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Título de Acceso Abierto
Optimización de la Producción de Eritropoyetina Humana Recombinante (rhEPO) Mediante el Cultivo de Células Animales
Caroline Didier Marina Etcheverrigaray Juan Daniel Claus Alejandro Cesar Olivieri Joaquin Valentin Rodriguez Ricardo Kratje
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
En este trabajo se presentan los resultados obtenidos durante la optimización de la producción de eritropoyetina humana recombinante (rhEPO) en cultivo de células CHO (Chinese Hamster Ovary cells), partiendo de la selección de un nuevo clon productor, el estudio del efecto de aditivos y variables fisicoquímicas sobre el crecimiento, productividad y patrón de isoformas producidas, y finalmente, el diseño racional de medios de cultivos que permiten obtener una molécula de alta calidad glicosídica. Inicialmente se clonaron líneas celulares recombinantes productoras de rhEPO. Los clones seleccionados fueron adaptados a crecer en suspensión, en medios de cultivo de bajo contenido de suero y libre de proteínas, estudiándose el efecto que ejercen sobre el metabolismo diferentes metodologías de adaptación a suspensión, concentraciones de suero y sistemas de cultivo. Utilizando un diseño factorial se evaluó la influencia de la adición de aminoazúcares, la acumulación del ion amonio en sobrenadante y el efecto de la osmolalidad, sobre el crecimiento, la productividad y el patrón de glicosilación. Posteriormente, y mediante un diseño experimental de mezclas cruzadas con limitaciones, acoplado a un análisis multivariado de las respuestas (a través de las metodologías de superficies de respuesta o de redes neuronales artificiales), seguido de un proceso de optimización, se diseñaron dos medios de cultivo con el objetivo de optimizar la producción de rhEPO. Estos medios fueron utilizados durante el cultivo del clon productor en un biorreactor tipo tanque agitado, en modo continuo con perfusión, obteniéndose una molécula de rhEPO de alta calidad glicosídica.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
Recombinant human erythropoietin; Culture media optimization; Suspension continuous culture; Perfused bioreactor; Response surface methodology; Artificial neural networks; Eritropoyetina humana recombinante; Optimización de medios de cultivo; Cultivo continuo en suspensión; Biorreactor con perfusión; Metodología de superficies de respuesta; Redes neuronales artificiales
Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 2008 | Biblioteca Virtual de la Universidad Nacional del Litoral (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
2008-05-21
