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Título de Acceso Abierto
Estudio sobre células de hígado de rata cultivadas en suspensión
Delia Casanello Lázaro E. Gerschenson
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
Se describe un método original de extracción y cultivo de células hepáticas en suspensión. Fueron extraídas del hígado con una solución salina de tetrafenilboren de Na. y cultivadas con medio de cultivo preparado en el laboratorio, con solución salina balanceada de Hank, vitaminas y glucosa de Eagle y mezcla de aminoácidos MEM. Se suplementó con suero de ternero al 10% y antibióticos. Con la extracción se obtuvieron preferentemente hepatocitos. Se realizaron estudios sobre el crecimiento de la población celular, medido por el contaje de células y el contenido de ADN. Se determinó el tiempo de replicación celular usando colchicina. Se pudo comprobar que a través del tiempo de cultivo sobrevivían los hepatocitos, no encontrándose prácticamente otro tipo celular. Se probó el efecto del medio de cultivo para determinar diversas funciones: respiración celular, actividades enzimáticas, incorporación de aminoácidos en proteínas. Asimismo, se midió la producción de urea y glucógeno a través del tiempo de cultivo, comprobándose que estas dos funciones primordiales no se habían modificado. Con el objeto de verificar la posibilidad de utilizar el sistema para estudios hormonales y bioquímicos de regulación, se midió el efecto de dos hormonas, insulina y glucagón, sobre la respiración celular y la biosíntesis de glucógeno. Las células respondieron en la forma esperada. También se probó la hormona de crecimiento bovina sobre el incremento de la división celular, obteniéndose resultados positivos. Para estudiar bioquímicamente el proceso de desdiferenciación celular, se midieron diversas constantes bioquímicas de tres enzimas relacionadas con el metabolismo de los hidratos de carbono: glucosa 6-fosfatasa, pirofosfato inorgánico-glucosa fosfotrasferasa y pirofosfato-fosfohidrolasa. Estas tres acciones fueron atribuídas a una sola enzima multifuncional, afirmación que está en divergencia con los resultados obtenidos en este trabajo. Las tres enzimas tienen diferentes relaciones de disminución de actividad a través del tiempo de cultivo; además la actividad fosfotrasferasa está poco disminuída, con respecto a las otras dos, y se deduce de esto una tendencia a la fosforilación de la glucosa, no considerada como actividad glucoquinásica, ya que no existe insulina en el medio de cultivo. Midieron también las constantes de Michaelis y se determinó una disminución de la afinidad de la glucosa 6-fosfatasa por su sustrato, interpretándose como un mecanismo para prevenir la liberación de glucosa. Además se probó el efecto de la insulina sobre la actividad específica de la glucosa 6-fosfatasa y fosfotrasferasa y el efecto de la insulina y puromicina sobre la primera. A ese respecto se especula con la teoría de que las hormonas actúan como inductores o represores en términos bacterianos.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1970 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1970
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