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Metabolismo de porfirinas en estados de intoxicación por plomo
Martha Kreimer Moisés Grinstein
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En los estados de intoxicación por plomo se observa una serie de trastornos metabólicos relacionados con la biosíntesis del hemo. Los principales son : a) elevada concentración de ácido delta-amino levúlico en suero y concomitante excreción por orina. b) elevados niveles de Coproporfirinógeno III en todo el sistema eritropoyético, que luego deriva en una excreción aumentada de este metabolito por orina. c) gran cantidad de Protoporfirina IX en el sistema eritropoyético, excreción posterior por materias fecales. A fin de aclarar los mecanismos responsables de estas anomalías, procedió a estudiar sistemáticamente los pasos metabólicos que median entre Glicocola y Hemo, empleando para ésto sistemas de incubación "in vitro" derivados de sangre de conejos con saturnismo y distintos sustratos. La secuencia de operaciones fué como sigue: se drogaban conejos con (AcO)2Pb durante 7 - 15 dias y a los 20-30 días de la última inyección se los sangraba a blanco. La sangre se recogía sobre heparina y se efectuaban luego los pasos necesarios para obtener un sistema adecuado a normales o conejos con anemia post-hemorrágica, con alta reticulocitosis. Este estado se lograba con 2-4 punciones cardíacas de 15 - 30 ml cada una espaciadas 3 - 5 días. Las incubaciones se efectuaron entre 37 y 38°C en baño termostatizado, con agitación constante, a tiempos variables que se consignarán en cada experiencia. Una vez terminadas las incubaciones, se procedía a aislar los productos biosintetizados. Las porfirinas libres eran extraídas de las mezclas originales, purificadas, separadas en sus componentes e identificadas por cromatografía en columna de CaCO3 y/o cromatografía sobre papel. Se efectuaban luego dosajes cuantitativos de los productos aislados y se hallaban las proporciones relativas de los distintos componentes dentro de las mezclas. También se aisló Protoporfirina IX a partir de hemo, al trabajar con compuestos marcados y se dosó su actividad. Podemos esquematizar en esta forma las experiencias y los resultados. A. Incorporación de Glic-2-C14 en hemo de reticulocitis de conejos: Se efectuaron experiencias con sangre total en presencia de Glic-2-C14 e iones de Fe, agregados como SO4Fe.7H2O. Se incubó durante 4 horas, en aerobiosis. En todos los casos se aislaron las escasas porfirinas libres y la Protoporfirina X a partir de hemo. Los resultados indican que los reticulocitos de los conejos con saturnismo conservan algo de capacidad de biosintetizar hemo "in vitro" a partir de hierro y glicocola. Como se esperaba, los reticulocitos de conejos con anemia posthemorrágica poseen una capacidad elevada para sintetizar hemo "de novo". Hemos controlado los métodos de trabajo con la incubación de sangre de conejos normales, sin reticulocitos y observamos la escasa neoformación de hemo. Creemos que además de la inhibición, ya reconocida y documentada, de la incorporación de Fe al anillo protoporfirínico para dar hemo, existiría algún otro bloqueo en la cadena biosintética de Protoporfirina IX. Uno de esos pasos podría ser la conversión enzimática de Glicocola a ALA. B. Biosíntesis de porfirinógenos a partir de ácido delta-amino levúlico (ALA): Se incubó sobrenadante de hemolizado de glóbulos rojos de conejos con saturnismo en presencia de ALA como sustrato. Se trabajó durante 90′ en anaerobiosis. Los resultados de estas experiencias permiten concluir que en los sistemas provenientes de intoxicados por plomo, la capacidad de biosintetizar "in vitro" PBG y porforinógenos, a partir de ALA, está muy disminuída. Las fracciones de Uroporfirinógeno III y Firiaporfirinógeno III se encuentran marcadamente disminuídas y sólo se observa una acumulación de Coproporfirinógeno III. Nótese que al trabajar con sistemas libres de partículas y en anaerobiosis, no hay conversión de Coproporfirinógeno III a Protoporfirina IX ni a hemo. Creemos que este freno de la cadena biosintética es la causa de la acumulación semejante de Copro-G-III en ambos sistemas, el intoxicado y el normal. C. Incorporación de Acido delta-amino levúlico marcado (ALA-4-C14) en profirinógenos y en hemo de reticulocitos de conejos: Este tipo de experiencia difiere del anterior en que se trabajó con suspensión de glóbulos rojos en solución fisiológica, en presencia de ALA-4-C14 y de iones ferrosos. Además, el tiempo fué de 4 hs y en condiciones aerobias. Con sistemas provenientes de glóbulos rojos de conejos con saturnismo se obtuvo una sintesis total de porfirinas muy inferior a lo hallado en el sistema control, como también una incorporación muy pobre en hemo. De las series B y C de experiencias "in vitro" se deduce que la enzima ALA-dehidrasa presenta una inhibición marcada de su actividad en los estados de intoxicación por plomo. Suponiendo que el proceso "in vitro" sea representativo de lo que sucede "in vivo", tendríamos una explicación satisfactoria del origen de la elevada cantidad de ALA en suero y en orina de conejos y pacientes son saturnismo. D. Biosíntesis de porfirinógenos a partir de Porfobilinógeno (PBG) Se incubaron sobrenadantes de hemolizados de conejos con saturnisno, en presencia de PBG, durante 90' y en anaerobiosis. De estas experiencias se deduciría que los sistemas enzimáticos capaces de transfornar PBG en Uroporfirinógeno III y Firiaporfirinógeno III, no se encuentran alterados; ahora el pasaje de Firiaporfirinógeno III a Coproporfirinógeno III parecería algo disminuído. Cuantitativamente, los porfirinógenos biosintetizados son del mismo orden en ambos sistemas. E. Conversión enzimática de Uroporfirinógeno III C14 (URO G III-C14) en otros porfirinógenos intermediarios en la biosíntesis del hemo: Se incubaron sobrenadantes de hemolizados de conejos en presencia de URO G III-C14, durante 30 y 60' respectivamente, en anaerobiosis. Los resultados de estas experiencias nos dicen que, a los 30', parece haber una menor velocidad de transformación de URO G III en FIRIA G III y COPRO G III en los sistemas provenientes de conejos con saturnismo. Esta diferencia no es muy notoria en la experiencia de 60'. En esta última se observa una transformación menor de FIRIA G III a COPRO G III. Notemos que en ningún paso se observa aceleración de procesos enzimáticos. F. Conversión enzimática de Coproporfirinógeno III-C14 (Copro G III-C14) en Protoporfirina IX C14 libre e incorporación en hemo de reticulocitos de conejos: Se trabajó durante 4 horas, en aerobiosis, con hemolizados totales de conejos, en presencia de COPRO G III-C14, como sustrato. Los resultados de estas experiencias nos indican que no habría una hipersíntesis de Proto IX a partir de Copro G III, más aún, se cree que hay una cierta disminución de la actividad del complejo enzimático CPG-decarboxilasa-CPG oxidasa, lo que llevaría a una acumulación de Copro G III en el sistema eritropoyético y a su posterior excreción por orina. La acumulación de Proto IX, por su escasa incorporación al hemo de glóbulos rojos de conejos con saturnismo causaría el aumento de Copro G III, como resultado de un mecanismo de autoregulación enzimática de tipo represivo. Descartaríamos así toda similitud del saturnismo con estados de porfiria, como fuera sugerido por algunos autores, estados aquéllos donde hay un exceso de síntesis de porfirinas y precursores. La anemia saturnina sería causada por bloqueo de la incorporación de Fe al anillo protoporfirínico para dar hemo y por una inhibición principal de la biosíntesis de Proto IX a la altura de la ALAD, aunque no podemos descartar que haya otros bloqueos secundarios.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1963 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1963
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