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Valoración de nistatina residual en alimentos aplicando un nuevo método
Carlos Julio Cerdán Adolfo L. Montes
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En el presente trabajo se determina un nuevo método, del tipo turbidimétrico, para la valoración de la actividad de la nistatina, antibiótico fungicida obtenido por fermentacion del Streptomyces neursei, y se efectúan ensayos de aplicación de la misma en la conservacion de vegetales, determinandolos valores residuales luego de diferentes tiempos de contacto del antibiótico con esos alimentos. PARTE EXPERIMENTAL El trabajo fué desarrollado en la siguiente forma: PRIMERA PARTE: ENSAYO Y AJUSTE DE UN NUEVO METODO PARA VALORAR NISTATINA I.- DETERMINACION PRIMARIA DE LAS CONDICIONES DE ENSAYO. La idea inicial fué probar la eficacia del germen de ensayo y el medio de cultivo del mismo utilizados para el método de difusión en agar condicionándolos para obtener un procedimiento rápido para la valoración del antibiótico con lo que se logrará además de rapidez, mayor exactitud y economía (menor número de operadores, de material, medios, etc.) FUNDAMENTO DEL ENSAYO A DESARROLLAR: Medir el grado de crecimiento del germen (Saccharomyces Cerevisiae A.T.C.C. 9763) en función de distintas concentraciones de antibióticos standard; trazar con las dos variables una curva (curva standard) y leer en ella los valores del grado de crecimiento obtenidos con la muestra problema los que, mediante el cálculo correspondiente, darán la potencia buscada. DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE INOCULO Y EL TIEMPO DE INCUBACION NECESARIO OBJETO: Determinar si con las condiciones impuestas es posible obtener un crecimiento del germen de ensayo que haga factible la ejecución del método proyectado y elegir las más convenientes. CONCLUSIONES: a) Las condiciones impuestas permiten el crecimiento adecuado del microorganismo de ensayo. b) Las condiciones elegidas son: concentración de inóculo: 6%; tiempo de incubación 37°C: 3 horas. II.- ELECCION DEL SOLVENTE APROPIADO PARA LA DISOLUCION DEL ANTIBIOTICO A DOSAR. a) ESTUDIO DE LA MISCIBILIDAD EN AGUA DE LOS POSIBLES SOLVENTES A UTILIZAR. OBJETO: Delimitar los solventes en los que se determinarán luego, la solubilidad del antibiótico. b) PRUEBA DE LA SOLUBILIDAD DE LA NISTATINA EN LOS SOLVENTES ELEGIDOS. OBJETO: Estudiar comparativamente, dentro de las condiciones requeridas para el ensayo, la disolución del antibiótico en los solventes definidos en el ensayo anterior. c) INTERFERENCIA EN EL CRECIMIENTO DEL GERMEN DE ENSAYO DE AQUELLOS SOLVENTES QUE CUMPLAN LAS CONDICIONES DE LOS ITEMS a y b. OBJETO: Seleccionar aquellos solventes que no modifiquen el normal desarrollo del germen durante el período de incubación del ensayo. d) DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE ANTIBIOTICO A UTILIZAR EN LOS ENSAYOS. OBJETO: Determinar si dentro de las limitaciones establecidas en los apartados anteriores, es posible obtener una concentración de antibiótico conveniente, para la realización del ensayo. e) ESTABILIDAD DE LA NISTATINA EN LOS SOLVENTES NO INTERFERENTES. OBJETO: Elegir el solvente que produzca la menor variación en la actividad biológica del antibiótico durante el mayor tiempo posible con lo que se logrará: 1) Eliminar del método los errores que se producirían por la variación de la potencia del antibiótico durante el tiempo de ensayo. y 2) Usar la solución standard en más de un ensayo con las consiguientes ventajas de comparación de datos y economía. f) CONTROL DE LA SOLUBILIDAD DEL ANTIBIOTICO EN EL SOLVENTE FINALELNTE ELEGIDO. OBJETO: Asegurar que la nistatina en las condiciones definidas se disuelve totalmente. CONCLUSIONES: De los ensayos realizados se determina: a) Como solvente más conveniente la mezcla al 50% de propilenglicolmetanol. b) La concentración de la solución de antibiótico a utilizar deberá estar comprendida entre 100 y 200 u/ml. c) Se establece como tiempo máximo de conservación de una solución stock de concentración 4.000 u/ml de nistatina en el solvente elegido: 3 días. III.- DETERMINACION DE LAS CONDICIONES DEFINITIVAS DE ENSAYO. OBJETO: Considerando las experiencias anteriores, determinar las condiciones óptimas de ensayo (concentración de inóculo y tiempo de incubación). CONCLUSIONES: Se confirman las condiciones primarias determinadas anteriormente (concentración de inóculo: 6% y tiempo de incubación a 37°C: 3 horas). SEGUNDA PARTE: REPRODUCIBILIDAD DEL METODO EN LAS CONDICIONES QUE PERMITAN SU APLICACION PARA LA DETERMINACION DE VALORES RESIDUALES EN ALIMENTOS. I.- REPRODUCIBILIDAD DE DATOS. OBJETO: Determinar si la variación de los resultados obtenidos con la aplicación del método definido para las condiciones convenientes, está dentro de los límites aceptados para este tipo de ensayos. CONCLUSIONES: Realizados 188 ensayos individuales se obtiene como variación máxima de las potencias obtenidas un 4,2%. Este valor está dentro de lo exigido para este tipo de métodos. II.- COMPARACION DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON EL PRESENTE METODO Y EL DE DIFUSION EN PLACAS DE AGAR. OBJETO: Determinar si los valores de la actividad biológica de la muestra, resultantes del ensayo de reproducibilidad de datos, concuerdan con los obtenidos con el método de difusión en placas de agar al que se considera como referencia por ser el de uso común en la actualidad. CONCLUSIONES: Los resultados obtenidos con los dos métodos son comparables. TERCERA PARTE: ENSAYOS DE APLICACION DE LA NISTATINA PARA LA CONSERVACION TEMPORARIA DE FRUTAS Y HORTALIZAS. I) EFECTO CONSERVADOR EN ACELGA, TOMATE, LIMON Y UVAS. OBJETO: Determinar si la aplicación de una solución de nistatina sobre estos alimentos tiene algún efecto benéfico en su conservación. CONCLUSIONES: Se determina una evidente acción conservadora del antibiótico en tomate y limón en los que, luego de un tratamiento con una solución de 100 ppm de nistatina, no se observó la aparición de hongos contaminantes hasta 4 a 5 días después de su aparición en los controles. En uva, en casi todos los ensayos, las frutas tratadas se mantuvieron alrededor de 1 día más que en los controles sin presentar aparición de hongos siendo además en ellas la cantidad de contaminantes menor. II) VALORACION DEL ANTIBIOTICO RESIDUAL APLICANDO EL METODO ENSAYADO. OBJETO: Determinar la cantidad de nistatina residual que hay en cada uno de los vegetales tratados con el antibiótico, y su variación en función del tiempo, aplicando el método de valoración rápida ensayado. CONCLUSIONES: Luego del secado de la solución de 100 ppm. agregada a los alimentos, en el que la potencia se reduce aproximadamente un 40%, la actividad del antibiótico residual se mantiene con valores aceptables hasta los 7 días, no se observaron interferencias entre los vegetales ensayados y la nistatina.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1958 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1958
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