través de la manipulación del sistema inmune asociado a mucosas, y de la interconexión que existe entre las mismas. Es importante resaltar que en un individuo no alérgico la tolerancia oral es el proceso que evita la instauración de mecanismos de hipersensibilidad frente a la exposición a antígenos de la dieta y de la flora comensal en la mucosa gastrointestinal. En individuos alérgicos, y por razones aún no completamente dilucidadas, fallas en los mecanismos de tolerancia a los alergenos que ingresan por la vía oral determinan una activación aberrante del sistema inmune local y sistémico, y la consiguiente instauración de un proceso inflamatorio en la mucosa. Hay trabajos que demuestran que el balance tolerancia vs activación en estos pacientes no funciona adecuadamente (Sicherer y Sampson 2006; J. Wang y Sampson 2011) y los estudios aquí planteados podrían ser la base experimental para el desarrollo de futuras terapias preventivas o correctivas.

La teoría de la vigilancia inmunológica ha ejercido una gran influencia en los estudios destinados a comprender la naturaleza de los procesos malignos. Según esta teoria, las células neoplásicas surgen habitualmente en el organismo portando neo-antígenos que el sistema inmunológico del huésped reconoce como no-propios, promoviéndose en consecuencia, una respuesta que destruye tales células antes de que se establezcan comoun tumor clínico. Si bien en la forma propuesta por Burnet, esto es, vigilancia llevada a cabo por linfocitos T, dependientes del timo, la teoria parece aplicarse sólo a casos muy restringidos, ello no significa que otros mecanismos específicos o inespecíficos no puedan ser operativamente más importantes. En esta Tesis se ha evaluado la posible existencia de un sistema de vigilancia inmunológica en las neoplasias producidas por los oncornavirus murinos altamente patógenos, tomando como modelo el virus leucemógeno PLLV-Tz. El plan de la investigación consistió en analizar en este sistema viral, dos predicciones esenciales de la teoría, a saber: 1°) que el agente oncogénico debe deprimir la respuesta inmune del huésped como medio para disminuir la vigilancia inmunológica; 2°) que agentes inmunodepresores o inmunoestimuladores deben facilitar o dificultar respectivamente la aparición de la leucemia. Los resultados de este trabajo revelaron en primer lugar, que la inmunidad celular dependiente del timo, medida in vivo como reacción de rechazo de tejido alogeneico o reacción de injerto contra huésped no fue afectada por PLLV-T2 en un período temprano de esta leucemia viral, lo cual sugiere que aquélla no cumpliria un papel importante como mecanismo de vigilancia en este sistema. En lo que respecta a la inmunidad humoral, el PLLV-T2 produjo un profundo deterioro de la respuesta a glóbulos rojos de carnero (GRC)y un efecto más moderado sobre la respuesta a lipopolisacáridos (LPS) en la cepa BALB/c. No obstante, se demostró que este fenómeno no era universal ya que no sólo no habia una relación directamente proporcional entre la inmunodepresión temprana a GRC y la leucemogénesis en distintas cepas de ratones sino que había algunas, —como la DBA/2- que teniendo una susceptibilidad a los efectos oncogénicos de PLLV-T2 comparable a la de la cepa BALB/c no evidenciaron una respuesta inmune deteriorada en una etapa temprana del desarrollo leucémico. Asimismo, en la propia cepa BALB/c cuando se estudió más detenidamente la inmunidad humoral en los animales infectados con PLLV-T2, se comprobó que la inmunodepresión efectiva contra el antígeno de prueba comenzaba a revelarse sólo cuando el bazo alcanzaba un tamaño perceptible -es decir, cuando la leucemia se hacía evidente- aún cuando el antígeno hubiera sido inoculado en la fase pre-clinica de la enfermedad. Por último, la utilización de ciclofosfamida (CY), tres días antes del desafío viral en una dosis que deprimía la inmunidad humoral (300mg/Kg) y en otra que au mentaba la inmunidad celular (20mg/Kg) no modificó el cuso de la leucemia provocada por PLLV-T2 en un rango que abarcaba desde la dilución 10-1 a la 10-7. Todos estos resultados muestran que en la leucemia provocada por PLLV-T2 y por extensión en las neoplgsias causadas por los restantes oncornavirus altamente patógenos, no sería necesario un componente de inmunodepresión como condición previa para el desarrollo de la enfermedad.

Los primeros trabajos de inmunización contra el cáncer se remontan a principios del siglo. Desde entonces han habido innumerables intentos de prevenir los distintos tipos de neoplasia experimentalmente, entre ellos la leucemia murina. Los trabajos de inmunoprevención de leucemias previos al presente trabajo, han utilizado protocolos de inmunización sumamente variables. En pocas ocasiones se han efectuado estudios contra leucemias exógenas (primarias y trasplantables) y endógenas (espontáneas) conjuntamente, y que efectuaran un detenido análisis de la sobrevida final de los animales vacunados . El propósito de nuestro trabajo fue doble. En primer lugar se estudió un protocolo de vacunación que utilizaba el virus de sarcoma de Moloney (VSM-M) como inmunógeno activo contra leucemias exógenas y endógenas pertenecientes a la Sección Leucemia Experimental del Instituto de Investigaciones Hematológicas de la Academia Nacional de Medicina. En segundo lugar, se deseaba aportar datos para un concepto unificador de los diferentes leucovirus que inducen la leucemia murina a través de estudios de trasplante in vivo "que permiten caracterizar a los antígenos tumorales especificos de trasplante. El virus de sarcoma de Moloney y los sarcomas que induce han sido muy caracterizados. La utilización del virus infeccioso como inmunógenoactivo y su inoculación por via intramuscular indujo la aparición de sarcomas recurrentes en diversas localizaciones varios meses después de la primoinoculación. Utilizando la via subcutánea se pudo reducir a un minimo estas recurrencias, como asi también observar sarcomas primarios menores de regresión más rápida, fuerte inmunización contra desafíos posteriores con VSM-M y una mayor sobrevida los ratones inmunizados. Las partidas de VSM-M deben ser cuidadosamente definidas ya que pueden presentar comportamientos biológicos y patológicos diferentes. La utilización del VSM-M como inmunógeno activo permitió proteger contra las leucemias primarias inducidas por los virus de leucemia de Friend, Moloney y Rauscher, demostrando la efectividad del protocolo empleado. Posteriormente se lograron resultados positivos con los virus de leucemia PLLV/T2 y H179A pertenecientes a la Sección Leucemia Experimental. No se pudo proteger con este protocolo contra la leucemia primaria inducida por el virus de leucemia de Gross a pesar de existir datos serológicos que indicarian la presencia de antígenos comunes entre este virus y el VSM-M. Los estudios con las leucemias de trasplante inducidas por diversos métodos pertenecientes a la Sección Leucemia Experimental y negativas a la presencia de virus infeccioso por el ensayo de oncogenicidad " in vivo " arrojaron resultados variables. La leucemia H 110 (de inducción por material humano) y la R 14 (de inducción por radiación) pudieron ser prevenidas con este protocolo. La leucemia P 277 (de inducción con virus de leucemia de Moloney) resultó en cambio negativa a este protocolo en experimentos repetidos. Por último el ensayo del protocolo contra la leucemia espontánea de los ratones de las cepas BalB/c y los híbridos Swiss x AkR demostró en ambos casos una mortalidad aumentada en el grupo inmunizado con VSM-M respecto de los controles. Por otra parte fue posible detectar un menor tiempo de latencia para las leucemias espontáneas en los ratones Swiss x AkR vacunados con VSM-M,si bien en número de las mismas que aparecieron en controles e inmunizados fue la misma en 18 meses de observación. En general los ratones vacunados con VSM-M infeccioso por via subcutánea contra la leucemia primaria, trasplantable y espontánea demostraron que a corto plazo no habia mayores problemas que afectaran significativamente la sobrevida producto del protocolo de vacunación utilizado. A largo plazo en cambio, los ratones vacunados con VSM-M presentaban una mortalidad superior a los controles respectivos. Existirian varias posibles explicaciones para este hecho: a) las interacciones entre los virus de leucemia murina exógenos o endógenos con el VSM-M creándose nuevos seudotipos con caracteristicas biológicas y patológicas nuevas; b) una infección crónica persistente de VSM-M que reapareceria más tarde induciendo sarcomas en lugares distantes a la primoinoculación; c) una reaparición de la sensibilidad a la oncogénesis por VSM-M con la mayor edad del ratón; d) el genotipo del ratón vacunado y su relación con la resistencia a la oncogénesis por VSM-M,y e) la activación de virogenes endógenos. Todas estas posibilidades podrian actuar individualmente o en conjunto y ser responsables de la mayor mortalidad observada a largo plazo en los ratones vacunados con VSM-M infeccioso. También se ha intentado llegar a un concepto unificador de los leucovirus murinos caracterizando el antígeno tumoral específico de trasplante (ATET) por medio de los experimentos de inmunoprevención realizados en este trabajo. Nuestras observaciones, tomadas en el contexto de las investigaciones realizadas por otros autores, permiten concluir que el ATET inducido en el ratón por los leucovirus murinos tendria probablemente en su estructura componentes estructurales del virión que le proveerian de una especificidad antigénica FMR (Friend-Moloney-Rauscher) o G (Gross). En conclusión, en el ratón los oncornavirus leucémicos formarian dos grupos separados (FMR y G), a pesar de los datos serológicos y moleculares que indicarian que formarian un grupo único, posiblemente con un antecesor común en el pasado reciente.

Fil:Nepomnaschy, Irene. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Tesis (Dr. Medicina)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas