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Propiedades cinéticas de la piruvato quinasa hepática tipo L y tipo M
Luis A.F. Jiménez de Asúa Héctor Carminatti
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En el presente trabajo se han estudiado algunas propiedades cinóticas de la piruvato quinasa hepática tipo L y tipo M. Por consiguiente, se pueden considerar dos aspectos en esta investigación: Piruvato guinasa hepática tipo L: la isoenzima L de hígado de rata fue purificada aproximadamente entre 40 a 60 veces. Estudiando la variación de la velocidad inicial de la reacción en función de la concentración de PEP, se observó que a pH 7.5 la enzima tiene un marcado efecto cooperativo hemotrópico para dicho sustrato. En presencia de FDP las curvas de saturación se transforman de sigmoides en hiperbólicas, aumentando marcadamente la afinidad de la enzima por ol PEP. Por el contrario, el ATP regula la actividad de la isoenzima L de higado en sentido opuesto comportándose como un inhibidor alostérico. A pH 7.5 y a niveles bajos de PEP la curva de inhibición por ATP es hiperbólica, convirtiéndose en marcadamente sigmoide en presencia de concentraciones muy bajas de FDP (0.002 mM)o a niveles muy altos de PEP. El ATP a su vez, también ejerce un marcado efecto heterotrópico negativo sobre la curva ue saturación de esta enzima para el PEP. Las propiedades reguladoras de la piruvato quinasa hepática tipo L son marcadamente modificadas por variaciones en el pH del medio de incubación. A valores de pH inferiores a 7.0, la curva de saturación para el PEP es hiperbólica, el FDP no tiene efecto activador y la cinética de inhibición por ATP es sigmoide. A valores de pH superiores a 7.0, el efecto cooperativo homotrópico de la isoenzima L de hígado con respecto al PEP aumenta marcadamente a medida que se incrementa el pH del medie de incubación. En estas condiciones la cinética de inhibición de la enzima por ATP es de tipo Michaeligno y el FDP tiene un marcado efecto activador. Estos cambios también se apreciaron cuando se los estudió en el rango de pH intracelular hepático. Los datos cinéticos obtenidos con la piruvato quinasa hepática tipo L fueron interpretados de acuerdo al modelo propuesto por Honod, Hymany Changeux.Se discute la significación fisiológica de los resultados encontrados. Piruvato quinasa hepática tipo M: la isoenzima M de hígado de rata fue purifioada aproximadamente 1O veces. Estudiando el efecto de diferentes meta mebolitos sobre la actividad de esta enzima se observó que la misma es marcadamente inhibida por los siguientes aminoácidos: alanina, fenilalanina, triptofano, tirosina, prolina y treonina. Este comportamiento difiere apreciablemente del de la piruvato quinasa de músculo esquelético, cuya actividad es específicamente inhibida por fenilalanina, fenómeno que depende del pH del medio de incubación. La cinética de inhibición por alanina y fenilalanina de la isoenzima M de hígado fue estudiada con mayor detalle, demoetrándose que estos aminoácidos son inhibidores del tipo mixto con respecto al PEP. Además, las curvas de actividad enzimática en función de la concentración de alanina y fenilalanina son hiperbólicas. El efecto de estos dos aminoácidos es independiente del pH del medio de incubación. Se concluyó que esta enzima tiene propiedades cinéticas distintas a las de la piruvato quinasa de músculo esquelético. La significación fisiológica de los resultados obtenidos con la isoenzima M de hígado en condiciones de gluconeogénesis crónica también se discuten. Confines comparativos se estudió además las propiedades cinéticas de las isoenzimas presentes en la corteza renal. A partir de extractos crudos de este tejido se purificó parcialmente dos formas de piruvato quinasa a las que se denominó I y II. Esta última se encuentra en menor preporción y tiene características reguladoras similares a las de la isoenzima L de hígado. La forma II tiene propiedades cinéticas comunes a las de la piruvato quinasa hepática tipo L y tipo M, ya que se observó que la misma tiene efecto cooperativo homotrópico con respecto al PEP, pero su actividad no es modificada por la presencia de ATP y FDP. También ee demostró que cambios en el pH de incubación (6.8-7.5) no producen variaciones en la cooperatividad de las curvas de saturación de esta enzima para el PEP. Además, la alanina inhibe marcadamentela actividad de la forma II, pero este efecto no es revertido por el FDP. Se concluye que la forma II de piruvato quinasa de corteza renal tiene propiedades similares a las descriptas en este trabajo para las isoenzimas L y M de hígado.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
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Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 1971 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
1971
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