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Los flavonoides son metabolitos secundarios vegetales y, como tales, son ubicuos en los ecosistemas. En general, se encuentran glicosilados y en su reciclo natural, la desglicosilación es el primer paso catabólico seguido de la oxidación de la estructura aromática. Las diglicosidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis del enlace heterosídico y liberan el disacárido y su correspondiente aglicona en una única reacción. El hongo Acremonium sp. DSM 24697 ha sido descripto como productor de una diglicosidasa, denominada 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa I, específica para flavonoides 7-O-rutinosilados. Si bien la hidrólisis del flavonoide 3-O-rutinosilado rutina no ha sido detectada con esta enzima, esta cepa es capaz de crecer con rutina como fuente de carbono. Basados en estos resultados previos, en el presente trabajo se estudió el sistema enzimático de Acremonium sp. DSM 24697 para la desglicosilación de rutina. Además se realizó una exploración de nuevas diglicosidasas en 28 cepas de los géneros Acremonium y Sarocladium utilizando diversos flavonoides (rutina, diosmina y hesperidina) como fuente de carbono. Rutina (quercetin-3-O-(6-O-α-L-ramnopiranosil-β-D-glucopiranósido) es un flavonoide compuesto por el polifenol quercetina y el disacárido rutinosa. Su desglicosilación enzimática es usualmente cuantificada mediante HPLC debido a la carencia de un método de screening rápido. Así, el desarrollo y validación de un método espectrofotométrico para la cuantificación de quercetina permitió medir la actividad desglicosilante de rutina y evaluar un número mayor de muestras en el tiempo. Los valores máximos de actividad enzimática para Acremonium sp. DSM 24697 y Sarocladium strictum DMic 093557 fueron 11.04 ± 1.15 U/L y 22.4 ± 4.1 U/L, respectivamente. En ambos casos, los productos de reacción se identificaron como rutinosa y quercetina, confirmando la producción de la actividad diglicosidasa. La diglicosidasa de Acremonium sp. DSM 24697 que hidroliza el flavonoide rutina, fue denominada 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa II. Esta última posee un peso molecular aparente de 85 kDa, un pH y una temperatura óptima 5.0 y 50 °C respectivamente. Este catalizador mostró una alta promiscuidad de sustratos respecto de las diglicosidasas descriptas en literatura. Fue capaz de hidrolizar 3-O-rutinósidos, 7-O-rutinósidos y con menor especificidad también hidrolizó 7-O-neohesperidósidos y los polisacáridos xilano y laminarina. El gen que codifica esta proteína se identificó en la secuencia del genoma de Acremonium sp. DSM 24697 y se expresó funcionalmente en Pichia pastoris. La proteína se clasificó dentro de las glicósido hidrolasas de la familia 3 (GH3) a diferencia de las diglicosidasas fúngicas conocidas, que pertenecen a las familias GH1 y GH5. Dentro de esta familia, αRβG II es el primer catalizador que actúa en modo endo y, de acuerdo al mecanismo de reacción retaining de la familia GH3, es capaz de transglicosilar. De esta forma, se sintetizaron rutinósidos de alcoholes primarios, secundarios y fenólicos. Un trabajo de ingeniería del medio de reacción fue llevado a cabo para incrementar la eficiencia de la desglicosilación de flavonoides. Para ello, la catálisis con las diglicosidasas de Acremonium sp. DSM 24697 se realizó en presencia de solventes altamente eutécticos (DES). Los mismos están compuestos por una base de nitrógeno cuaternario y un dador de hidrógeno. La enzima 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa I desglicosiló hesperidina en DESs compuestos por colina-glicerol y colina-etilenglicol en proporciones de hasta 40% v/v DES-Buffer. La actividad de desglicosilación aumentó significativamente cuando la reacción se realizó en un medio que contenía los componentes individuales de los DES (glicerol y etilenglicol) (40% v/v de glicerol produjo un incremento del 140% de la actividad enzimática).

El presente trabajo de Tesis Doctoral, se centró en el desarrollo de nuevas Plataformas de Liberación de Fármacos (PLFs) basadas en nanotecnología como estrategia de optimización de la farmacoterapia relacionada a patologías oculares neovasculares. El trabajo comprendió, la obtención de nanocápsulas lipídicas para la vehiculización de acetónido de triamcinolona y bevacizumab, abordando la terapia convencional para el tratamiento de estas patologías. Además, se estudió el efecto de doxiciclina clorhidrato sobre la angiogénesis como terapia alternativa. En cuanto al desarrollo tecnológico, por un lado, se obtuvieron nanocápsulas lipídicas cargadas con acetónido de triamcinolona (NCLs-TA) mediante el método de inversión de fases, luego de un estudio acabado sobre la composición, incorporación del fármaco y estabilidad de la formulación. Las NCLs-TA mostraron un tamaño medio de partícula (TMP) menor a 50 nm, una distribución estrecha de tamaño y un potencial zeta (PZ) levemente negativo. Además, las NCLs-TA no resultaron citotóxicas en Células Epiteliales de Córnea Humana y, mostraron una reducción de la secreción de interleuquina (IL)-6 en un modelo de eficacia terapéutica in-vitro, a partir del cual se puede inferir la efectividad de su efecto antiinflamatorio. Por otro lado, se obtuvieron nanocápsulas lipídicas cargadas con bevacizumab (NCLs-BVZ) a partir de 1,5 mg; 2,5 mg y 3,0 mg inicales de anticuerpo, mediante el método de post-inserción. Las formulaciones mostraron un TMP entre 123 y 314 nm, un índice de polidispersidad entre 0,23 y 0,39; un PZ entre -28 y -14 mV, y una capacidad de carga de anticuerpo entre 1,30 y 2,94 mg. Las NCLs-BVZ demostraron la capacidad de bevacizumab de unión a su antígeno (Factor de Crecimiento de Endotelio Vascular) in-vitro y, una reducción de la formación de túbulos en un estudio de angiogénesis in-vitro, a partir del cual se puede inferir su efecto antiangiogénico. Por último, en el estudio de prueba de concepto del efecto antiangiogénico de doxiciclina clorhidrato, se demostró que este fármaco reduce la secreción de metaloproteinasas de matriz tanto en estudios in-vitro como en homogenatos de retina provenientes de estudios in-vivo y, además, demostró la reducción de formación de túbulos en un estudio de angiogénesis in-vitro. En este trabajo, tanto la mejora de la terapia convencional de enfermedades oculares neovasculares como la exploración de nuevas terapias alternativas se abordaron con éxito. En este sentido, ambas formulaciones de nanocápsulas lipídicas como el nuevo fármaco alternativo ensayado pueden ser una estrategia interesante para mejorar la efectividad y la seguridad de los tratatmientos de las enfermedades oculares neovasculares.

El diseño avanzado de sistemas nanoparticulados permite elaborar sistemas químicos integrados donde convergen distintos componentes: metales, óxidos inorgánicos y semiconductores junto con biopolímeros, enzimas o hidratos de carbono. Compatibilizar distintos materiales en entidades funcionales dispersas abre una interesante perspectiva para el desarrollo de sistemas nanoscópicos y microscópicos destinados al tratamiento y diagnóstico de enfermedades (teranóstica), entre otras aplicaciones. El trabajo de investigación que se presenta en esta tesis incluyó en una primera parte el desarrollo de la síntesis orgánica de una molécula de la familia de las aminotricarbocianinas (Cy-PIP) cuya emisión de fluorescencia es función del pH del medio. Cy-PIP es un sensor molecular de pH con marcada sensibilidad en el rango de pH fisológico (6-8) y su propiedad distintiva es que absorbe y emite luz en la región del IR cercano del espectro electromagnético (650-950 nm, NIR). La luz de NIR conforma una “ventana biológica” apta para realizar detección no invasiva de moléculas in vivo. Luego se sintetizaron nanopartículas de SiO2 (NP) funcionalizadas para la unión posterior de Cy-PIP a la superficie. Así, se logró desarrollar un nanosensor fluorescente de pH que opera en el NIR (Cy-PIP@SiO2) y cuyo pKa es cercano al pH fisiológico. Con el objetivo de emplear estas NP en sistemas biológicos, se evaluó la respuesta de emisión de fluorescencia en células de la línea HeLa, in vitro e in vivo. Se observó que el cambio de pH que implica el proceso de endocitosis puede ser estudiado mediante la utilización del nanosensor, en las condiciones de trabajo ensayadas. En una segunda parte, se exploró la incorporación de azul de metileno (MB) a NP de sílice por diversos métodos de síntesis y se estudió su capacidad de generación de 1O2 con el objeto de establecer plataformas para fototerapia. Por otra parte, se estudió la incorporación simultánea de dos sondas fluorescentes (de visible y de NIR) en el mismo nano-objeto, para construir nanosensores autoreferenciados de pH. Todos los resultados obtenidos en este trabajo de tesis han permitido desarrollar una plataforma de síntesis reproducible de NP fluorescentes de SiO2 que pueden diseñarse de manera específica de acuerdo a la aplicación proyectada. Más aún, la plataforma resulta muy promisoria para el desarrollo de nanosensores que además lleven funciones químicas específicas para el reconocimiento por receptores celulares y/o que, ante ciertas señales del entorno logren disparar acciones específicas (p.ej. liberación controlada de moléculas como respuesta a estímulos enzimáticos o celulares).

Esta tesis es un estudio experimental y teórico sobre sistemas ópticos que presentan excitabilidad. La excitabilidad es un concepto que proviene de la biología, en particular de neurociencia, y se refiere a la propiedad de ciertos sistemas de generar pulsos sólo cuando una perturbación externa supera un dado umbral. Cuando un sistema excitable se encuentra en presencia de ruido, las fluctuaciones estocásticas pueden llevarlo por encima del umbral y así provocar una dinámica de pulsación. Nuestro trabajo se basa en la generación de herramientas para poder validar o refutar escenarios de excitabilidad y ruido en sistemas ópticos donde se conjetura la existencia de excitabilidad. Los sistemas estudiados son tres: un láser de semiconductor con retroacción óptica, dos tales sistemas acoplados simétricamente mediante mutua inyección de luz, y un láser de estado sólido con absorbente saturable. El procedimiento propuesto para validar o refutar escenarios de excitabilidad se basa en la modelización con sistemas dinámicos sencillos, junto con la construcción de observables adecuados con el objeto de comparar las medidas experimentales con los resultados teóricos. De esta manera pudimos demostrar que la dinámica de un laser de semiconductor con retroacción óptica de moderada a fuerte puede interpretarse con un paradigma de esqueleto determinista en dos dimensiones (con propiedades excitables) más ruido. Por su parte, la dinámica de las celdas acopladas en el régimen de alta disipación pudo explicarse a partir de un 2-toro en presencia de ruido, lo que permite interpretar dos láseres con retroacción acoplados ópticamente como dos sistemas excitables acoplados. Por último, mostramos por primera vez excitabilidad en un láser de estado sólido con absorbente saturable. Dicho sistema no es influenciado significativamente por ruido, con lo que pueden aplicarse técnicas convencionales de estimulación externa para evaluar excitabilidad.

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019

Trabajo Integrador Final para obtener el título de Especialista en Agroecologia, presentado en la Universidad Nacional de La Matanza en febrero de 2018.

Tesis (Doctor en Astronomía)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía y Física, 2009.

El hombre habita un increíble planeta que le ha permitido desarrollarse a partir de infinitos procesos de aprendizaje. La naturaleza le ha puesto innumerables obstáculos, diferentes desafíos que han producido, entre muchas consecuencias, el estado de avance de la tecnología en que nos encontramos. Junto a la maravillosa bendición de poder pensar y aprender día a día, también somos máximos responsables del cuidado de la Tierra y de todos los seres que la habitan en virtud de los procesos ajenos a la naturaleza que impulsamos. Uno de los oponentes de mayor magnitud al que nos enfrentamos es el de poder emplear las energías denominadas alternativas para disminuir el estado de deterioro en el que se encuentra nuestro hábitat consecuencia del mencionado accionar. Esta tesis no pretende de ninguna manera responder a cuestiones filosóficas especiales de índole alguna. No obstante, la conjunción de distintos aspectos le da un marco, tal vez especial al problema que trata. En respuesta a las cuestiones establecidas, el desarrollo del aprovechamiento de estas energías ha ido progresando (lentamente) con el transcurso del tiempo. Si además se suman las necesidades de agua en regiones remotas, la provisión del vital elemento a través de un medio alternativo de energía es una solución viable, punto en el que se centra este trabajo de tesis aplicando herramientas apropiadas, es decir, que garanticen robustez, confiabilidad y de bajo costo. El trabajo tiene por objetivo, establecida una problemática real, tratar de resolverla de manera práctica. Se ha tomado en cuenta además, el objetivo de maximizar la extracción de energía del recurso eólico disponible y si éste fuera excesivo, obtener lo máximo contemplando las limitaciones de los componentes del sistema. Respecto de emplear tecnología robusta, se han considerado elementos de probado uso y confiabilidad de trabajo y cuando esto no fuera evidente se ha demostrado tal característica. Debido a las características no lineales del sistema, a las perturbaciones y a la variabilidad de la fuente primaria de energía, a las restricciones en la medida de la velocidad del viento, la eficiencia, confiabilidad y robustez de este tipo de sistemas, están fuertemente ligadas a la efectividad de su control. Luego, en esta tesis se propone y se evalúa la aplicación de conceptos de regímenes deslizantes para optimizar el comportamiento del sistema. Es decir, el diseño del control se sustenta en una teoría con cualidades y características inherentemente robustas, además de una implementación relativamente sencilla y, por ende, de bajo costo. Luego, este trabajo se basa en la aplicación de un control que contenga las características citadas en el marco de una posible implementación práctica.

INTRODUCCIÓN - 1. Análisis de la situación - 2. Justificación de la investigación - 3. Estructura - CAPÍTULO I: SUPUESTO Y OBJETIVOS - 1. Planteo del supuesto hipotético - 2. Objetivo general - 3. Objetivos específicos - CAPÍTULO II: METODOLOGÍA - 1. Objeto de estudio - 2. Propósito y supuesto de trabajo - 3. Datos - 4. Fuentes documentales y bibliográficas - 5. Unidad de análisis - 6. Variables - 7. Dimensión témporo-espacial - CAPÍTULO III: ESTUDIO EXPLORATORIO SOBRE SITUACIÓN, SEGURIDAD SOCIAL, CIRCULACIÓN DE TRABAJADORES Y ACUERDO MULTILATERAL DEL MERCOSUR - A) MERCOSUR Y DERECHO COMUNITARIO - A)1. Composición - A)2. Cotejo de países - A)3. Origen. Potencialidad - A)4. Derecho Comunitario - A)5. Actualidad - A)6. ¿En qué etapa de desarrollo se encuentra el MERCOSUR? - B) SEGURIDAD SOCIAL - B)1. Introducción - B)2. Derecho de la Seguridad Social - B)3. Principios generales - B)4. Sistema Previsional - C) CIRCULACIÓN DE TRABAJADORES EN EL MERCOSUR - C)1. Introducción - C)2. Protección a través de instrumentos internacionales - C)3. Principios de los Convenios Internacionales de Seg. Social - C)4. Convenios Bilaterales de Seguridad Social - D) ACUERDO MULTILATERAL DE LA SEGURIDAD SOCIAL DEL MERCOSUR - D)1. Introducción y génesis. - D)2. Ratificaciones y entrada en vigencia del Acuerdo Multilateral - D)3. Autoridades e instituciones - D)3.1. Autoridad competente - D)3.2. Entidades gestoras - D)3.3. Organismos de enlace - D)3.4. Comisión Multilateral Permanente - D)4. Abierto - CAPÍTULO IV: SISTEMAS PREVISIONALES NACIONALES - A) LEY DE JUBILACIONES DE ARGENTINA – LEY 24.241- A)1.Introducción - A)2. Remuneración, aportes y contribuciones - A)2.1. Remuneración - A)2.2. Aportes y contribuciones - A)3. Prestaciones - A)3.1. Prestación Básica Universal (PBU) - A)3.2. Prestación Compensatoria (PC) - A)3.3. Prestación Adicional por Permanencia (PAP) - A)3.4. Prestación Anual Complementaria (PAC) - A)4. Movilidad de las prestaciones - A)5. Haber mínimo y máximo - A)6. Síntesis - A)7. Conclusión parcial - B) LEY DE JUBILACIONES DE BRASIL – LEY 8.213 - B)1. Introducción - B)2. Conceptos previos - B)2.1. Ámbito subjetivo y prestaciones - B)2.2. Salario de contribución (aportes y contribuciones) - B)2.3. Salario de beneficio - B)2.4. Factor previsional - B)3. Reajuste de las prestaciones - B)4. Jubilación B)4.1. Jubilación por edad - B)4.2. Jubilación por tiempo de contribución - B)5. Previsión Complementaria (PC) - B)6. Conclusión parcial - CAPÍTULO V: TRATADOS INTERNACIONALES - A)ANÁLISIS DEL ACUERDO MULTILATERAL DE LA SEGURIDAD SOCIAL DEL MERCOSUR Y DE SU REGLAMENTO ADMINISTRATIVO - A)1. Ámbito de aplicación personal - A)2. Ámbito de aplicación material - A)3. Determinación de la legislación aplicable - A)3.1. Regla general - A)3.2. Excepciones - A)4. Prestaciones de salud - A)5. Totalización y prorrateo de las prestaciones - A)5.1. Cotizaciones, supuestos - A)5.2. Límites - A)5.3. Funcionamiento - A)6. Régimen de capitalización - A)7. Competencia y solicitudes - A)8. Sistema de transmisión y validación electrónica de datos - A)9. Conclusión parcia - A)9.1. Totalización y supuesto - A)9.2. Forum Shopping - B) CONVENIO MULTILATERAL IBEROAMERICANO DE SEGURIDAD SOCIAL - B)1. Introducción y génesis - B)2. Características - B)3. Diferencias - B)4. Totalización y proporcionalidad - B)5. Relaciones entre el presente Convenio y otros tratados de Seguridad Social - B)6. Situación actual del Convenio - CAPÍTULO VI: CONCLUSIONES - BIBLIOGRAFÍA - ANEXOS - I. Entrevista de profundidad al Arq. Alberto Mariuzzo - II. Seguridad Social en Europa - III. Formulario MERCOSUR

La producción porcina, a nivel nacional, ha sufrido un incremento sostenido en los últimos años, debido, en gran parte, a una proliferación de los sistemas confinados intensivos. Conjuntamente, en la sociedad creció la preocupación por la aplicación de buenas prácticas pecuarias y por las condiciones de bienestar animal que los sistemas productivos propician a los cerdos, aspecto sobre el cual aún existe escasa información. Se realizó una investigación a fin de conocer el efecto del sistema de producción sobre indicadores comportamentales, fisiológicos de estrés y productivos de cerdos en las etapas de crecimiento y terminación. Se trabajó en dos sistemas de alojamiento: confinado sin ambiente controlado (CONF) e intensivo a campo (IAC), ambos localizados en la provincia de Tucumán, Argentina. Se asignaron 54 cerdos híbridos de ambos sexos por sistema de 32 kg de PV inicial, divididos en 2 grupos/sistema de 27 animales. Se registró el PV individual –los días 1, 37 y 73-, cantidad de alimento suministrada y se estimó la ganancia media diaria (GMD), consumo de alimento (CA) y eficiencia de conversión alimenticia grupal (EC). Se tomaron muestras de sangre de 20 machos castrados/sistema, durante los días 1, 3, 5, 16, 37 y 73 del ensayo, con el fin de analizar el impacto del sistema sobre la fisiología animal y la evolución de la concentración sanguínea de glucosa, cortisol, urea, hematocrito (H), proteína C-reactiva (PCR), proteínas totales (PT) y actividad de enzima creatinquinasa (CK). Además, se realizaron observaciones de comportamiento –se registraron 14 comportamientos- por medio de la metodología de muestreo focal y de barrido a fin de poder determinar patrones comportamentales en ambos sistemas durante los días 1, 2, 4, 15, 36 y 72 del ensayo. La GMD fue mayor (p-valor<0,01) en el sistema IAC que en CONF, durante las dos etapas de alimentación. El CA durante la etapa de crecimiento fue semejante en ambos sistemas, aunque durante la terminación fue mayor (p-valor=0,019) en IAC. El IAC mostró una tendencia (p-valor=0,10) a ser más eficiente en EC durante crecimiento, aunque durante la terminación EC no mostró diferencias (p-valor=0,18). El día 1 del ensayo los cerdos del CONF presentaron valores séricos superiores de PT, urea y glucosa que aquellos del IAC. Las concentraciones de PT, glucosa, urea, cortisol y PCR mostraron efecto de la interacción Sistema*Día (p-valor<0,001). PT siempre fue mayor en CONF. Por su parte, H cambió en función del Día (p-valor<0,0001) y presentó una tendencia (p-valor=0,0591) a ser menor en CONF. CK solo mostró efecto del Día (p-valor=0,0114). La concentración de glucosa fue mayor en CONF, excepto el día 5, donde IAC presentó su máximo valor (104,71 mg/dl). PCR mostró inicialmente valores superiores en IAC, para luego igualarse en ambos sistemas y finalmente presentar mayores valores en CONF. En relación al comportamiento, el día 1 la mayor actividad de los animales se registró en los horarios de la tarde. El día del reagrupamiento se evidenció una mayor cantidad de comportamientos agresivos y sociales dentro del sistema CONF, mientras que los cerdos de IAC mostraron mayor cantidad de comportamientos de Exploración y Pastoreo. Se encontró efecto de la interacción Sistema*Día sobre la cantidad de comportamientos agresivos (p-valor=0,0012) siendo mayor en CONF durante los días 1, 2 y 15, los mismos se localizaron principalmente en el comedero. Las Estereotipias se presentaron sólo en CONF, donde además el comportamiento Sentado presentó una tendencia (p-valor=0,07) de mayor aparición los días 1, 2 y 72. Los animales del IAC mostraron una asociación con el comportamiento Acostado durante la mañana y el mediodía, mientras que por la tarde presentaron mayor Locomoción, comportamiento de Beber y Pastoreo. Los comportamientos de Jugar, Parado y Sentado se debieron analizar de manera parcial dado su baja o nula presencia algunos días del ensayo. Los comportamientos Exploración, Acostado y Beber presentaron efecto de la interacción Sistema*Día (p-valor<0,001). Locomoción y Comer sólo mostraron efecto del día (p-valor<0,0001). Locomoción presentó mayor frecuencia de ocurrencia el día 1. Comer mostró su menor frecuencia el día 72, especialmente en IAC donde los animales incrementaron el tiempo que permanecieron Acostados, producto de las condiciones térmicas adversas. Resulta complejo identificar un factor particular de estrés, aunque es posible enumerar una serie de aspectos que tuvieron una implicancia sobre las variables estudiadas: contaminación ambiental, reagrupamiento, cambio de sitio, condiciones climáticas y hacinamiento. Estos factores actuaron de manera combinada sin evidenciar situaciones de estrés agudo, pero sí síntomas de estrés crónico, especialmente en el sistema confinado.