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La definición de la calidad de la carne depende en gran medida de percepciones subjetivas del consumidor. No obstante, el primer atributo que el consumidor detecta es el color y por la decoloración un 15% de la carne vacuna pierde valor. Factores genéticos, ambientales, de transporte y de procesamiento, influyen en los atributos de la carne, sin embargo, en bovinos específicamente, los efectos genéticos han sido poco estudiados. A nivel molecular la carne debe su tonalidad rojiza principalmente a la mioglobina y sus derivados. Post-mortem, el músculo experimenta una serie de procesos que lo convierten en carne. Los factores más influyentes en la decoloración de la carne son la concentración residual de O2, la formación de radicales y el estado redox de la célula. En particular el glutatión ha demostrado tener un efecto sobre la oximioglobina, y las tranferasas sirven como sensores del estado redox de la célula, entre ellas la Glutation S-transferasa P1 (GSTP1) tiene función de detoxificación celular y de resistencia al estrés oxidativo. De este modo, se decidió la búsqueda de polimorfismos en los genes de la mioglobina y la GSTP1. Luego se realizó la evaluación de la asociación de los polimorfismos encontrados y otros marcadores ligados a estos genes, con diferentes parámetros colorimétricos, a partir de muestras obtenidas en frigorífico y evaluadas para color. La búsqueda de polimorfismos sobre 53 animales de 12 razas, permitió encontrar cuatro mutaciones respecto de las secuencias publicadas de los dos genes estudiados. En la mioglobina se encontró una transición sinónima A por G, y en el GSTP1, 3 transiciones C por T en la zona intrónica. La asociación se realizó sobre 50 muestras con datos de pH y mediciones de parámetros colorimétricos CIELAB (L*, a* y b*). El estudio exploratorio con microsatélites cercanos a la mioglobina (ETH10, IGF1 y RM029) no detectó ninguna asociación con los parámetros medidos o los parámetros calculados (Hue y Croma). Por su parte, los estudios con los SNPs del gen GSTP1, demostraron una posible asociación de uno de ellos con los parámetros a* y Croma.

Se analizaron citogeneticamente poblaciones naturales de Dichroplus elongatus, Amblytropidia australis y Sinipta dalmani (Orthoptera:Acrididae) haciendo especial referencia al estudio de la influencia de los reordenamientos cromosomicos sobre la frecuencia y distribucion de quiasmas, fertilidad y en el caso de la última especie mencionada sobre caracteres exomorfologicos. Estas especies presentan un cariotipo basico de 23 cromosomas con centromero terminal o subterminal y un sistema de determinación del sexo XO machos / XX hembras. En Dichroplus elongatus y Amblytrapidia australis se detectó la existencia de polimorfismos para heterocromatina supernumeraria. Las poblaciones de Raco (Pcia de Tucuman) de Dichroplus elongatus y del Parque Nacional "El Palmar" (Pcia de Entre Rios) de Amblytropidia Australis resultaron ser polimorficas para cromosomas B o supernumerarios mitótica y meioticamente inestables. La poblacion del noroeste de la localidad de San Clemente del Tuyú (Pcia de Buenos Aires) de Dichroplus elongatus presento un segmento supernumerario en el par S10 en heterocigosis. Los cromosomas B, en ambas especies, afectarian la frecuencia de quiasmas intersticiales en forma lineal conduciendo a un incremento en la mencionada variable conforme aumenta el número de supernumerarios por celula. Este aumento se produciría a expensas de los quiasmas terminales ya que no se altera la frecuencia de quiasmas totales. Ademas estos cromosomas B estarian asociados con la producción de esperma anormal. En Amblytropidia australis se evidencia un incremento en la producción de macroespermatidas 2x y menos frecuentemente 4X, sugiriendo que su formación estaria relacionada con el bloqueo de la citocinesis en la pnimera o segunda division meiótica pero raramente en las dos simultaneamente. En este trabajo no se analizó la influencia de los B de Dichroplus elongatus de Raco sobre la fertilidad. Sin embargo, los supernumerarios detectados en Tafi Viejo, similares en morfología y comportamiento meiótico a los aquí estudiados estarían asociados con la producción de esperma anormal a traves de dos mecanismos diferentes simultáneos. Tales resultados harian suponer que los B de D.elongatus aquí estudiados también estarian involucrados en la producción anormal de esperma. Así, en contraposición con la acumulación, los B de las especies estudiadas pueden tener comprometidala fertilidad del portador al menos si el esperma del portador debe competir con el de individuos normales. El mantenimiento de los B en las poblaciones podria estar relacionado con la inestabilidad mitótica como mecanismo de acumulación y/o a sus efectos adaptativos entre los que puede contarse su influencia sobre la recombinación genética. En el caso particular de los B de Tucuman se discute la posibilidad que constituyan un polimorfismo estable. De ser así, los efectos de los B sobre la fertilidad deben estar contrabalanceados por algún mecanismo de acumulación y/o alguna ventaja selectiva. El segmento supernumerario detectado presenta un notorio efecto intracromsómico sobre la distribución de los quiasmas sin afectar la frecuencia de quiasma totales o intersticiales al considerar todo el complemento cromosómico. Por otro lado se han detectado en la misma especies otros polimorfismos con efectos intra e intercromosómicos sugiriendo que su presencia en las poblaciones puede ser de importancia en la adaptación de las mismas, permitiendo la producción de nuevas combinaciones génicas. En Sinipta dalmani, se han analizado 6 poblaciones, cuatro de las cuales pertenecen al Parque Nacional "El Palmar" (Pcia. Entre Rios) y son polimórficas para dos inversiones pericentricas en los pares M4 y M7y una fusión céntrica que involucra al cromosoma sexual. Ademas en una de las poblaciones del Parque se detectó una fusión espontánea entre dos autosomas. Las dos poblaciones restantes (Gualeguaychú, Pcia de Entre Rios y Puerto Talavera, Pcia de Buenos Aires) presentaron el cariotipo básico de la especie. Las inversiones pericéntricas estan asociadas con efectos intracromosómicos ya que evitan la formación de entrecruzamiento dentro de los limites del rearreglo incrementando la frecuencia de quiasmas en posiciones distales al mismo. La inversión M4, ademas, afecta la distribución de quiasmas intercromosómicamente en los pares medianos y/o pequeños conduciendo a una reducción significativa de la frecuencia de quiasmas intersticiales. Deesta forma, ambas reestructuraciones afectarian el nivel de recombinacibn que sin duda afectaria la variabilidad genética liberada en la siguiente generación. La inversión M4, ademas, esta asociada con un incremento en los valores fenotipicos de 5 caracteres exomorfológicos en heterocigosis, evidenciando un claro efecto de superdominancia. Se postula que el mantenimiento de las inversiones, al menos la M4 que mantuvo estabilidad a lo largo de cuatro años de muestreo, seria el establecimiento de desequlibrio de ligamiento y formación de supergenes con valor adaptativo. La fusión polimórfica que involucra al quinto par del complemento y al cromosoma X produce una redistribución de quiasmas en el bivalente heteromórfico que limitarla el entrecruzamiento protegiendo complejos génicos aislados. Ademas, esta fusión estaria relacionada con la producción de esperma anormal. Si tal influencia afectará algún componente de la eficacia biológica, sin duda representaría un mecanismo que limitaria la frecuencia del rearreglo. Este mecanismo junto con el efecto que produce la fusión sobre la recombinación, el cual podria tener significado adaptativo, estaria relacionado con el mantenimineto del mismo en relativamente baja frecuencia. En contraposición, la fusión espontánea esta asociada con un comportamiento meiótico irregular presentando un alto porcentaje de trivalentes con orientación lineal. La misma no afecta la frecuencia y distribución de quiasmas. Estos resultados sugerian que tal mutación raramente pueda persistir en la población. Asi, las poblaciones de S.dalmani del Parque Nacional "El Palmar" pertenecerían a un ambiente particular que permitiría tolerar la reducción de la recombinación genetica y en algunos casos de la variación fenotipica manteniendo los polimorfismos estructurales.

Introducción: El cáncer bucal forma parte de un importante grupo de patologías denominadas Enfermedades Crónicas no Trasmisibles y se caracteriza por que su prevalencia e incidencia cambia de acuerdo al área geográfica, ambas asociadas a factores genéticos, a hábitos y costumbres propios de cada región o cultura. En países en vías de desarrollo como la Argentina, se enfrentan grandes desafíos por responder al aumento en la tasa de mortalidad y morbilidad de los últimos años y en el tratamiento y cuidados posteriores de pacientes con cáncer en estadios avanzados, considerándose una de las principales causas de muerte. Sin embargo, no existen datos sobre la composición genética y las investigaciones sobre este tema podrían aportar conocimientos que mejoren las estrategias de prevención y reduzcan los costes de su tratamiento. El presente estudio investiga si los polimorfismos relacionados al metabolismo de los carcinógenos y a la proliferación celular, actúan como factores de riesgo para los desórdenes potencialmente malignos (DPM) y el cáncer bucal (CB). Objetivo: Investigar si los polimorfismos en el gen CYP1A1 y GSTM1 asociados al metabolismo de los xenobióticos y el gen TP53, asociado a la proliferación celular, actúan como factores de riesgo favoreciendo el desarrollo de DPM y CB; y a la vez determinar si el hábito del tabaquismo y el consumo de alcohol en presencia de estos mismos polimorfismos aumentan la probabilidad de estas patologías. Material y métodos: Se estudiaron pacientes de ambos sexos, mayores de 18 años (n=140) con diagnóstico de CB, DPM y un grupo control constituido por pacientes que asistieron por demanda espontánea a la Cátedra de Estomatología “A” de la Facultad de Odontología de la UNC en el período 2016-2019. Se realizó aislamiento de ADN a partir citologías exfoliativas de mucosa clínicamente sana. Con una de las muestras se realizó un extendido citológico y se lo tiñó con coloración de PAP, para corroborar que la mucosa estuviera sana, la otra muestra se guardó en tubos Eppendorff estériles, en freezer a -20ºC hasta su utilización para extracción de ADN y posterior aplicación de técnica de PCR convencional para los polimorfismos de los genes TP53 y GSTM1 y por RFLP-PCR utilizando enzima de restricción Msl para los polimorfismos de CYP1A1, utilizando los primeros correspondientes. Análisis estadísticos: Los datos categóricos se describieron por frecuencias absolutas y relativas. Se realizó prueba de Fisher, Análisis de Correspondencia Múltiple y Regresión logística. Resultados: En el presente estudio se observó un porcentaje significativamente mayor de hombres (65.9%) en pacientes diagnosticados con CB (p = 0.026); las mujeres fueron mayoría no significativa en pacientes diagnosticados con DPM (62.3%). La lengua fue el área anatómica de más frecuente de aparición de CB y la mucosa yugal fue el lugar más frecuente de DPM. En la población de estudio, en relación al polimorfismo del gen TP53 encontramos altas frecuencias del alelo G, coincidiendo con estudios anteriores realizados en poblaciones caucásicas y con estudios de Argentina en Córdoba (propio) y en Buenos Aires y otras regiones del país. El alelo C (variante mutada) está relacionado con CB y DPM principalmente por el aumento del genotipo heterocigota. Para el polimorfismo CYP1A1 no se encontró asociación significativa con el CB pero sí con los DPM. Para GSTM1 null se encontró una asociación estadísticamente significativa para el grupo con CB, y en el grupo de los DPM no se encontró asociación pero si un aumento en su frecuencia en relación al grupo control, donde se observó mayor frecuencia para el genotipo no null. Se encontró un patrón de asociación entre el CB y el alelo T (wild type) de CYP1A1. Los DPM se relacionan con el alelo C de CYP1A1, con el alelo null del gen GSTM1 (variante mutada), con los hábitos de fumar y consumo de alcohol la presencia del alelo C (variante mutada) del TP53, mientras que el grupo control mostró un patrón de relación con el alelo G de TP53. La presencia de las variantes polimórficas de los polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) estudiados y el hábito de fumar fueron los dos factores asociados con el desarrollo de DPM. Conclusiones: Nuestros resultados coinciden con los estudios realizados en poblaciones caucásicas; se sabe que existe una relación de SNP con la distribución geográfica. Estos estudios tienen beneficios potenciales al permitir la identificación de biomarcadores predictivos y grupos con mayor riesgo de CB y DPM para la implementación de una variedad de estrategias de atención médica. Sin embargo aún es necesario realizar estudios adicionales que incluyan un mayor número de pacientes y en diferentes regiones de Argentina.

Dado un espacio de Banach E estudiamos tres aspectos de la relación entre el espacio de polinomios definidos sobre E y el espacio dual E’. Definimos la clase de polinomios K-acotados PK(nE; X) (polinomios cuya continuidad está dada por subconjuntos de E´) y mostramos que la extensión de Aron-Berner preserva esta clase. Investigamos propiedades sobre K que relacionan el espacio PK(nE; X) con subespacios usuales de P(nE; X) probando a valores escalares que polinomios K-acotados son aproximables para K conjuntos compactos donde la identidad puede aproximarse uniformemente por operadores de rango finito. Lo mismo es cierto cuando K está contenido en la cápsula convexa equilibrada de una sucesión básica débil-nula de E'. En este caso también probamos que todo polinomio K-acotado es extensible. Además, dimos enunciados equivalentes a la existencia de espacios de Banach sin la propiedad de aproximación. Dado un morfismo entre duales s : E’ —>F’, damos un morfismo 3 que vincula los espacios de polinomios P(nE; X) y P(nF; X"). Mostramos bajo condicionesde regularidad que si E' es isomorfoa F’ entonces los espacios de polinomios homogéneos sobre E y F a valores en X, son isomorfos. Además probamos que los subespacios de polinomios, cuya definición está relacionada en forma más directa al dual (débil-continuos, integrales, regulares), resultan isomorfos sin hipótesis adicionales sobre E, F o X. Finalmente estudiamos diferentes topologías débil-polinomiales centrándonos en la dada por una familia de seminormas asociadas al conjunto de polinomios ortogonalmente aditivos sobre reticulados de Banach reales. Caracterizamos esta topología en espacios ℓp,Lp y sobre espacios de Banach con base incondicional.

Fil:Leite, Clarice Loguercio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La poliquistosis renal autosómica dominante (ADPKD) es una enfermedad genética hereditaria que afecta aproximadamente a 1 en 1000 individuos. Cada hijo de un progenitor afectado posee un 50% de probabilidad de heredar el gen defectuoso y de éstos, aproximadamente el 50% desarrolla insuficiencia renal crónica. La característica patológica de esta enfermedad es el desarrollo progresivo de múltiples quistes de contenido líquido en ambos riñones y presentándose con distinta frecuencia en hígado, páncreas y bazo. La manifestación clínica de los quistes aparece entre los 20 y 30 años, aunque existe una gran variabilidad entre la población afectada. Al menos tres genes son responsables del desarrollo de la enfermedad: PKD1 localizado en la región cromosómica 16p13.3, PKD2 en 4q21-23 y PKD3, aún no localizado. La PKD1 constituye aproximadamente el 85% de los casos; un 10% presenta la forma PKD2 y el 5% restante se asociaría a la forma denominada PKD3. Los objetivos de este trabajo fueron: 1. Desarrollar un diagnóstico precoz de la enfermedad que permita detectar enfermos y portadores asintomáticos para la forma PKD1, utilizando marcadores microsatélite ya descriptos como cercanos al locus responsable de la misma. 2. Buscar y analizar las mutaciones presentes en el gen PKD1 en las familias afectadas con esta forma. 3. Desarrollar un diagnóstico precoz de la enfermedad que permita detectar enfermos y portadores asintomáticos para la forma PKD2, utilizando marcadores microsatélite ya descriptos como cercanos al locus responsable de la misma. 4. Determinar en forma fina la ubicación del gen PKD2 por medio del análisis de eventos de recombinación entre los marcadores descriptos y la enfermedad en las familias analizadas en este estudio. 5. Detectar y analizar mutaciones en el gen PKD2. 6. Analizar otras formas de poliquistosis renal. 7. Aplicar las herramientas hasta aquí desarrolladas en otras patologías quísticas hereditarias.

Objetivo general: Aislar e identificar los microorganismos responsables de la producción de kefiran a partir de gránulos de kefir y evaluar su efecto prebiótico para su posible aplicación en alimentos funcionales. Para cumplir con el objetivo general se plantearon los siguientes objetivos específicos: Objetivos Específicos: A. Aislar Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens de los gránulos de kefir de la colección CIDCA. B. Seleccionar lactobacilos aislados de kefir capaces de producir exopolisacáridos, caracterizar parcialmente los mismos y compararlos con el kefiran obtenido de gránulo. C. Estudiar in vivo el efecto del kefiran y/o de EPS de microorganismos aislados de kefir sobre la microbiota intestinal para su potencial aplicación como prebiótico.

Los estudios estructurales sobre polisacáridos de hongos que abundan en nuestro país se iniciaron en nuestro la boratorio con Cyttaria harioti Fischer. Esta es una de las especies más abundantes perteneciente, dentro de los Ascomycetes, a la familia Cyttariaceae. Constituye una plaga para nuestros bosques patagónicos, donde parasita Nothofagus (coihue, lenga), en los cuales produce tumores característicos. En esta tesis se continuaron los estudios químicos sobre esta especie. Se aisló y determinó 1a composición de la pared celular de Cyttaria harioti Fischer, que resultó constituida fundamentalmente por glucanos-β. Cabe destacar que no se detectó la presencia de quitina, componente habitual de las paredes celulares de los Ascomycetes. Se aislaron hidratos de carbono complejos, componentes minoritarios del hongo, determinándose su composición. Se caracterizó C18-dihidroesfingosina (esfinganina) en glicoesfingolípidos aislados por extracción con fenol acuoso. Esta misma base nitrogenada junto con C16-dihídroesfingosina se determinaron en una poliglicosilceramida (In2) purificada a partir del mismo extracto. Por otra parte, se realizaron estudios estructurales sobre la cadena glicosídica de un glicopéptido (In1) con alto contenido en hidratos de carbono. Los resultados obtenidos sugieren la existencia, en la región de unión de la cadena glicosídica a la peptídica, del pentasacárido característico de las N-glicosilproteínas.

Este trabajo de Tesis versa sobre cuatro aspectos principales: l- Estudio de los polisacáridos del alga roja Nolhogenia jásligiala (Galaxauraceae, Nemaliales) y evaluación de su actividad antiviral. Comprende un sistema de D-mananos con uniones α-(l—>3), sulfatados en las posiciones 2 y 6, y con ramificaciones simples de D-xilosa enlazada β-(l—>2).Los xilomananos contenían mayoritariamente cationes de calcio y magnesio, que estaban involucrados en la formación de complejos entre los polisacáridos del sistema mediante interacciones cooperativas carbohidrato-carbohidrato dependientes de calcio. La fracción F6' fue la más activa frente a varias cepas de HSV tipos 1 y 2, dos de ellas resistentes a aciclovir. Por otra parte, no presentó actividad anticoagulante, lo cual constituye una ventaja para su aplicación potencial como agente antiviral en formulaciones de aplicación local. 2- Aplicación de espectrometría de masa UV-MALDI-TOF, para determinar los pesos moleculares y sus funciones de distribución, sobre xilomananos sulfatados y xilanos neutros de N.fastigiala. 3- Análisis estructural de los polisacáridos de Georgiella confluens (Ceramiaceae, Ceramiales). Los resultados indicaron la presencia de una cadena central de agarano altamente metilado con un esquema de sustitución inusual en galactanos de algas rojas: sulfatación en C-3 de unidades de α-L-galactosa y ramificaciones simples de xilosa en la posición 4 de β-D-galactosa. 4- Desarrollo de un método de desulfatación para polisacáridos sulfatados empleando clorotrimetilsilano. Permitió completar el análisis estructural de los xilogalactanos de G. confluens. También se encontraron las mejores condiciones para la desulfatación de carragenano kappa comercial, a fin de probar su eficacia en un polisacárido con máximo contenido de unidades de 3,6-anhidrogalactosa. El estudio por experimentos RMN mono- y bidimensionales de carragenano beta -obtenido por desulfatación de carragenano kappa permitió la asignación completa de su espectro protónico.

La presente Tesis comprende cuatro temas principales: Estudio del sistema de polisacáridos del alga roja Nemalion helminthoides, familia Liagoraceae, orden Nemaliales. Se determinó que la matriz de la pared celular estaba compuesta: (i) mayoritariamente por α-D-(1→3)-mananos con unidades monosulfatadas en C-4 ó C-6, con un promedio de un grupo sulfato cada cuatro residuos, y un grado de polimerización de ~200; (ii) en menor proporción por α-D-(1→3)-mananos con ramificaciones simples de β-D-xilosa en C-2, de similar grado de sulfatación también en C-4 ó C-6, y peso molecular promedio de ~10 kDa; (iii) por xilanos neutros β-D- (1→3;1→4), de ~6 kDa. Por último, de pared fibrilar se aislaron (1→4)-β-D-xilanos neutros. Modificaciones químicas de las fracciones de mananos y xilomananos de Nemalion helminthoides. (i) A partir de los mananos nativos se generaron polisacáridos modificados con 43-50% de sulfatación, constituidos mayormente por unidades disulfatadas en C-2 y C-6 y de unidades trisulfatadas. (ii) A partir de las fracciones de xilomananos se obtuvieron, por degradación de Smith, derivados sin ramificaciones de xilosa. Estudio de actividad antiviral de fracciones nativas y modificadas de Nemalion helminthoides. Los xilomananos inhibieron in vitro al virus herpes simplex (HSV-1 y HSV-2) y al virus dengue (DENV-2) agregados durante la adsorción viral. Los mananos sobresulfatados inhibieron DENV-2 agregados durante la adsorción viral, y HSV-1 y HSV-2 colocados durante y/o después de la adsorción viral in vitro. Utilizando un modelo de infección intranasal de ratones BALB/c con HSV-2, los mananos sobresulfatados protegieron de la enfermedad en un 100% con una única dosis, por la misma vía. Evaluación de acción inmunomoduladora de polisacáridos de Nemalion helminthoides. Fracciones de xilomananos indujeron proliferación de linfocitos T humanos (línea H9) y macrófagos murinos (línea RAW). En macrófagos, además, estimularon la secreción de citoquinas proinflamatorias IL-6 y TNF-α y de óxido nítrico. La respuesta de citoquinas también se detectó en plasma de ratones BALB/c inyectados por vía intravenosa. Los animales tratados con xilomananos no desarrollaron la enfermedad al ser infectados, una hora después, con HSV-2.