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Título de Acceso Abierto
Metabolismo y función de poliaminas en levaduras
Juan José Miret Sara H. Goldemberg
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
Las poliaminas son policationes orgánicos nitrogenados de bajo peso molecular, ampliamente distribuidos en todos los seres vivos, que participan en numerosos procesos metabólicos y fisiológicos. Si bien estos compuestos tienen una importante participación en la proliferación celular, no se conoce su papel fisiológico exacto. Una de las tres estrategias fundamentales para determinar las posibles funciones de las poliaminas en los seres vivos es el estudio de las alteraciones que se producen en celulas u organismos que carecen o tienen disminuido el contenido endógeno de poliaminas, siendo por diversas razones la mejor estrategia. Se han desarrollado dos sistemas para disminuir el contenido endógeno de estos policationes: 1.-la utilización de inhibidores dc la biosíntcsis de poliaminas y 2.- la obtención de mutantes auxótrofas para estas bases orgánicas. El uso de las mutantes constituye una muy buena herramienta de trabajo y ha permitido determinar algunos de los papeles fisiológicos de las poliaminas en los seres vivos. La levadura Saccharomyces cerevisiae es un excelente modelo para el estudio de la bioquímica y de la biología celular y molecular en eucariotes. En los últimos años se han aislado mutantes de este organismo auxótrofas para poliaminas^21,32,33,116, pero han sido poco estudiadas y nos permitirían determinar los papeles fisisológicos de estos compuestos en la proliferación celular. Estas mutantes crecen deficientemente^32,33,116, no pueden esporular^32, no mantienen el plásmido "killer"^118 y tienen alterado el transporte de colina^33. En el presente trabajo se utilizó la cepa de levaduras S.cerevisiae 179-5 auxótrofa para poliaminas obtenida por Hosaka et al^33. El estudio de las alteraciones que se producen en ausencia de estos policationes permitió asignarles nuevas funciones en este organismo. Hemos encontrado que se producen una serie de deficiencias en ausencia de poliaminas, además de las descriptas previamente^32,33,116,118. a.- La síntesis de macromoléculas, ADN, ARN, y proteínas está disminuida, recuperándose primero la síntesis proteica por reagregado de poliaminas. b.-Los ribosomas se encuentran disociados, siendo el índice de asociación dependiente del grado de ayuno; muestran además una mayor sensibilidad al efecto disociante de la presión hidrostática durante la corrida. Además, responden menos al efecto asociante del catión Mg²+; el catión monovalente K+, por el contrario, los disocia más facilmente. El agregado in vitro de poliaminas no altera el equilibrio de subunidades ribosomales. También se observan alteraciones en los polisomas, hay una menor proporción de monosomas involucrados en la síntesis proteica y aparecen estructuras denominadas "halfmers" que son acúmulos de la subunidad 40S sobre el ARNm. Todas estas evidencias demuestran por primera vez un papel fisiológico de las poliaminas en el ensamblado y/o biogénesis del ribosoma eucariótico, previamente hallado en procariotes. c.- La pared celular se vuelve más resistente al ataque de diversas enzimas líticas, dependiendo del grado y tiempo de ayuno de los cultivos. La lisis producida por estas enzimas aumenta parcialmente por agregado de distintos agentes que favorecen su acceso al sustrato, que es la capa más interna de glucano β1-3. La composición química de la pared se encuentra alterada, pues disminuye drásticamente la cantidad de glucano β1-3, aumentan ligeramente las manoproteínas y se incrementa moderadamente el glucano β1-6. La estructura de la pared celular, analizada por microscopía electrónica, no es homogénea, es de mayor espesor y aparecen microcuerpos electrodensos dentro de la misma de probable origen ciloplasmático. Por lo tanto, se pudo ver que las poliaminas participan en la síntesis y/o estructura de la pared celular, siendo la primera vez que se describe este papel para estos compuestos. d.- Se observaron por microscopía de contraste de fase y electrónica una serie de cambios morfológicos en la célula que sugieren que las poliaminas participan y/o regulan algunos de los eventos específicos del ciclo celular. Los cultivos se arrestan en fase G1, como organismos no brotados, pero un porcentaje (5-15%) posee multibrotaciones, algunas de ellas en sitios anormales. Las células son más grandes, lo que se confirmó por análisis de los tamaños de poblaciones celulares con un Coulter Analyzer. Además, utilizando un colorante fluorescente específico para ADN que tiñe los núcleos celulares, se observaron alteraciones en la mitosis. La septación también se encuentra alterada como se observa por microscopía electrónica.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1989 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1989
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