Catálogo de publicaciones

Fil:Stein, Paula. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Ladenheim, Ruth Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Rembado, Alfredo Amilcar. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La toxina Shiga 2 (Stx2) producida por Escherichia coli enterohemorrágica es la principal causa de diarrea asociada a síndrome urémico hemolítico e insuficiencia renal. El 30 % de la población infantil que sufre SUH padece alteraciones en el sistema nervioso central (SNC). Nos propusimos determinar la expresión del receptor Gb3, el cual produce la entrada de la toxina en las células que lo poseen, en condiciones normales y luego de la administración intracerebroventricular de Stx2 en cerebros de roedores. Observamos que el receptor Gb3 se expresa en neuronas y aumenta con la administración local de Stx2. La interacción Gb3-Stx2 en neuronas podría contribuir al daño producido por las encefalopatías derivadas del SUH en niños intoxicados por ingestión de productos contaminados por E. coli enterohemorrágica. También caracterizamos el efecto de dosis subletales de Stx2 (dsStx2) administrada vía intravenosa por ultraestructura que se correlacionó con tests de comportamiento por primera vez. Este modelo translacional nos fue útil para determinar que dosis subletales de la toxina son capaces de generar un daño cronológico significativo de eventos en cerebros de ratones, que podría explicar las lesiones neurológicas que remiten o resultan ser permanentes en pacientes intoxicados. Un significativo edema perivascular se observó luego de 2 días de la administración sistémica de Stx2, daño en astrocitos a los 4 días, y en neuronas y oligodendrocitos luego de 8 días. También fue importante encontrar extravasación de mastocitos y sinapsis interrumpidas. Finalmente el tratamiento de la Dexametasona, un antiinflamatorio, el Lactobacillus Plantarum, y/o anticuerpos anti-Stx2 logran neutralizar la acción de Stx2. Estos estudios servirán como antecedentes para desentrañar a futuro los mecanismos celulares y moleculares involucrados en los procesos neuropatológicos durante la fase aguda de la intoxicación. En base a este conocimiento, agentes terapéuticos pueden ser utilizados para neutralizar la Stx2 a nivel central.

Fil:Chaud, Marcela Alicia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Castillo, Marta Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Pasquinelli, Eduardo Augusto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El trabajo realizado se puede resumir en tres puntos: a) Estudio del efecto de los lisados de bacterias sobre el poder infectante del fago y una mutante virulenta. Se trabajó con lisados de bacterias lisogénicas K12 (T)W 1895 y no lisogénicas K12 W 1485. Los lisados se obtuvieron sometiendo a las bacterias al efecto de una descompresión brusca. Luego se centrifugaron a 10.000 rpm. para eliminar restos de membranas y bacterias remanentes. Los ensayos de inhibición de los fagos, se efectuaron incubando el fago con el lisado a 37°C durante 30 minutos. La inhibición se determinó en base a la disminución del número de placas producidas por el fago en presencia del lisado, respecto de un control. Las bacterias utilizadas fueron las K12 W 1485 sensibles a ambos fagos. También se trabajó con lisados obtenidos a partir de protoplastos de esas mismas cepas. Los resultados indican que los lisados de las bacterias lisogénicas y no lisogénicas inhiben el fago T virulento pero no tienen acción sobre el fago temperado. Los lisados de los protoplastos, se comportan en igual forma. La inhibición del fago virulento nunca es inferior al 50%. Las variaciones obtenidas (95-50%) dependen de la concentración del poder inhibitorio de cada lisado utilizado. b) Estudio de las propiedades del lisado de bacterias lisogénicas. Resultados: 1) El lisado es estable a 0°C por lo menos durante 30 días, luego comienza a perder título. 2) A los 5 minutos de calentamiento a 56 °C, se destruye rápidamente parte de la actividad del lisado. El resto permanece inalterado por lo menos hasta 30 minutos de calentamiento. 3) El lisado se inactivo a 100 °C. 4) Se incubó lisado con DNasa y RNasa; el poder inhibitorio no se altera por efecto de estas enzimas. 5) Se inactiva incubando el lisado con 250 Ɣ de tripsina por ml. 6) El lisado dializa parcialmente a 4 °C. 7) El lisado precipita por el agregado de ácido tricloroacético al 5% en frío. El precipitado resuspendido en buffer pH 7.0 tiene más actividad que el lisado original. 8) El lisado se puede sedimentar por ultracentrifucación. 9) El caldo donde crecieron las bacterias, a partir de las que se obtuvo el lisado, no tiene actividad inhibitoria. c) Interacciones entre lisado y fago. 1) La temperatura óptima de contacto fago-lisado es de 37 °C. A 0°C también se produce la unión entre el fago y el lisado, pero en menor proporción. A 56 °C esta unión no tiene lugar. 2) La cinética de la inhibición del fago por el lisado a 37°C, indica que la reacción es de primer orden. La reacción procede rápidamente, hasta que a los 50 minutos se detiene. 3)Los experimentos realizados para determinar si el lisado se une al fago temperado, aunque no lo inhiban indican que el lisado no interacciona en ninguna forma con el fago. Hay que hacer notar que en presencia de lisado, el fago temperado produce un número mayor de placas, que cuando se plaquea sin el mismo. 4) El efecto del lisado se debe a una acción directa sobre la partícula del fago y no a una interacción con la superficie de las bacterias sensibles. Conclusiones: Se postula que los receptores bacterianos que pasan a solución al obtenerse el lisado, son los responsables de la inhibición del fago virulento. Como estos receptores no parecen actuar sobre el fago temperado, se deduce que este fago se une a receptores diferentes de los que se une el virulento.

Fil:Zappi, Enrique V.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.