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El virus dengue (DENV) es un grave problema para la salud pública por su reemergencia en las últimas décadas, ya que en la actualidad casi la mitad de la población mundial se encuentra en riesgo de infección. A pesar de la creciente incidencia de DENV en el mundo, y en América en particular, al presente no hay quimioterapia específica para el tratamiento de la enfermedad. Las etapas iniciales que conducen a la entrada del virus a la célula son una alternativa atractiva como estrategia antiviral para bloquear el comienzo de la infección. Sin embargo, se ha demostrado que la entrada de DENV es un proceso muy complejo que depende de distintos factores virales y celulares, que a su vez afectan la susceptibilidad antiviral frente a agentes que interfieren con la interacción inicial virus-célula. El presente trabajo de tesis se propuso estudiar la entrada del virus dengue 3 (DENV-3) a células de mamífero y sus posibles implicancias en la terapia antiviral, analizando la acción inhibitoria de carragenanos. Mediante la utilización de inhibidores farmacológicos y moleculares de las diferentes vías endocíticas celulares se demostró que la entrada infecciosa de DENV-3 cepa H87 a células Vero y A549 ocurre por una vía endocítica no clásica, independiente de clatrina, dependiente de pH ácido y dinamina, con una participación parcial de caveolas. Asimismo, se demostró por primera vez en estos sistemas celulares la coexistencia de vías infectivas y no infectivas para la entrada de DENV, situación que podría disminuir la eficiencia de la infección. El tráfico intracelular luego de la entrada de DENV-3 presentó características propias de los virus de penetración tardía hasta completar el proceso de fusión y desnudamiento viral. La evaluación de la dependencia con clatrina para la entrada de DENV-3 a otras líneas celulares humanas, tales como células HepG2, U937 y K562, mostró una respuesta variable según la línea celular. También los resultados fueron variables en la infección a células U937 en presencia o ausencia de anticuerpos contra DENV. Respecto de la actividad antiviral, los carragenanos λ e ι fueron potentes inhibidores de DENV-3, con valores de índice de selectividad (relación citotoxicidad / actividad antiviral) mayores a 1000, excepto en la infección mediada por anticuerpos. El blanco de ambos compuestos fue la entrada del virus a la célula, interfiriendo con la adsorción viral y la internalización de la nucleocápside a partir de los endosomas. La caracterización de la vía de entrada de DENV-3 y de la actividad antiviral de compuestos que bloquean eventos tempranos en la multiplicación del virus aporta conocimientos para dilucidar los mecanismos que regulan la infección viral así como optimizar el diseño y utilización de nuevas terapias antivirales que sean protectoras ante los cuatro serotipos de DENV, de modo de evitar la progresión a las formas severas y letales de la enfermedad.

En la actualidad casi la mitad de la población mundial se encuentra en riesgo de infección con dengue, resultando la enfermedad viral transmitida por artrópodos de mayor importancia en todo el mundo. A pesar de la creciente incidencia de este virus, al momento no existen vacunas o quimioterapia antiviral disponibles. Dado que el conocimiento del ciclo de multiplicación viral es indispensable como punto de partida para el diseño de agentes quimioterapéuticos, el presente trabajo de tesis se propuso estudiar los pasos iniciales de la infección con DENV: el mecanismo de entrada a la célula huésped. Nuestro estudio se centralizó en el análisis in vitro de los factores celulares involucrados en la internalización, transporte intravesicular y desnudamiento del virus y la influencia del tipo de célula (mamífero o insecto), cepa y serotipo viral sobre dichos procesos. Mediante el uso combinado de inhibidores químicos y moleculares, medidas de infectividad y técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia demostramos que la entrada del serotipo DENV-1 en células Vero ocurre por endocitosis dependiente de clatrina, mientras que la entrada del serotipo DENV-2 tiene lugar por un mecanismo no clásico independiente de clatrina, caveolas y lipid-rafts, pero dependiente de dinamina. Al extender nuestro estudio a otros sistemas celulares (C6/36 HT y A549) encontramos que la endocitosis de DENV-1 y DENV-2 ocurre por un mecanismo clásico dependiente de clatrina. Por lo tanto, estos resultados demuestran por primera vez que un mismo serotipo viral puede utilizar diferentes vías de entrada en líneas celulares de distinto origen, y que a su vez, distintos serotipos virales pueden utilizar vías de entrada alternativas en un mismo tipo celular. Asimismo, observamos que en todos los sistemas celulares analizados, la entrada de DENV ocurre con dependencia de la exposición de los viriones a pH ácido. Esto implica un tránsito de las partículas virales en compartimentos endosomales hasta el momento en que se dispara la fusión entre la membrana viral y la membrana de la vesícula transportadora. Encontramos que los viriones son primeramente transportados hacia endosomas tempranos para luego continuar hasta endosomas tardíos o endosomas de reciclaje dependiendo de características propias de cada cepa viral. Por lo tanto, los hallazgos presentados en este trabajo no sólo aportan conocimientos básicos sobre los pasos iniciales del ciclo de replicación de este importante patógeno humano, sino que además proveen una nueva perspectiva para encarar el desarrollo racional de agentes antivirales para esta enfermedad de creciente reemergencia global.

Los arroyos de montaña que reciben agua de deshielo (nieve o de glaciares) son particularmente vulnerables al cambio climático global y a los factores de estrés asociados, ya que están fuertemente aislados y fragmentados en el paisaje terrestre. A medida que los glaciares retroceden, nuevos paisajes y arroyos glaciares emergen. La evolución de estos cursos de agua y sus zonas ribereñas reflejan las interacciones entre el suministro de sedimentos, el régimen del caudal, y la vegetación. El paisaje norpatagónico muestra profundos cambios en la estructura de su paisaje a causa del cambio climático. La continua recesión de los glaciares y las numerosas alteraciones en la estructura del bosque (colonización post-retracción glaciaria, sequías, incendios) afectan a las condiciones físicas, biogeoquímicas y ecológicas en los ríos y arroyos de montaña, con implicancias para la composición de la comunidad acuática y la productividad del ecosistema. En la presente tesis se propuso analizar los distintos ambientes lumínicos que se producen como consecuencia de la retracción glaciaria (con mayor o menor ingreso de arcillas) y debidos a diferentes estructuras del bosque. Estas condiciones lumínicas generarían condiciones contrastantes en la relación luz: nutrientes que se trasladarán a la estequiometría de los productores y de toda la cadena trófica. Por lo tanto, el objetivo general fue analizar cómo el cambio climático afectará a la dinámica estequiométrica mediada por la relación luz: nutrientes en arroyos glaciares. Para ello, combinando trabajos de campo con experimentación in situ, se estudiaron las relaciones elementales C:N:P en productores y macroinvertebrados en ambientes lóticos norpatagónicos frente a diferentes condiciones de luz: nutrientes, afectados directamente por la concentración de arcillas glaciarias o indirectamente por cambios en la estructura del dosel. La Tesis fue organizada en seis capítulos. En el primer capítulo se presentan y se introducen los conceptos teóricos enfocándolos hacia la pregunta de esta Tesis; asimismo se presentan los objetivos generales-específicos, y las hipótesis. En el segundo capítulo se describe el contexto del ambiente glaciario del Monte Tronador y se caracteriza el área de estudio. En el tercero, se analiza el efecto de las arcillas glaciarias sobre la relación luz: nutrientes y cómo se afectan las funciones fotosintéticas y las relaciones elementales de los productores primarios de ambientes lóticos sin dosel arbóreo. En el cuarto se analiza el efecto de diferentes tipos de dosel arbóreo sobre la actividad fotosintética y la estequiometría de los productores primarios acuáticos de arroyos de montaña. En el quinto capítulo, se determina cómo se ve afectada la diversidad y composición elemental del ensamble de macroinvertebrados bentónicos frente a diferentes condiciones luz: nutrientes de su alimento (productores primarios del perifiton). Por último, en el sexto capítulo se incluyen las conclusiones finales de la Tesis. En dos arroyos glaciares de bajo orden y libres de dosel, localizados en el Monte Tronador (Patagonia, Argentina) se analizó cómo la carga de arcillas glaciares influye en la relación luz: nutrientes afectando a los parámetros fotosintéticos de las algas del perifiton y la relación carbono: fósforo (C:P) de los productores primarios. En estos arroyos se llevaron a cabo estudios a campo y además, se realizó un experimento de colonización in situ con tres tratamientos de luz diferentes. En cada muestreo y en el experimento, se estimaron parámetros lumínicos y químicos de los ambientes. La biomasa perifítica (tanto en valores de concentración de clorofila a como en contenido de carbono) en los arroyos y en el experimento se relacionó directamente con la turbidez (carga de arcilla en suspensión). Los parámetros fotosintéticos variaron de manera similar registrándose un aumento de la eficiencia en la transferencia de electrones (ETR) por centro reactivo en el arroyo más turbio y una reducción en el arroyo más claro. Como consecuencia de esta diferencia en la fijación de C, la relación C:P del perifiton varió directamente con la turbidez. Los resultados obtenidos sugieren que un aumento en el derretimiento de los glaciares, con un consecuente incremento de arcillas glaciares prevendría a los productores primarios de la fotoinhibición crónica a la que están expuestos los arroyos libres de dosel. Los arroyos andinos cubiertos por dosel (bosque de Nothofagus fundamentalmente) estarán influenciados por cambios que puedan ocurrir en la estructura del bosque como consecuencia del cambio climático. Por ello, se propone que los futuros cambios climáticos que alteren la composición y estructura del bosque afectarán a la producción primaria y la estequiometría del perifiton en arroyos de bajo orden a través de modificaciones en la estructura del dosel. Con la finalidad de poner a prueba esta hipótesis, se realizó un estudio en campo de cuatro arroyos de montaña con diferentes niveles de dosel. Asimismo se llevó a cabo un experimento a campo en el que se manipularon las condiciones de luz durante 4 meses. Por último, se vincularon los resultados obtenidos con los escenarios futuros de cambio climático (cerca de futuro: 2015-2039 y futuro lejano: 2075-2099) predichos por el Grupo Intergubernamental de expertos sobre el Cambio Climático (IPCC). Se observó que la biomasa, los parámetros fotosintéticos y el contenido elemental del perifiton exhibieron una relación en forma de campana con la disponibilidad de luz, que era, a su vez, dependiente de la cobertura del dosel. Por lo tanto, las condiciones de luz intermedias resultaron en un escenario óptimo para la fotosíntesis de los productores primarios del perifiton; sin embargo, estas zonas intermedias con dosel disminuirán de acuerdo con los modelos de cambio climático. Finalmente los datos obtenidos permiten predecir cambios en la estequiometría del arroyo debido a las variaciones en la fotosíntesis y la composición elemental del perifiton como resultado de las modificaciones en la estructura del bosque. Las modificaciones en las condiciones lumínicas a causa del ingreso de arcillas glaciarias conllevan cambios significativos en la calidad del perifiton como recurso alimentario (debido a la variación en la composición elemental) y esto afectará al ensamble de macroinvertebrados. Al mismo tiempo el ambiente glaciario resulta hostil para los macroinvertebrados bentónicos debido al alto contenido en sólidos en suspensión. Para realizar el estudio de la estequiometría de niveles tróficos diferentes, se realizaron muestreos en los arroyos glaciarios del Monte Tronador, en donde se colectaron durante 4 años y en diferentes períodos muestras de perifiton y de macroinvertebrados bentónicos. Asimismo se realizó un experimento a campo en el que se manipularon las condiciones de luz para observar los cambios estequiométricos en los pastoreadores resultantes de la condición elemental del recurso. El arroyo más claro tuvo mayor densidad y diversidad de macroinvertebrados que el arroyo más turbio. La diversidad de macroinvertebrados del arroyo más claro estuvo positivamente afectada por la temperatura del aire y negativamente por la precipitación. Asimismo las precipitaciones afectaron la abundancia del grupo funcional más abundante en el arroyo, los pastoreadores. Meridialaris chiloeensis y Notoperla magnaspina fueron los pastoreadores más abundantes, cuyas densidades fueron afectadas negativamente por las precipitaciones y positivamente por la abundancia de su recurso alimentario (algas). La calidad del recurso alimentario dependió de la disponibilidad lumínica y la consecuente relación luz:nutrientes tanto en el campo como en el experimento. La regulación homeostática de la composición elemental de los pastoreadores dependió indirectamente de las condiciones lumínicas, debido a que el nivel de desbalance obedeció a la fijación de carbono de los productores primarios y a las relaciones con los otros elementos (N y P). La conclusión final de esta Tesis señala que los cambios en las condiciones lumínicas en los arroyos norpatagónicos, producidos por las arcillas en suspensión o por la estructura del dosel, generan una serie de cambios en el mecanismo fotosintético de los productores primarios; y en la estequiometría y la composición comunitaria del perifiton. Asimismo, estos cambios implican diferentes calidades de alimento que influyen sobre niveles tróficos superiores como los consumidores primarios.

Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) es un insecto hematófago, vector del parásito Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas, considerada endémica de Argentina. En el sur de La Rioja, la persistente infestación por triatominos, fomentó que a partir del año 2008, se implementara un Programa de Erradicación de Ranchos y construcción de Viviendas Nuevas en la zona rural, con el objetivo de disminuir la infestación. Al analizar esta situación desde el contexto de la teoría de metapoblaciones, se considera que cada vivienda se comporta como un parche con distintos grados de calidad, en relación a la disponibilidad de refugios para T. infestans. De esta forma, las Viviendas Nuevas son consideradas de menor calidad comparadas con las Viviendas Rancho-Tradicionales. Los principales objetivos del presente trabajo fueron actualizar el estado de infestación en los Llanos riojanos, identificar los factores de riesgo asociados a la misma y evaluar la infestación en parches de diferente calidad y tamaño. El estudio se realizó analizando 397 viviendas con distintas Tipologías pertenecientes a los Departamentos Ángel Vicente Peñaloza, Rosario Vera Peñaloza y San Martín (Los Llanos, La Rioja) durante el período 2014-2017. Se realizaron muestreos pasivos y activos para estimar la infestación por T. infestans en los diferentes parches.Los principales resultados mostraron heterogeneidad espacial respecto a la infestación por T. infestans en el área de estudio, siendo Rosario Vera Peñaloza y San Martín los Departamentos con mayor infestación. El análisis de factores de riesgo a través de un enfoque de inferencia multimodelo, permitió ponderar las variables con mayor impacto en la probabilidad de infestación. Se observó que la Cantidad de Viviendas y su condición entomológica influyen de manera directa en la infestación de la Unidad Domiciliaria. Otras variables, como Cantidad de Estructuras Peridomésticas y Tipología de la Vivienda, no mostraron efecto cuantificable sobre la probabilidad de infestación. Durante el período estudiado, se registraron cambios en el estado de colonización y extinción de los parches entre tiempos consecutivos, permitiendo evaluar la dinámica de infestación en el área. Se constató que parches de diferentes características, incluso los considerados de baja calidad y menor tamaño, se encontraban ocupados por T. infestans. Adicionalmente, se obtuvo un registro detallado de las especies, que junto a T. infestans, invaden los parches en estudio, siendo las más frecuentes T. guasayana y T. garciabesi. La integración de estos resultados, permitió evaluar el impacto de la construcción de Nuevas Viviendas y el control químico aplicado en el área, sobre la prevalencia de infestación por T. infestans, en un contexto metapoblacional.

Fil:Nahabedian, Daniel Eduardo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Se realizó un estudio taxonómico-florístico de la familia Lejeuneaceae (Jungerrnanniales, Hepaticae) en Misiones. La misma se encuentra representada por 25 géneros con 51 especies, incluyendo tres subespecies y una variedad. Se mencionan los materiales y métodos; se describe brevemente el área de estudio. En el capítulo sobre generalidades de las Lejeuneaceae se presentan una reseña histórica, los diferentes sistemas de clasificación propuestos a lo largo de la historia de la familia y el sistema adoptado en este trabajo. Se comenta la relación estrecha con las Jubulaceae, la familia mas próxima. Se discute en detalle la morfología, explicando los términos utilizados en este trabajo y haciendo referencia a la bibliografía actualizada para cada terna en particular; se citan ejemplos del material estudiado. Se resumen los conocimientos actualizados sobre cariología, química y fósiles en la familia. Se reunen las citas anteriores de Lejeuneaceae para el centro y Norte de Argentina, actualizando la nomenclatura y describiendo el estado actual del conocimiento sobre los taxa citados. Se presenta una clave general para todas las especies de Lejeuneaceae halladas en Misiones. El tratamiento taxonómico incluye la descripción de la familia, subfamilias, tribus y géneros, con discusión y una clave para el nivel subordinado en cada categoría. Para cada especie se realizaron ilustraciones y una descripción completa en base al material coleccionado en Misiones; se menciona el habitat, se discuten la variabilidad y otros datos de interés; se cita bibliografía (con referencia a ilustraciones, sinonimia, etc.); se mencionan la distribución geográfica mundial y el material estudiado. De los 25 generos de Lejeuneaceae registrados para Misiones en este trabajo, 12 géneros (un 48 %) son citados por primera vez para Argentina y 21 géneros (un 84%) son citas nuevas para Misiones. En cuanto a las especies, de las 51 especies citadas para la provincia, 36 especies (un 70%) son citas nuevas para Argentina y 45 especies (un 88%) son nuevas para Misiones. También se amplió la distribución geográfica de varios géneros y especies a otras provincias argentinas. Se proponen las siguientes novedades taxonómicas: Aphanolejeunea misionensis Reiner sp. nov. ; Myriocoleopsis riparia Reiner & Gradstein sp. nov. ; Aphanolejeunea paucifolia (Spruce) Reiner comb. nov.; Aphanolejeunea clavatopapillata (Steph.) Reiner comb. nov.; Cheilolejeunea hoehnei Reiner nom. nov. y los siguientes sinónimos: Drepanolejeunea sabaliana Schust. = D. mosenii (Steph.) Bischl.; Microlejeunea cardotii Steph. = M. globosa (Spruce) Steph.; Lejeunea polycephala Spruce = L. cephalandra Spruce; Lejeunea autoica Schust. = L. filipes Spruce; Lejeunea symphoreta Spruce = L. flava (Sw.) Nees subsp. flava; Lejeunea cladobola Spruce = L. lepida Lindenb. & Gott.; Lejeunea setiloba f. intermedia Herz. = L. trinitensis Lindenb.; Aphanolejeunea tuberculata (Evans) Schust. y Cololejeunea cristallina Herz. = A. clavatopapillata (Steph.) Reiner; Cololejeunea spegazzinii (C. Mass.) C. Mass., Lejeunea myriandroecia Spruce y Cololejeunea myriantha (Herz.) S. Arnell = C. minutissima subsp. myriocarpa (Nees & Mont.) Schust. La mayor parte de las especies halladas en Misiones son epífitas de la corteza de árboles, aunque se las encuentra también como epifítas, sobre troncos en descomposición y ocasionalmente sobre suelo y rocas. Con respecto a la fitogeografía, veinte de las especies de Lejeuneaceae de Misiones tienen una amplia distribución neotropical, diez especies se encuentran restringidas al SE de Brasil, SE de Paraguay y Misiones, otras diez especies presentan una distribución afroamericana y el resto de los taxones pertenece a una de las siguientes categorías florísticas: pantropical, disyunta entre América tropical; Oceanía e Indonesia, tricéntrica (América, Africa e India), andina o disyunta entre áreas subtropicales de América del Norte y del Sur. Finalmente se elaboran las conclusiones y completan el trabajo una lista de la bibliografía consultada, un índice de géneros y taxones infragenéricos y un apéndice con fotografías, ilustrando ejemplos de diversas especies.

Fil:Adler, Mónica Teresa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Tesis (Doctor en Ciencias Agropecuarias)--UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2016.

La glándula uropigia de las aves es un órgano sebáceo compacto ubicado dorsalmente sobre las últimas vértebras caudales. Es muy variable en cuanto a su forma y tamaño pero, generalmente, está formada por dos lóbulos y en su extremo caudal posee una papila; en ésta última región se encuentran los poros excretores que suelen ser dos en la mayoría de las aves, pero en algunos casos se observó que éste número puede ser mayor. También es posible encontrar un pincel de plumas rodeando los poros excretores. El tamaño relativo de la glándula uropigia varía considerablemente entre especies; se afirma que las aves acuáticas poseen un tamaño glandular relativo mayor que las aves terrestres. A nivel histológico, la glándula uropigia está compuesta por adenómeros donde se produce la secreción, y cavidades de varios tamaños que cumplen la función de almacenamiento de la secreción uropigial; está rodeada por una cápsula de tejido conectivo denso y el parénquima de la glándula está formado por adenómeros tubulares, el epitelio de los adenómeros es estratificado. La secreción uropigial consiste en una mezcla de fragmentos celulares, láminas córneas y sebo producido por las células secretoras de los adenómeros. La glándula uropigia es una fuente única de producción de monoesteres de cera y otros compuestos lipídicos inusuales y sus funciones incluyen mantenimiento del plumaje, acciones fungicidas y antibacterianas, como órgano productor de feromonas y como cosmético entre otras. El presente trabajo evalúa el tamaño glandular relativo, el desarrollo del pincel de plumas, las características histológicas, histoquímicas y la composición lipídica de la secreción uropigial en aves de distintos ambientes. En las aves acuáticas se encontraron los valores de masas glandulares absolutas más grandes y una notable alometría negativa con respecto al tamaño glandular relativo entre las aves de distintos ambientes. Aquellas aves vinculadas a un ambiente acuático también poseen un mayor tamaño glandular relativo y un pincel de plumas más desarrollado que las aves terrestres. La histología de la glándula uropigia es similar en todas las aves estudiadas (glándula rodeada por una cápsula de tejido conectivo denso, adenómeros tubulares con epitelio estratificado formado por estratos basal, intermedio, secretor y degenerativo). La diferencia más notable es la presencia de una cámara primaria de almacenamiento en aves terrestres y en aquellas especies con menor grado de contacto con el agua (petreles de las tormentas). Las técnicas histoquímicas y lectin-histoquímica reflejan que la composición uropigial posee diferentes compuestos glicosilados. También fue posible determinar que los compuestos predominantes en la composición química de la secreción uropigial son las ceras, tanto en aves acuáticas como en terrestres. El mayor tamaño glandular relativo, la ausencia de cámara primaria y el mayor desarrollo del pincel de plumas en aves acuáticas podría asociarse a un uso diferencial de la glándula ya que es probable que las aves acuáticas requieran un mayor aporte de secreción y una liberación más continuada para mantener el plumaje en condiciones. Los compuestos glicosilados junto con las ceras pueden estar asociados a la función antimicrobiana de la glándula uropigia y están presentes (en mayor o menor medida) tanto en aves acuáticas como terrestres, por lo que esta función sería similar independientemente del ambiente.