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Los enturbiamientos causados por las proteínas que se producen durante el almacenamiento y transporte de los vinos blancos es una constante preocupación de los enólogos. La brillantez de estos vinos es una de los principales aspectos de calidad y estos enturbiamientos pueden producirse fácilmente en vinos embotellados con leves cambios de la temperatura. Las uvas Sauvignon blanc desarrollan durante su maduración los aromas típicos de la variedad. En ese momento también aumenta el contenido de proteínas que influye en las futuras características organolépticas y estabilidad del vino. Debido a las condiciones climáticas del oasis vitícola cuyano (sobre todo radiación solar y temperatura) lograr un buen contenido de aromas en Sauvignon blanc no es tarea fácil. Por eso resulta importante encontrar métodos que logren estabilidad proteica sin modificar, o al menos no en forma significativa, el perfil aromático de estos vinos. Los vinos elaborados en estas regiones tienen una alta cantidad de proteínas derivadas de la uva lo que requiere mayores dosis de bentonita para su estabilización en comparación con otras variedades. Para evitar los problemas de enturbiamientos los vinos se clarifican con elevadas dosis de bentonita lo que lleva la pérdida de gran parte de los aromas varietales. En este trabajo se estudió la aplicación de tratamientos alternativos a la bentonita con el objetivo de reemplazar su uso para la eliminación de las proteínas. Se utilizaron manoproteínas, agregadas o liberadas de las paredes celulares de las levaduras y taninos enológicos. Se hicieron estudios de la estabilidad de los vinos con el test de calor, técnica muy utilizada por la industria. Además se estudiaron los pesos moleculares de las proteínas encontradas por electroforesis en gel de poliacrilamida, después de los diferentes tratamientos. Se observó que el único tratamiento eficaz para estabilizar los vinos respecto de las proteínas fue la bentonita. La aplicación de otros productos no elimina por completo las proteínas causantes de los enturbiamientos. Sin embargo, en combinación con bajas dosis de bentonita, se obtienen vinos estables, lo que haría que los vinos Sauvignon blanc conserven la mayoría de los aromas provenientes de la uva.

Durante el blanqueo textil el peróxido de hidrógeno puede actuar (a) como oxidante frente a los pigmentos o colorantes naturales de la fibra, (b) puede descomponerse con evolución de oxigeno gaseoso o (o) puede quedar comoremanente al darse por concluida la operación. El rendimiento del peróxido de hidrógeno durante el blanqueo textil, definido por el cociente ds la cantidad (a) por la que inicialmente estaba presente, tiene fundamental influencia sobre la economiadel proceso. Por tal razón se utilizan en la industria textil estabilizadores del peróxido de hidrógeno, cuya función es anular la acción de los catalizadores presentes, causantes de la descomposición. En este trabajo se ha determinado la influencia, a través de ensayos realizados sobre nuestras de lO gramos de tejido de algodón descrudadc, de las variables: estabilizador, concentración inicial, pH, tiempoy relación de baño sobre el resultado del blanqueo, comoasi tambión el rendimiento. Los resultados obtenidos se resumen a continuación. Influencia de las variables. Estabilizador: De las sustancias probadas el silicato de sodio en agua dura a pH 12 ha dado el mejor resultado. Le siguen en orden decreciente el ortofosfato y tripolifosfato sódicos, el bórax y el acetato de sodio. Concentración inicial: Su influencia sobre el grado de blanco obtenido es muy marcado, especialmente a concentraciones bajas. pH: Sólo en medio neutro alcalina se han obtenido resultados aceptables en condiciones económicas. Relación de baño: Se observó un valor mínimo, próximo a 1, encima del cual la variación de la relación de baño no afecta el resultado del blanqueo. Tiempos El blanco aumenta con el tiempo, hasta que entre los 60 y 90 minutos alcanza su valor máximo. El rendimiento del peróxido de hidrógeno se ha determinado por dos caminos distintos. Por el primero de ellos se ha medido gasomótricamente la cantidad de agua oxigenada descompuesta durante el blanqueo. Teniendo en cuenta las cantidades inicial y finalmente presentes puede determinarse por diferencia cuanto peróxido de hidrógeno se ha consumidoen el blanqueo en si como oxidante. El segundo método empleado se basa en el hecho de que independientemente de la relación de baño, manteniendo las demás variables constantes, se consume como oxidante siempre la misma cantidad de peróxido de hidrógeno para un grado de blanco dado; la descomposición, en cambio, aumenta linealmente con la cantidad de solución presente. Extrapolando a relación de baño cero se eliminó le influencia de la descomposición sobre el consumo neto y pudo hallarse en consecuencia le cantidad de agua oxigenada que intervino en el blanqueo propiamente dicho. Concordantemente ambos métodos señalan un consumo minimo de 0,051 a 0.085% de peróxido de hidrógeno 100% para blanquear un tejido del tipo estudiado a un grado de blanco igual o mayor que 9,5. El rendimiento de1_proceso industrial, sistema continuo "Du Pont" en el mejor de los casos fué del 21%. En los ensayos de laboratorio se observaron rendimientos mayores; fosfato e pH 8, 22%;fosfato a pH 10, 21%; silicato a ph 10, 33%; silicato a pH 12, 45%. Como su relativamente bajo rendimiento lo indice, el consumo de peróxido de hidrógeno es potencialmente susceptible de ser reducido. Esta reducción sólo es posible a través de una disminución de la concentración inicial y/o de la relación de baño, ya que la cantidad de peróxido de hidrógeno consumido en el blanqueo en si es constante. La concentración inicial puede reducirse si la descomposición no compite durante el proceso con la reacción de oxidación. Hasta el presente no se conoce un estabilizador suficientemente eficas para ello. En el estado actual se trabaja con la relación de baño minima o muy próximo a ella, por lo que, de no mediar nuevos recursos, no cabe esperar una reducción del consumo en este sentido.

En esta tesis se investigaron algunas características de las células stem de cáncer de mama humano, para lo cual se utilizaron diversos sistemas de estudio: a) cortes histológicos de tumores. b) biopsias frescas de tumores. c) líneas celulares tumorales. Sobre cortes histológicos de tumores de mama humanos se investigó la relación entre la síntesis de ADN y la expresión de un antígeno de diferenciación (antígeno carcinoembrionario, CEA), observándose que el índice de marcación con timidina (TLI), resultó inversamente proporcional a la presencia de CEA y al grado de diferenciación del tumor. Aún en los tumores CEA-positivos, la mayoría de las células que estaban sintetizando ADN fueron CEA-negativas. Utilizando células obtenidas por disgregación enzimática de tumores de mama y mediante un sistema de centrifugación en gradientes de densidad, se logró separar subpoblaciones celulares en las que se analizó la capacidad clonogénica como indicativa de célula stem. En base a los resultados obtenidos con los tumores y teniendo en cuenta distintas características de los mismos (grado de diferenciación, tamaño, etc.), se seleccionó uno de ellos para establecer una línea celular a la que se denominó IIB-BR-G. Con la inyección subcutánea de células de dicha línea en ratones atímicos, se logró también establecer una línea in vivo (IIB-BR-Gnude). La línea in vitro presentó características de indiferenciación y agresividad, además de ser negativa su expresión de receptores hormonales, lo que resultó particularmente interesante, teniendo en cuenta que no es demasiada la información disponible sobre los mecanismos que gobiernan el crecimiento de las líneas celulares que no expresan receptores hormonales. Por lo tanto, se estudió su perfil antigénico, la expresión de diversos oncogenes asociados con carcinomas mamarios, la citogenética de la misma y su morfología ultramicroscópica. Además, ambas líneas fueron utilizadas para diversos proyectos del laboratorio a saber: 1) ensayo de drogas que inhiben proliferación celular; 2) radioinmunolocalización de tumores IIB-BR-Gnude mediante la utilización de AcM; 3) obtención de nuevos AcM utilizando como inmunógeno células enteras de IIB-BR-G; 4) establecimiento de metástasis experimentales mediante la inyección de células IIB-BR-G en el bazo de ratones atímicos.

El establecimiento de un sistema silvopastoril (SSP)en plantaciones de álamo (Populus deltoides `Australiano 106/60´)requiere de nuevas estrategias de manejo. En este contexto, la combinación del tipo de material de multiplicación utilizado y su palatabilidad pueden resultar determinantes del éxito de la instalación del sistema. El objetivo general del estudio fue generar una nueva tecnología para la instalación de un SSP con álamos orientado a la producción de madera para múltiples destinos. El primer objetivo consistió en evaluar los cambios que se producen en diferentes distancias de plantación sobre la dimensión y características morfológicas de las guías de álamo, materiales de multiplicación potencialmente aptos para instalar un SSP, y el segundo, determinar el efecto del tamaño y/o edad de las guías sobre el crecimiento del componente arbóreo y la sensibilidad al daño de las mismas frente al pastoreo de ganado bovino en un SSP de álamo. Los resultados indican que los mayores distanciamientos ensayados produjeron las mejores guías de uno, dos y tres años de edad, con mayor DAP, altura total, biomasa aérea, rectitud, conicidad y estabilidad del fuste. Se determinó además que es posible acelerar el ingreso del ganado de cría al SSP utilizando guías con un DAP igual ó mayor a los 6 cm, con una respuesta positiva durante los primeros años de plantación. Las hojas y ramitas tiernas de álamo, productos de una poda de primavera, constituyeron por su buena disponibilidad de PB, P y K y su DE un buen complemento de la dieta animal. Se concluye finalmente que, utilizando guías de álamo como material de multiplicación, es posible producir anticipadamente madera de álamo para usos múltiples, pasturas naturales espontáneas y carne vacuna en los SSP del bajo Delta del Río Paraná.

Las células pluripotentes humanas pueden ser de origen embrionario, (CMEH), o inducidas (CMPih). Sus características más atrayentes residen en su inagotable potencial proliferativo y su pluripotencia o capacidad de diferenciarse a tejidos pertenecientes a las tres capas germinales. Las CMEH están constituidas por una población de células derivadas del macizo celular interno del blastocisto de mamíferos. Las CMPih son células somáticas que han sido reprogramadas mediante la expresión ectópica de factores de transcripción fundamentales para el mantenimiento del estado indiferenciado (por ejemplo: Oct3/4; Sox2 con Klf4 y c-Myc o Nanog y Lin28) (KazutoshiTakahashi et al, 2007). Las CMPih una vez reprogramadas adquieren características de auto-renovación y capacidad de diferenciarse dando origen a células de las tres capas germinales. La capacidad de estas células pluripotentes para recapitular sistemas celulares humanos experimentalmente in vitro es alta y constituye una herramienta muy valiosa para el estudio tanto de los mecanismos moleculares que subyacen el desarrollo humano como de enfermedades neurodegenerativas o cardíacas entre otras. La proteína Alfasinucleina (αSin) es una proteína pequeña de 14 KDa altamente desorganizada de localización ubicua en el citosol y en las terminales sinápticas de las neuronas. En condiciones normales es soluble, pero en concentraciones elevadas, frente a cambios en el pH, ocambios en los niveles intracelulares de Ca2+se agrega produciendo neurofilamentos conocidoscomo cuerpos de Lewy. Dichos agregados se han observado en formas esporádicas y hereditarias de la Enfermedad de Parkinson (EP), así como en la demencia de Lewy. En el presente trabajo se utilizaron células pluripotentes diferenciadas a neuronas como plataforma para el modelaje de la sobre-expresión de αSin wt y 2 mutantes asociados a la EP Familiar. El análisis del impacto de este tratamiento sobre los cultivos celulares utilizados se centró en la evaluación de la homeostasis mitocondrial en un contexto de sobreexpresión en contraste con el control no tratado. El enfoque sobre la mitocondria se debe a que existen múltiples genes asociados con la EP que convergen en el mantenimiento de la homeostasis de dicha organela como un factor etiológico crucial en la iniciación y el desarrollo temprano de la enfermedad. Los parámetros analizados fueron morfología, estado redox, transporte y biodinámica mitocondrial. Se logró utilizar exitosamente células pluripotentes humanas diferenciadas como modelo neuronal humano, proveyendo evidencia novedosa del impacto de la sobreexpresión de αSin sobre la homeostasis mitocondrial neural. Estos efectos están asociados, por un lado, a las mutaciones presentes en las variantes estudiadas, así como a los niveles de expresión y localización de la proteína respecto a la mitocondria. Asimismo, hemos probado que la fisión mitocondrial dependiente de αSin requiere de una interacción directa entre la proteína y/o agregados de la misma con la membrana externa mitocondrial. Determinamos además que la interacción de αSin con membranas mitocondriales depende en gran parte de su secuencia N-terminal, ya que la disrupción de dicho dominio en el gen de αSin endógeno por edición génica CRISPR-Cas9 indujo cambios en la morfología y biodinámica mitocondrial en las neuronas derivadas a partir de la línea celular editada, lo que soporta un rol fisiológico de la proteína dependiente de su dominio N-terminal. El rol fisiológico y patológico de αSin en la homeostasis mitocondrial axonal evidenciado, aporta al objetivo de un camino etiológico común subyacente a la patología de la EP, que en última instancia es fundamental para el entendimiento de las enfermedades neurodegenerativas y es una herramienta muy útil para el diseño de estrategias terapéuticas y/o preventivas para el tratamiento de las mismas.

Antecedentes: la síntesis cuantitativa consiste en integrar los resultados de un conjunto de experimentos, previamente identificados, en una medida resumen. Al realizar este tipo de síntesis, se busca hallar un resultado que sea resumen representativo de los resultados de los estudios individuales, y por tanto que signifique una mejora sobre las estimaciones individuales. Este tipo de procedimientos recibe el nombre de Agregación o Meta-Análisis. Existen dos estrategias a la hora de agregar un conjunto de experimentos, la primera parte del supuesto de que las diferencias en los resultados de un experimento a otro obedecen a un error aleatorio propio de la experimentación y de que existe un único resultado o tamaño de efecto que es compartido por toda la población, la segunda estrategia parte del supuesto de que no existe un único tamaño de efecto representativo de toda la población, sino que dependiendo del origen o momento en que se realicen los experimentos los resultados van a modificarse debido a la influencia de variables no controladas, a pesar de esto puede obtenerse un promedio de los distintos resultados para una conclusión general. A la primera de las estrategias se la denominada modelo de efecto fijo y a la segunda se la denominada modelo de efectos aleatorios. Los autores que han comenzado a trabajar en Meta-Análisis, no muestran una línea de trabajo unificada. Este hecho hace que sea necesaria la unificación de criterios para la realización de este tipo de trabajos. Objetivo: establecer un conjunto de recomendaciones o guías que permitan, a los investigadores en Ingeniería del Software, determinar bajo qué condiciones es conveniente desarrollar un Meta-Análisis mediante modelo de efecto fijo y cuando es conveniente utilizar el modelo de efectos aleatorios. Métodos: la estrategia sería la de obtener los resultados de experimentos de características similares mediante el método de Monte Carlo. Todos ellos contarían con un número de sujetos bajo, ya que esa es la característica principal en el campo de la Ingeniería de Software y que genera la necesidad de tener que agregar el resultado de varios experimentos. Luego se agrega el resultado de estos experimentos con el método de Diferencia de Medias Ponderadas aplicada primero con el modelo de efecto fijo, y posteriormente con el modelo de efectos aleatorios. Con las combinaciones realizadas, se analiza y compara la fiabilidad y potencia estadística de ambos modelos de efectos.

"El objetivo del trabajo es desarrollar el plan de negocio de un Tambo Orgánico, con tres tipos de objetivos de igual importancia: generar beneficios para la sociedad, tener procesos amigables con el medio ambiente disminuyendo el impacto del negocio en el ecosistema y finalmente rentabilidad para los accionistas (Triple Bottom Line). Además de las certificaciones orgánicas de los recursos y los procesos se busca la certificación del Sistema B o B-Corp."

Los gliomas de alto grado son los tumores cerebrales primarios más frecuentes y son altamente agresivos e invasivos. Éstos parecen exhibir una organización jerárquica y se ha postulado que su generación ocurre a partir de células madre tumorales (CMT), las cuales corresponderían a una subpoblación minoritaria capaz de generar y propagar tumores al ser inyectadas en ratones inmunodeficientes. De esta forma, el aislamiento y la caracterización de células tumorales derivadas de pacientes con fenotipo de células madre o progenitoras permite contar con un valioso modelo de estudio para comprender en mayor profundidad la biología de los gliomas. En el presente trabajo logramos establecer con éxito nueve líneas de células madre/progenitoras tumorales (CMPT) a partir de biopsias de gliomas de alto grado. Éstas fueron capaces de generar tumores luego de ser inyectadas en el sistema nervioso central en ratones inmunodeficientes y presentaron las mismas alteraciones genéticas que se encontraron en los tumores parentales. Además, todas ellas fueron positivas para los marcadores de CMT: Nestina, Vimentina, CD44 y Sox2. Sin embargo, el grado de expresión de CD133 resultó ser variable en todas las líneas analizadas. A pesar de las similitudes entre las CMPT y las células madre neurales, es concebible pensar que pueden existir diferencias en sus respectivos potenciales de diferenciación. Para responder este interrogante hemos sometido a estas líneas celulares a diversos protocolos de diferenciación basados principalmente en el agregado de BMP4 recombinante humano y en la deprivación de factores de crecimiento. Luego de analizar la expresión de distintos marcadores de diferenciación y de evaluar cambios en la morfología celular, determinamos que estas líneas de CMPT poseen un grado variable de multipotencia, en donde cada una de ellas presenta un grado de compromiso particular hacia los linajes astroglial y neuronal. Además, pudimos observar que la adición de BMP4 recombinante redujo marcadamente la tasa de proliferación de todas las líneas celulares estudiadas. Por último, hemos determinado los niveles de expresión del ARNm de distintos ligandos y receptores involucrados en la señalización dependiente de BMPs en seis líneas de CMPT, encontrando en ellas ciertos patrones de expresión característicos. Dado que las CMT probablemente dependan de determinadas señales del microambiente tumoral para mantener su identidad, un tratamiento efectivo podría basarse en el bloqueo de mediadores generados en el nicho perivascular. Por este motivo y dado el gran potencial de este modelo experimental para el testeo de drogas, decidimos estudiar los niveles de expresión de los ARNm de los componentes del eje endotelinérgico en diferentes líneas de CMPT. Pudimos observar que todas las líneas celulares analizadas mostraron una expresión elevada de los transcriptos del receptor ETRB, mientras que el grado de expresión de los componentes restantes del sistema fue dependiente de cada línea celular. Más aún, en dos de cuatro líneas analizadas, el agregado de endotelinas recombinantes produjo una disminución significativa de los niveles de apoptosis generados en condiciones de deprivación de factores de crecimiento y nutrientes. Dada la variabilidad observada en las respuestas celulares a diferentes tratamientos en las distintas líneas de CMPT, este trabajo pone de menifiesto la relevancia de contar con un modelo in vitro basado en cultivos derivados de gliomas que permita contribuir al desarrollo de terapias personalizadas.