Catálogo de publicaciones

Fil:Fridman, Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Los efectos de la capsaicina sobre la actividad cardíaca han sido estudiados en diferentes concentraciones, preparados y especies aportando resultados muy diversos que podrían deberse a que la capsaicina evoca respuestas mediadas por la liberación de neurotransmisores de las fibras primarias aferentes sensitivas y por acción directa sobre las células cardíacas. Este trabajo planteó, en primer lugar, el estudio de los posibles efectos inotrópicos, cronotrópicos y lusitrópicos producidos por la estimulación de fibras nerviosas sensibles a la capsaicina en aurícula aislada de rata: A. Utilizando índices apropiados para caracterizar contractilidad y relajación. B. Separando los efectos inotrópicos independientes de los debidos a los cambios en el cronotropismo. C. Identificando los cambios inotrópicos debidos a la liberación de los neurotransmisores de los producidos por acción directa de la capsaicina sobre el miocito cardíaco. El preparado utilizado, aurícula aislada de rata, permite la evaluación de los cambios en la frecuencia de contracción espontánea y de los cambios en la contractilidad tanto a frecuencia espontánea como constante; es por otra parte un preparado que asegura la detección de los efectos de la capsaicina secundarios a la liberación de neurotransmisores por estimulación de las fibras primarias aferentes sensitivas debido a que el tejido auricular está ricamente inervado por este tipo de fibras. En segundo lugar, utilizando células aisladas de aurícula de rata, se investigaron efectos directos de la capsaicina sobre los flujos iónicos medibles por la técnica de patch-clamp.

Fil:Tesone, Marta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La GST de Triatoma infestans es susceptible a la inhibición por algunos flavonoides y colorantes del trifenilmetano. De estos compuestos la quercetina la sulfobromoflaleína y el azul de timo] resultaron ser los más potentes. El tipo de inhibición presentado por estos compuestos fue: competitiva con respecto al CDNB y no competitiva con respecto al GSH para la Q y el AT y no competitiva con respecto a los dos sustratos para la SBF. La GST de Triatoma infestans también es susceptible a la inhibición por aductos formados entre saligeninas cíclicas fosforadas y glutatión. Se sintetizó y purificó un aducto entre el salitión y el GSH y se identificó al inhibidor como el S-(2-hidroxi-bencil)-glutatión. El tipo de inhibición presentado por este compuesto y otro GS-bencil sustituido comercial fue: no competitiva con respecto al CDNB y competitiva con respecto al GSH. La toxicidad en vinchucas del fenitIotión más un inhibidor de GST, la quercetina, demostró un factor de sinergismo de dos respecto a la toxicidad del fenitrotión sólo. También se demostró que el AT sinergiza la toxicidad del fenitrotión cuando éste es administrado por distintas vías (tópico, oral, inyección) así como cuando se utilizan distintos estadios de Triatoma infestans. La GST de Triatoma infesrans es susceptible a la inducción de su actividad mediante la administración de diversas sustancias por diferentes vías. Los compuestos más promisorios fueron : DDT, Salitión, Fenitrotión, Malatión, I-3-A, I-3-C y Flavona. La toxicocinética a 24 hs del 14C-Fenitrotión y 14C-Fenitrotión + Quercetina en vinchucas demostró que: Absorción: La penetración a través de la cuticula es la primera barrera de defensa del insecto en la intoxicación por insecticidas de contacto, ya que entre 8-11% de la dosis original se extrae por wash-off y entre 4-8% queda retenido en la cutícula. No se encuentran diferencias significativas entre los dos tratamientos (p > 0.05). Excreción: El 70% de los insectos tratados presentan una diuresis menor del 17% de la dosis aplicada. Los dos tratamientos demuestran una diferencia significativa del 5% (p < 0.05). El tratamiento combinado resulta en una excreta mayor que no sería suficiente como defensa fisiológica en la intoxicación por insecticidas organofosforados ya que presentan una mayor inhibición de la Ache y mayor mortalidad. Blotransformación: El contenido de compuestos liposolubles en los dos tratamientos presenta diferencias significativas (p < 0.05). En efecto la radiactividad interna soluble en éter etílico del tratamiento combinado sugiere que la quercetina favorecería en un 4% la presencia de formas no polares, básicamente fenitrotión y fenitonón, dentro de los insectos. La radiactividad interna debida a metabolitos polares (hidrosolubles) presenta una diferencia significativa (p < 0.05) entre los dos tratamientos. La presencia de quercetina provoca un 8% menos de metabolitos polares. Esto sugiere que la acción de la quercetina inhibiría parcialmente la detoxificación. Entrada al blanco: La proporción de insecticida que penetra en el SNC medida como la radiactividad presente en la cabeza del insecto resultó del 1% en ambos tratamientos. Toxicodinámia: (unión al receptor) Consecuencias de la entrada al blanco: Se verifica in vivo una inhibición significativamente mayor (p < 0.05) en los tratamientos combinados. La presencia de quercetina o azul de timol favorecerían la inhibición de la Ache en los insectos tratados. El 30% de los insectos presenta una diuresis mayor al 33% y en esos casos no se encuentran diferencias significativas en ninguna de las etapas de la toxicocinética La degradación del l4C-Fenitrotión in vitro, medida como la formación de metabolitos hidrosolubles, producidos por la GST demostró ser importante. Esto estaría asociado a una menor toxicidad del insecticida lo que podría justificar el sinergismo observado al inhibir este camino detoxificante. Cuando se estudia la degradación del 14C-Fenitrotión en presencia de inhibidores de GST la producción de metabolitos hidrosolubles cae a los valores controles (sin GSH o sin enzima). De los metabolitos hidrosolubles, el desmetil-fenitrotión sería el mayoritario. Esto concuerda con lo hallado en mamíferos donde la GST de conejo (comercial) produce una banda con igual Rf que la GST de vinchuca la cual disminuye en presencia de quercetina (inhibidor de GST). En el estudio de la degradación del 14C-Paratión no se observó diferencias con respecto a los controles en la producción de metabolitos hidrosolubles cuando se incubó con GST. Es sabido que las GST de mamíferos degradan con menor eficiencia los grupos CH3-CH2-O-P que los CH3-O-P lo que parece concordar con el caso de la GST de vinchuca. Tampoco se observó diferencias en la intensidad de las bandas encontradas en TLC. Probablemente en la degradación del l4C-Paratión participen otros sistemas enzimáticos (esterasas) que no utilizan al GSH como cofactor. La GST microsomal de vinchuca no demostró diferencias detectables en la metabolización de ninguno de los dos l4C-OP utilizados. Al igual que lo observado en el metabolismo in vitro, el metabolito principal del 14C-Fenitrotión producido por las GST in vivo resultó ser el desmetil-fenitrotión. En efecto, cuando se coadministró quercetina la intensidad de la banda obtenida sobre la placa de TLC disminuyó. Con menor Rf que el desmetil-fenitrotión aparece otro metabolito que podría deberse a la acción de la GST. Los restantes metabolitos, de Rf aún menores, se deberían a la acción de las MFO según la evidencias obtenidas usando BP. Finalmente la evidencia experimental obtenida revela que las vinchucas resultan más susceptibles a la intoxicación por fenitrotión cuando se les inhibe la GST. El uso de inhibidores como la quercetina provoca una menor detoxificación del fosforado y una mayor inhibición de la Ache cerebral.

La ATPasa mitocondrial (F1Fo ATPasa/sintasa o H+-ATPasa mitocondrial) cataliza de manera reversible la síntesis de ATP acoplada a la translocación de protones a través de la membrana interna mitocondrial. Está constituida por un oligómero proteico hidrofóbico (Fo) firmemente integrado en la membrana interna mitocondrial y por un sector hidrosoluble (F1 o ATPasa soluble) que está unido a Fo. F1 está compuesta por cinco subunidades con la siguiente estequiometria: 33 y presenta seis sitios de unión para nucleótidos tres de ellos catalíticos y tres no catalíticos. La F1Fo-ATPasa unida a la membrana interna mitocondrial (SMP) es capaz de catalizar la síntesis y la hidrólisis de ATP, mientras que el sector hidrosoluble (F1), sólo es capaz de catalizar la hidrólisis de ATP. Un método sensible, rápido y sencillo que permita determinar la concentración de ATP y ADP presentes en el NAD(P)H o NAD(P) es necesario en estudios cinéticos de enzimas que utilizan ATP o ADP, especialmente cuando la actividad de las mismas es medida empleando sistemas acoplados basados en monitorear la oxidación de NAD(P)H o la reducción de NAD(P). Se diseñó y optimizó un método cinético, espectrofotométrico, basado en un ciclo catalítico de sustrato (hexoquinasa + piruvato quinasa), acoplado a lactato deshidrogenasa (LDH) para monitorear la velocidad del ciclo. Ésta depende, en ciertas condiciones, de manera lineal con las concentraciones de ADP y ATP. Se determinaron las concentraciones óptimas de glucosa (1 mM), PEP (2 mM) y MgCl2 (2 mM). Asimismo se determinó la cantidad de LDH necesaria para minimizar el tiempo de latencia (). La sensibilidad del método depende con la concentración de enzimas del ciclo. Cuando se utilizaron 20 UI/mL de ambas quinasas se determinó que la sensibilidad era igual a 0,611 ± 0,005 Abs min-1 nmol-1 de AT(D)P. El límite de detección fue igual 9,3 pmol y la reproducibilidad fue igual 5,6 %. El método permitió estimar que una preparación comercial de NADH contenía 0,85 ± 0,01 pmoles AD(T)P/nmol NADH. Asimismo fue posible estimar que existen trazas de ATP y ADP en otros componentes del medio de reacción, las que pueden ser eliminadas por pre-tratamiento del medio de reacción con apirasa. La H+-ATPasa es una enzima de comportamiento cinético complejo que, aun cuando se utiliza un sistema acoplado PK + LDH que mantiene constante la [ATP] y muy baja y constante la [ADP], muestra cinéticas de reacción bifásicas con el tiempo, comportamiento que es modificado por sulfito. Bajas concentraciones de sulfito linealizan el curso temporal de la reacción a bajas [ATP]. La unión del anión a un sitio no catalítico acelera la velocidad de disociación de ADP del complejo MgADP●F1 inactivo. En cambio a altas concentraciones de ATP sulfito induce una inhibición progresiva de la reacción de hidrólisis uniéndose a un sitio catalítico aumentando la velocidad de formación del complejo inactivo MgADP●F1. Es conocido desde hace más de 50 años que la actividad de la ATPasa mitocondrial es influenciada por la presencia de aniones. En el Área Biofísica de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas se han estudiado en detalle el efecto de bicarbonato y sulfato sobre las reacciones de hidrólisis y síntesis de ATP catalizadas por la ATPasa mitocondrial. Se realizaron estudios cinéticos del efecto de sulfito sobre la hidrólisis de ATP catalizada por SMP y F1 utilizando un amplio rango de concentraciones del anión y de ATP, los que permiten concluir que sulfito presenta un efecto dual: a concentraciones bajas se comporta como un activador no esencial y a concentraciones mayores como un inhibidor completo. La hidrólisis de ATP catalizada por el complejo de la ATPasa unido a membranas (SMP), fue aumentada por sulfito a concentraciones menores a 0,15 mM, mientras que concentraciones mayores la inhibieron. De manera similar a lo planteado para F1, estos resultados permiten postular que sulfito se une a dos sitios diferentes en la ATPasa mitocondrial. La unión a un sitio con alta afinidad (𝐾�����𝑑����� ≈ 10-3 M) activa la hidrólisis de ATP incrementando Vmáx y disminuyendo Km(ATP), mientras que la unión a un sitio con menor afinidad ( 𝐾�����𝑑����� ≈ 10-2 M) inhibe la hidrólisis de ATP disminuyendo Vmáx y Km(ATP) (inhibidor mixto lineal). Estudios empleando mezclas de sulfito y bicarbonato y sulfito y sulfato permiten sugerir que sulfito se une con alta afinidad a un sitio no catalítico (al igual que bicarbonato) y con baja afinidad a un sitio catalítico (al igual que sulfato). Sulfito 30 mM inhibe la síntesis de ATP acoplada a la oxidación de NADH por SMP. A dicha concentración el anión no afecta el transporte de electrones de NADH a oxígeno ni el grado de acoplamiento entre la cadena respiratoria y la ATP sintasa. De manera similar a lo observado al estudiar el efecto de sulfito sobre la actividad ATPásica, se observó un efecto dual de sulfito sobre la síntesis de ATP, estimulándola a bajas concentraciones e inhibiéndola a altas. Sulfito se comportó como un activador no esencial a [sulfito] < 2 mM, mientras que a mayores concentraciones el anión actuó como un inhibidor (mixto lineal respecto de ADP y de Pi) de la síntesis de ATP. Estudios utilizando mezclas de aniones permitieron concluir que sulfito (a bajas concentraciones) se comporta como ligando mutuamente excluyente de bicarbonato respecto de sus efectos sobre la síntesis de ATP. Por otra parte sulfito (a altas concentraciones) es un ligando mutuamente excluyente con sulfato. Fueron derivadas las ecuaciones correspondientes a las leyes cinéticas que caracterizan: la dependencia de la velocidad de hidrólisis de ATP con las [ATP] y de [sulfito] y la dependencia de la velocidad de síntesis de ATP con las [ADP], [Pi] y [sulfito], para un modelo de reacción consistente en la unión no mutuamente excluyente de sulfito a un sitio no catalítico (actuando como activador no esencial) y a un sitio catalítico (actuando como inhibidor mixto lineal). Las ecuaciones derivadas se corresponden con los comportamientos experimentalmente observados para el efecto de sulfito sobre la hidrólisis y síntesis de ATP.

El transporte del agua en las plantas es impulsado por diferencias de energía libre entre el suelo y la atmósfera, y está regulado por mecanismos biológicos evitadores, como el cierre estomático. La hidratación y la turgencia foliares resultan del equilibrio entre ΨL del apoplasto, el potencial osmótico del simplasto y la elasticidad de los tejidos. Sobre esta base se conjeturó que las interacciones de los mecanismos evitadores del estrés hídrico de la planta tienen un rol clave en la definición de su resistencia a déficit hídrico. Para probar esta hipótesis se construyó un modelo mecanístico basado en las leyes del flujo de savia de Van de Honert, de difusión de Fick, de elasticidad de Hooke, la ecuación de Gardner para el flujo del agua en la rizósfera y el modelo de conductancia estomática (gs) de Buckley. Mediante el modelo se demostró teóricamente que la hidratación y la turgencia foliares dependen de la oferta de agua edáfica (representada por el potencial hídrico del suelo) y de la demanda evaporativa de la atmósfera (representada por la radiación absorbida, la temperatura del aire, la velocidad del viento y el déficit de presión de vapor de la atmósfera). También que los mecanismos evitadores del estrés hídrico -i.e., conductancia hidráulica de la planta, conductancia estomática, elasticidad del tejido y potencial osmótico a turgencia máxima- son todos necesarios para determinar la hidratación y la turgencia foliares. El modelo también demostró que la conductancia hidráulica suelo-hoja (kL) depende de la fracción de agua edáfica transpirable (FTSW) con un patrón de decaimiento sigmoide, a medida que el suelo se seca. Esto implica que las variables que dependen en parte de kL (i.e., gs, transpiración, fotosíntesis y superficie foliar) también dependen de FTSW con el mismo patrón. El modelo se probó experimentalmente a distintos niveles de humedad edáfica (desde déficit hídrico nulo, hasta severo) en cinco variedades de vid y mostró un poder predictivo superior al 90%. En todas las variedades las gs se asociaron linealmente con las kL observadas, al considerar todas las situaciones de déficit hídrico en conjunto, si bien la pendiente de estas relaciones fueron distintas en cada variedad. La contrastación experimental mostró que, en una escala de tiempo de varios meses, las variedades más evitadoras -i.e., Grenache y Cereza- mantuvieron mayor kL, ajuste osmótico y rigidez de los tejidos y una menor pendiente de la relación de gs vs. kL, que las variedades menos evitadoras -i.e., Malbec y Syrah-. La menor pendiente de la relación entre gs y kL, en las variedades más evitadoras, estuvo asociada a una mayor cantidad de estomas, en relación con la cantidad de células epidérmicas. Los variedades más evitadoras bajo déficit hídrico moderado -i.e., con una fracción de agua edáfica transpirable entre 0,6 y 0,4- tuvieron mayor superficie foliar y produjeron más biomasa, favoreciendo raíces profundas y densas, y ahorrando agua. Chardonnay mantuvo una alta hidratación y turgencia a expensas de un alto gasto de agua debido a que privilegiaba una alta kL por sobre el ajuste estomático, por lo que no podría considerarse en forma estricta como muy evitadora.

El transporte del agua en las plantas es impulsado por diferencias de energía libre entre el suelo y la atmósfera, y está regulado por mecanismos biológicos evitadores, como el cierre estomático. La hidratación y la turgencia foliares resultan del equilibrio entre ΨL del apoplasto, el potencial osmótico del simplasto y la elasticidad de los tejidos. Sobre esta base se conjeturó que las interacciones de los mecanismos evitadores del estrés hídrico de la planta tienen un rol clave en la definición de su resistencia a déficit hídrico. Para probar esta hipótesis se construyó un modelo mecanístico basado en las leyes del flujo de savia de Van de Honert, de difusión de Fick, de elasticidad de Hooke, la ecuación de Gardner para el flujo del agua en la rizósfera y el modelo de conductancia estomática (gs) de Buckley. Mediante el modelo se demostró teóricamente que la hidratación y la turgencia foliares dependen de la oferta de agua edáfica (representada por el potencial hídrico del suelo) y de la demanda evaporativa de la atmósfera (representada por la radiación absorbida, la temperatura del aire, la velocidad del viento y el déficit de presión de vapor de la atmósfera). También que los mecanismos evitadores del estrés hídrico -i.e., conductancia hidráulica de la planta, conductancia estomática, elasticidad del tejido y potencial osmótico a turgencia máxima- son todos necesarios para determinar la hidratación y la turgencia foliares. El modelo también demostró que la conductancia hidráulica suelo-hoja (kL) depende de la fracción de agua edáfica transpirable (FTSW) con un patrón de decaimiento sigmoide, a medida que el suelo se seca. Esto implica que las variables que dependen en parte de kL (i.e., gs, transpiración, fotosíntesis y superficie foliar) también dependen de FTSW con el mismo patrón. El modelo se probó experimentalmente a distintos niveles de humedad edáfica (desde déficit hídrico nulo, hasta severo) en cinco variedades de vid y mostró un poder predictivo superior al 90%. En todas las variedades las gs se asociaron linealmente con las kL observadas, al considerar todas las situaciones de déficit hídrico en conjunto, si bien la pendiente de estas relaciones fueron distintas en cada variedad. La contrastación experimental mostró que, en una escala de tiempo de varios meses, las variedades más evitadoras -i.e., Grenache y Cereza- mantuvieron mayor kL, ajuste osmótico y rigidez de los tejidos y una menor pendiente de la relación de gs vs. kL, que las variedades menos evitadoras -i.e., Malbec y Syrah-. La menor pendiente de la relación entre gs y kL, en las variedades más evitadoras, estuvo asociada a una mayor cantidad de estomas, en relación con la cantidad de células epidérmicas. Los variedades más evitadoras bajo déficit hídrico moderado -i.e., con una fracción de agua edáfica transpirable entre 0,6 y 0,4- tuvieron mayor superficie foliar y produjeron más biomasa, favoreciendo raíces profundas y densas, y ahorrando agua. Chardonnay mantuvo una alta hidratación y turgencia a expensas de un alto gasto de agua debido a que privilegiaba una alta kL por sobre el ajuste estomático, por lo que no podría considerarse en forma estricta como muy evitadora.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019

La catepsina-L (CTSL) es una proteasa lisosomal de expresión ubicua que presenta funciones diversas y específicas. Entre ellas, participa en la selección positiva de las células T CD4+ y en la homeostasis de las células T. Utilizando como modelo experimental ratones CTSLnkt/nkt, portadores de una deleción en el gen que codifica para la CTSL, estudiamos la influencia de la CTSL sobre la homeostasis de las células B. Observamos un incremento en el número de células B en los ganglios linfáticos (GL), el bazo y la sangre periférica (SP) de los ratones CTSLnkt/nkt. En el bazo, este incremento estuvo restringido a las células B transicionales T1 y T2 y a las células B de la zona marginal (ZM). No se detectaron alteraciones en los niveles de proliferación y apoptosis basales de las células B periféricas en los ratones CTSLnkt/nkt. La frecuencia y el número de células B en los distintos estadios de maduración de la médula ósea (MO) en los ratones CTSLnkt/nkt resultó normal. Sin embargo, experimentos in vitro e in vivo demostraron que la linfopoyesis B se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. Tanto los precursores de las células B como el microambiente de la MO de los ratones CTSLnkt/nkt contribuyen a dicho incremento. Además la emigración de células B de la MO hacia el bazo se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. El conjunto de estos resultados indica que la CTSL regula negativamente la producción y exportación de los linfocitos B por la MO y el número de células B periféricas.

El primer capítulo de esta tesis se diseñó con el objetivo de estudiar si la administración local de S1P en el ovario de ratas preñadas bloquea efectivamente la luteólisis inducida por prostaglandina F2 alfa (PGF2α). Se utilizaron ratas preñadas en el día 19 de la gestación a las cuales se les administró en forma local S1P o su vehículo y dos horas después una dosis luteolítica de PGF2α. Los animales se sacrificaron a las 0, 4 y 36 hs de la PGF2α. Se midió la actividad de las caspasas que contribuyen a los eventos iniciales (caspasa -2, -8 y -9) y finales (caspasa-3) de la apoptosis en grupos de CLs de cada animal. Se evaluó también la expresión de las formas fosforiladas de AKT y ERK y los niveles del factor de necrosis tumoral alfa (TNF- α) mediante la técnica de ELISA. Además se estudió la muerte celular por la técnica de ME y TUNEL y la funcionalidad luteal midiendo como parámetro la progesterona (P4) luteal. La actividad de la caspasas -2, -3 y -8 aumentó significativamente a las 4 horas de la inyección de PGF2α, no así la actividad de caspasa -9. Además aumentó el número de células apoptóticas. De forma contraria la expresión de pAKT y TNF-α y el contenido de P4 luteal disminuyó considerablemente. El tratamiento con S1P pudo prevenir el incremento en la actividad de las caspasas -2, -8 y -3 inducido por PGF2α, redujo el número de células apoptóticas, restauró la funcionalidad luteal y aumentó la expresión de pAKT, pERK y TNF-α. El tratamiento con PGF2α incrementó el número de células luteales con signos avanzados de apoptosis, (por ejemplo: fragmentación nuclear, condensación de la cromatina y la presencia de cuerpos apoptóticos) a las 36 horas de la PGF2α. En cambio S1P pudo suprimir estos efectos y además aumentó la densidad vascular en los CL. Estos resultados demuestran, por primera vez, que la administración in vivo de S1P es capaz de bloquear la acción luteolítica de la PGF2α en ratas preñadas. El segundo capítulo de esta tesis se diseñó con el objetivo de estudiar la expresión y la localización celular de los receptores Notch1, Notch4 y el ligando Dll4 en CL de ratas durante la gestación y la luteólisis inducida por PGF2α. También estudiamos el contenido de P4 sérica y de proteínas luteales relacionadas a la apoptosis luego de la administración local de un inhibidor de esta vía llamado DAPT (N- [N-(3,5-difluorophenacetyl- L-alanyl)]-S-phenylglycine t-butyl ester). Se detectó marca específica de los receptores NOTCH1 y 4 principalmente en las células luteales grandes y pequeñas. Además la inmunomarcación fue evidente en los núcleos de las células luteales, de forma coincidente con el hecho de que el dominio intracelular de Notch (NICD) una vez activo se transloca al núcleo. Además, se detectó marca citoplasmática difusa para DLL4 en las células luteales grandes y pequeñas, coincidiendo con el hecho de que Dll4 se somete a la degradación proteolítica después de unión al receptor. La expresión del ARNm de Notch1, Notch4 y Dll4 en CL aislados en el día 19 de preñez se redujo significativamente después de la administración de PGF2α. En forma coincidente, la PGF2α disminuyó el fragmento activo de los receptores NOTCH1 y 4, por el contrario, no se detectaron cambios significativos en los niveles proteicos del ligando DLL4. La administración intraovárica de DAPT disminuyó los niveles séricos de P4, aumentó los niveles del fragmento activo de la caspasa-3 y la relación BAX: BCL2 24 horas después del tratamiento. También se demostró que la inhibición in vitro de la síntesis de P4 en CL de ratas preñadas con aminoglutetimida (inhibidor específico de la enzima P450scc) disminuyó el contenido proteico de NOTCH1, pAKT, y pERK. Sin embargo no se observaron diferencias significativas en los niveles proteicos de NOTCH4 y el factor de transcripción HES1. Estos resultados respaldan el rol luteotrópico de la vía de señalización de Notch para promover la viabilidad celular y la esteroidogénesis luteal, y sugieren que la hormona luteolítica PGF2α puede actuar, en parte, disminuyendo la expresión de algunos miembros del sistema Notch.