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Título de Acceso Abierto

Desarrollo de una tecnología de producción de interferón beta recombinante humano en células eucariontes

Romina Paola Zuqueli Ricardo Kratje María Eugenia Rodríguez Hugo César Gramajo Edgardo Elvio Guibert Marina Etcheverrigaray

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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
El rhIFNbeta-1 es empleado como agente terapéutico en una variedad de enfermedades, como la esclerosis múltiple. En este trabajo se desarrollaron estrategias tendientes a producir rhIFNbeta-1a. Diferentes líneas celulares fueron transfectadas por lipofección utilizando vectores con distintas características. El proceso de coamplificación génica de los genes de dhfr e hIFNbeta-1 en las células CHO p91023 permitió aumentar hasta 6 veces la producción de la proteína recombinante al realizar la presión de selección gradual hasta 500 nM MTX. Basándonos en la producción preferencial de la isoforma glicosilada y la alta productividad, se seleccionaron clones derivados de la línea CHO pCI IFNbeta-1, para continuar con la optimización de las condiciones de cultivo. Se evaluó el efecto del agregado de distintos suplementos al medio de cultivo, observando que la producción de rhIFNbeta-1a aumentaba al adicionar NaBu y ZnSO4. Sin embargo, estos incrementos no pudieron mantenerse durante más de 3 días. El clon CHO pCI 2A5 1D5 resultó ser el que mejor respondió a la presencia de los mencionados aditivos. Con el fin de prolongar su producción, se realizaron experiencias de pulsos que aumenten la producción, y descansos que resulten favorables para el crecimiento y mantenimiento celular. Así se logró un incremento de las productividades de rhIFNbeta-1a de hasta 4, 5 y 7 veces ante el agregado de ZnSO4, NaBu y ambos aditivos, respectivamente. Así, este trabajo permitió establecer un sistema de producción adecuado de rhIFNbeta-1a, generando células recombinantes estables y seleccionando condiciones óptimas para su cultivo.
Palabras clave – provistas por el repositorio digital

rhIFNbeta 1a; Células CHO; Butirato de sodio; Sulfato de zinc; Metotrexato; Células recombinantes; CHO cells; Sodium butyrate; Zinc sulphate; Methotrexate; Recombinant cells

Disponibilidad
Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2006 Biblioteca Virtual de la Universidad Nacional del Litoral (SNRD) acceso abierto

Información

Tipo de recurso:

tesis

Idiomas de la publicación

  • español castellano

País de edición

Argentina

Fecha de publicación