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Mecanismos de acción de eritropoyetina y eritropoyetina carbamilada en la funcionalidad de células endoteliales
Romina Eugenia Maltaneri Alcira Nesse Daniela Vittori
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Resumen/Descripción – provisto por el repositorio digital
Durante mucho tiempo la Eritropoyetina (Epo) fue conocida únicamente por su acción sobre el sistema hematopoyético. Más recientemente, investigaciones desarrolladas para comprender los mecanismos básicos de sus efectos biológicos han revelado un efecto pleiotrópico de Epo que se extiende más allá de la regulación eritropoyética. En este sentido, su capacidad citoprotectora sugiere un posible uso terapéutico en enfermedades neurodegenerativas y cardiovasculares, además de su administración a pacientes anémicos. Por otro lado, la actividad de Epo sobre progenitores eritroides de médula ósea ha sido asociada a una mayor incidencia de eventos trombóticos e hipertensión en pacientes, lo cual ha dado origen a la búsqueda de compuestos derivados incapaces de estimular la eritropoyesis que conserven su actividad citoprotectora. Uno de estos compuestos es la eritropoyetina modificada por carbamilación (cEpo), cuyos efectos sobre el endotelio no han sido estudiados en profundidad hasta el momento. Con el fin de optimizar el uso clínico de Epo se requiere de un mayor conocimiento para aclarar la compleja interrelación de las acciones hematopoyética y no-hematopoyética de esta citoquina sobre distintos tejidos. En base a esto, uno de los objetivos de este trabajo de Tesis Doctoral es aportar nuevos datos sobre los efectos y mecanismos de acción de Epo sobre el endotelio, con particular interés en la angiogénesis, al mismo tiempo que se busca dilucidar si la carbamilación de la molécula de Epo introduce algún cambio en su actividad biológica sobre células endoteliales. Mediante técnicas de migración por wound healing, formación de túbulos de células endoteliales sobre un sustrato símil matriz extracelular y análisis del ciclo celular, realizados sobre la línea celular endotelial humana EA.hy926, determinamos un efecto inductor de Epo sobre la función angiogénica, que no fue observado con cEpo. En cuanto a los mecanismos de acción involucrados, hemos descrito la participación del receptor EpoR2 y de la quinasa JAK2, asociados a la acción eritropoyética de Epo, en su efecto inductor de la migración en células endoteliales. Si bien cEpo fue capaz de activar las vías de señalización asociadas a Epo, su ausencia de efecto promigratorio estaría relacionada con un cierre prematuro de su señal, mediado por la fosfatasa PTP1B. Este mecanismo de acción diferencial entre ambas eritropoyetinas fue reportado en trabajos anteriores de nuestro grupo realizados en células eritroides. Por otro lado, nuestros resultados muestran un efecto dual de Epo sobre la generación de especies reactivas de oxígeno, siendo capaz de prevenirla a tiempos largos de exposición, al igual que cEpo, pero también estimulándola en forma transiente, lo cual constituiría un mecanismo promigratorio. La enzima óxido nítrico sintasa también estaría relacionada con la acción de Epo sobre la migración de células EA.hy926. La relación entre calcio y eritropoyetina, descrita anteriormente en la diferenciación eritroide, también es importante en la migración de células endoteliales, como lo confirman ensayos realizados con quelantes de este catión. Mediante experimentos realizados con inhibidores farmacológicos de canales de calcio dependientes de voltaje se determinó la participación de los mismos en el influjo de este catión estimulado por Epo, lo que constituye una evidencia a favor de la expresión de estos canales en células endoteliales. El estudio de estos canales nos permitió, además, conocer la actividad antiangiogénica de la amlodipina, un antagonista de calcio de uso clínico como antihipertensivo. Por otra parte, también se determinó la importancia de canales de calcio TRPC y canales de potasio en la respuesta migratoria a Epo. El calcio fue también un intermediario en el efecto inductor de Epo sobre la expresión de acuaporina-1, cuya función como proteína canal de agua hemos visto por primera vez asociada a la migración estimulada por Epo. En conjunto, los resultados presentados en este trabajo de Tesis muestran un efecto diferencial de eritropoyetina y su derivado carbamilado sobre la angiogénesis, mediante mecanismos similares a los observados en células eritroides, y aportan información sobre los diferentes intermediarios y efectores de Epo en su modulación de la actividad angiogénica. La incapacidad de cEpo de activar procesos relacionados a la migración celular genera interés en su posible aplicación terapéutica, ya que podría ejercer citoprotección sin estimular la angiogénesis ni la eritropoyesis en pacientes donde estos procesos pueden representar un efecto indeseado.Palabras clave – provistas por el repositorio digital
ERITROPOYETINA; ERITROPOYETINA CARBAMILADA; CELULAS ENDOTELIALES; ANGIOGENESIS; MIGRACION CELULAR; CALCIO; ACUAPORINA-1; ERYTHROPOIETIN; ERYTHROPOIETIN CARBAMYLATED; ENDOTHELIAL CELLS; CELL MIGRATION; CALCIUM; AQUAPORIN-1
Disponibilidad
| Institución detectada | Año de publicación | Navegá | Descargá | Solicitá |
|---|---|---|---|---|
| No requiere | 2018 | CONICET Digital (SNRD) |
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| No requiere | 2018 | Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) |
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Información
Tipo de recurso:
tesis
Idiomas de la publicación
- español castellano
País de edición
Argentina
Fecha de publicación
2018-03-16
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