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Título de Acceso Abierto
La reacción del Carbazol en la valoración de los ácidos hexurónicos
Horacio Peluffo Agustín D. Marenzi
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
a) Parte teórica: Se definen los Acidos Hexurónicos como productos de oxidación del grupo primario de las hexosas y no establece su nomenclatura y la de sus derivados. Se citan las fuentes naturales y se hace una breve reseña histórica de los mismos. En particular se tratan los ácidos glucurónicos galacturónico y manurónico respecto de la estructura de las formas D y L y de las antípodas alfa y beta; se citan sus propiedades físicas y químicas y los procedimientos de obtención. Sobre los glucurónidos se detallan propiedades y se mencionan las teorías enunciados sobre el origen de los mismos en el organismo, el sitio de la conjugación y el mecanismo de la misma. Respecto del metabolismo del ácido glucurónico se acepta el esquema de Fishman y sus colaboradores, se comenta la influencia de la dieta en la excreción y se citan los usos terapeuticos de dicho ácido. Los métodos de valoración de los Acidos Hexurónicos se agrupan en cinco clases: I)los basados en la producción de furfural; II)idem en la producción de CO2; III)idem en las propiedades cromógenas; IV)idem en las propiedades reductoras; V)idem en la actividad óptica (polarimetria). Se discuten cada uno de esos métodos y en especial el que utiliza el naftoresorcinol como reactivo. Sobre éste se mencionan sus propiedades los medios de obtención y las distintas técnicas en que se emplea. b) Parte experimental: Se detalla la técnica de Dische para el ácido glucurónico. Se dan indicaciones sobre los reactivos y en especial sobre el carbazol. Trabajando con glucurona se estudió la reacción del carbazol y se ratifican los resultados obtenidos por Dische. Se estudia el desarrollo del color en el tiempo, se selecciona el filtro en el Pulfrich (S53)y se establece la curva de absorción con el espectrofotómetro de Beckman. Se fijaron las condiciones experimentales (tiempo de calentamiento, influencia de la temperatura, adición y concentración de los reactivos, idem de la temperatura de reacción). Se determinó el Eo de la reacción en el fotómetro de Pulfrich y sobre los ensayos de proporcionalidad se realizó un estudio estadístico que se completa con el trazado de la recta de extinción vs concentración por el método de los cuadrados mínimos. Se realizó un estudio similar y paralelo sobre la reacción del carbazol con la glucosa y con dos glucurónidos (bornil y mentil) que se obtuvieron en el laboratorio por vía biológica. Se introdujeron variantes en la técnica y se estudió la influencia de las mismas llegando a establecer la necesidad de trabajar a temperatura constante . Se establece definitivamente la siguiente técnica: A 1 ml de solución de ensayo (conteniendo de 5 a 60 microgramos por ml) se le agregan 6 ml de H2SO4 concentrado Merck, se caliente al baño maria (100°c) durante 20 minutos y se enfría luego a 20°C, se agregan 0,2 ml de solución alcohólica de carbazol al 0,10% y se deja reaccionar a 20°C durante dos horas. Se lee en el Pulfrich la extinción contra un blanco análogo pero con agua destilada en vez de la solución de ensayo. Filtro S53 (530 milimicrones); cubas de l cm EO = 7,503. Al estudiar la aplicación de dicha técnica a la valoración de hexurónidos en el suero humano se estudió previamente la influencia de los desproteinizantes (tungstico,(OH)2Zn,(OH)2Cd, acido metafosfórico, alcohol.acetona y ácido tricloroacético). Se prefiere el ácido tricloroacético y con su empleo se realizan ensayos de recuperación de glucurona sobre soluciones de ovoalbúmina y de suero sanguíneo. Se discuten los resultados obtenidos comparándolos con los publicados anteriormente y se citan valores normales. Se estudió la aplicación de la reacción del carbazol a la valoración de los hexurónidos en la orina, trantando de eliminar previamente las interferencias que producen color de carbonización. Se intentó la eliminación de urea, el tratamiento con adsorbentes (Norita, tierra Fuller, ceolin, silicato de aluminio Lloyd), con solventes (cloroformo, eter, alcohol amílico), la defecación por precipitación de (OH)2Cu, (OH)2Zn, por acetato de plomo neutro y básico. Ninguno de estos procedimientos es eficaz por lo que se optó por realizar la valoración con orina diluida 1/20 y un blanco para la lectura fotométrica que lleva todos los reactivos, incluso orina, pero no lleva carbazol. Los ensayos de recuperación de glucurónidos y de glucurona con orina resultaron satisfactorios y sobre muestras de orina de 2h horas, en 24 sujetos normales adultos, se determinó la tasa de excreción normal de ácido glucurónico total.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1955 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1955
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