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Título de Acceso Abierto

Caracterización de un sistema de enzimas lipolíticas del medio de cultivo de Tetrahymena

Jorge Florin-Christensen Leif Rasmussen

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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En esta Tesis se describe el hallazgo de actividad hemolítica, así como también de tres actividades lipolíticas en el medio extracelular del protozoo ciliado Ietrahymena thermophila. Las enzimas halladas son una fosfolipasa C (EC.3.1.4.3), una fosfolipasa A, (EC.3.1.1.32) y una triacilglicerol lipasa (EC.3.1.1.3). Estas enzimas fueron purificadas mediante precipitación fraccionada con sulfato de amonio y cromatografía de intercambio iónico, de filtración en geles y de interacción hidrofóbica en decil Sepharose 4B. Se encontró así que la fosfolipasa C copurífica con actividad hemolítica, no así la triacilglicerol lipasa ni la fosfolipasa A, aunque esta última es capaz de acelerar la acción hemolítica de la fosfolipasa C. Se halló además un segundo factor hemolítico no asociado a fosfolipasas, cuya acción es inhibida por colesterol y que, junto con la fosfolipasa C, puede dar cuenta de la acción hemolítica causada por el medio extracelular de Tetrahymena. Este segundo factor podría actuar en forma semejante a ciertas citolisinas bacterianas que causan hemólisis por interacción con el colesterol de las membranas. Las tres enzimas lipolíticas fueron caracterizadas y sus propiedades indican que provienen del sistema lisosomal. El hallazgo de las actividades aquí descriptas proporciona una explicación para el enigmático rol de los fosfonolípidos, un tipo especial de fosfolípidos que predominan en la membrana plasmática de Tetrahymen. Estos compuestos presentan un enlace directo carbono-fósforo que los hace particularmente resistentes a la hidrólisis enzimática por fosfolipasa C. Poseen, además, un enlace éter en la posición sn-1, que les confiere resistencia a la acción de fosfolipasa A. Es decir, Tetrahymena, una célula carente de pared celular u otras estructuras protectoras, sería capaz de tolerar sus propias secreciones líticas gracias a este tipo peculiar de fosfolípidos. Otras observaciones presentadas aquí pueden estar relacionadas con particularidades de las membranasde este ciliado. Así debe destacarse la baja proporción de triacilglicerol en la membrana plasmática, contrastando con lo observado para membranas internas de Tetrahymena. Este hecho puede estar vinculado con la secreción de la triacilglicerol lipasa. Otro aspecto notable es que esta célula carece totalmente de colesterol, el que es reemplazado por tetrahymanol. Esto puede explicar que el segundo factor hemolitico hallado no actúe sobre la membrana de Tetrahymena y sí sobre la de los eritrocitos. En esta Tesis se propone que la secreción de enzimas y las particularidades de la membrana representan una coadaptación que puede conferir a estos ciliados una ventaja evolutiva, al ser capaces de lisar otras células siendo ellos mismos resistentes. Otros experimentos presentados aquí sugieren, por último, que las actividades lipolíticas secretadas pueden desempeñar un rol destacado en la digestión extracelular e incorporación de fosfolípidos exógenos en este ciliado.
Palabras clave – provistas por el repositorio digital

No disponibles.

Disponibilidad
Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1988 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Información

Tipo de recurso:

tesis

Idiomas de la publicación

  • español castellano

País de edición

Argentina

Fecha de publicación

Información sobre licencias CC

https://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar/

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