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La Angiotensina II (Ang II) es la molécula efectora del sistema renina- angiotenesina, y se ha visto implicada en varios procesos fisiológicos y fisiopatológicos. Su efecto vasoconstrictor es el más conocido; sin embargo, en los últimos años ha adquirido importancia la modulación que la Ang II ejerce sobre el acoplamiento éxcito-contráctil y la contractilidad en el músculo cardíaco. El conocimiento de los mecanismos de acción de la Ang II sobre el miocardio en condiciones fisiológicas, favorecerá la interpretación de la fisiopatologia de aquellas enfermedades que la involucren. Para una mejor comprensión de los mecanismos subcelulares por medio de los cuales la Ang II modula la contractilidad cardíaca resulta fundamental hacer una revisión de los eventos que participan en el acoplamiento éxcito-contráctil en el miocardio y de su regulación.

La presencia de todos los componentes del sistema renina-angiotensina (RAS) en la adenohipófisis ha sugerido que el componente activo de este sistema, el octapéptido Angiotensina II (AngII), actuaría en dicha glándula como un factor autócrino o parácrino. Aún cuando se ha demostrado que AngII libera prolactina (PRL) y adrenocorticotrofina (ACTH) tanto in vivo como in vitro a través de sus receptores de tipo l (ATl), sc ignora todavía la relevancia fisiológica dc estos efectos. El objetivo de esta Tesis fue estudiar la participación del octapéptido cn la función hipofisaria normal y cómo la misma puede alterarse por procesos patológicos característicos dc la glándula. Con tal motivo, los ensayos se realizaron en adenohipófisis de ratas hembra adultas normales y en dos modelos experimentales de adenomas hipofisarios prolactinosecretantes (prolactinomas). Dado que AngII es un secretagogo de PRL utilizamos como parametros de estudio diferentes aspectos del proceso prolactinoliberador de AngII, incluyendo su mecanismo de transducción de señales (especialmente la señalización de Ca2+i y los subtipos receptores del octapéptido involucrados en el mismo. En una primera caracterización de los efectos de AngII en adenohipófisis de rata normal (grupo control, CON), demostramos que la producción de inositol trifosfato (IP3), la movilización de Ca2+i y la liberación de PRL inducidas por AngII sufren una rápida y prolongada desensibilización homóloga y heteróloga. Asimismo, puesto que el Ca2+i es un factor esencial para la secreción hormonal y la proliferación y diferenciación celular, ampliamos nuestro estudio del mecanismo de señalización intracelular del Ca2+i en la hipófisis normal y lo comparamos en detalle con los modelos experimentales mencionados. En experimentos de cultivo primario de células adenohipofisarias y ensayos de señalización de [Ca2+]i observamos que AngII libera PRL a concentraciones fisiológicas en la hipófisis normal (grupo CON) a través de una respuesta de [Ca2+]i bifásica, la cual se compone de una espiga inicial dependiente de la movilización del contenido de Ca2+ de reservorios intracelulares sensibles a tapsigargina e IP3 y una fase posterior de meseta dependiente del influjo de Ca2+e. En contraste, el efecto prolactinoliberador del octapéptido se encuentra significativamente disminuido en células adenohipofisarias provenientes de prolactinomas inducidos mediante el tratamiento crónico in vivo con dietilstilbestrol (grupo DES). Además de la disminución del número de receptores hipofisarios AT1 ya descripta en este modelo experimental, la atenuación del efecto prolactinoliberador del octapéptido en estas células se encontró asociada con una profunda alteración de su patrón de señalización de [Ca2+]i, que se caracterizó por la ausencia completa de la fase inicial de espiga de [Ca2+]i y la presencia de una señal monofásica de tipo meseta enteramente dependiente del influjo de Ca2+e y mediada parcialmente por canales de calcio dependientes del voltaje tipo L (VDCC). A pesar de estas modificaciones, las respuestas fueron mediadas por el mismo subtipo receptor (AT1) en ambos grupos experimentales. En otros ensayos, demostramos la especificidad de la alteración de la señal de Ca2+i en respuesta al estímulo de AngII, cuyo patrón característico fue reproducido en prolactinomas de ratones con deficiencia funcional del receptor dopaminérgico D2. Por otra parte, dado que se ha descripto que el octapéptido actúa como factor angiogénico y mitogénico en varios tejidos, evaluamos la capacidad de AngII para inducir la proliferación y la activación de p44/p42 en células adenohipofisarias normales e hiperplásicas. Experimentos de incorporación de 3 [3H]-timidina indicaron que el octapéptido no promueve la proliferación celular en células adenohipofisarias tanto normales (grupo CON) como hiperplásicas (grupo DES), a pesar de que dicho agonista estimula significativamente la actividad de p44/p42 en ambos grupos. El tratamiento in vivo de las ratas estrogenizadas con el agonista dopaminérgico D2, bromocriptina (DES+Bro), retornó parcialmente la prolactinemia a niveles normales e indujo una marcada regresión de los prolactinomas, si bien no fue evidente una recuperación del contenido hipofisario de PRL. La recuperación parcial de los parámetros in vivo se correlacionó con una restauración paralela de la secreción de PRL y la espiga de Ca2+i inducidas in vitro por AngII en células hipofisarias de este grupo. Inesperadamente, el tratamiento in vivo de la hiperplasia hipofisaria con progesterona (grupo DES+P4) potenció el efecto prolactinoliberador del octapéptido a través de un mecanismo sinérgico entre los receptores AT1 y AT2, a pesar de que dicho progestágeno no revirtió ni la hiperprolactinemia ni el tamaño de los tumores. Resultados de Western Blot indicaron por primera vez la presencia de los receptores AT2 en la adenohipófisis, cuya expresión se encontró marcadamente aumentada en los grupos hiperplásicos (DES y DES+P4). Por otra parte, cuando la hiperplasia fue revertida con el tratamiento in vivo con bromocriptina (DES+Bro), la expresión del receptor AT2 disminuyó hasta recuperar el nivel expresado en el grupo control. Ninguno de los cotratamientos empleados (bromocriptina o P4) indujo cambios en la baja expresión de los receptores AT1 característica del grupo DES. En conclusión, los presentes estudios en modelos animales de prolactinoma indicarían la existencia de una compleja interrelación entre el RAS hipofisario, el sistema dopaminérgico, y los esteroides ováricos en la función hipofisaria. Modificaciones en esta delicada red de interacciones, podrían explicar la alteración del comportamiento hipofisario frente a ciertos secretagogos como AngII. Los resultados obtenidos son compatibles con la hipótesis de una activación del RAS hipofisario durante el proceso de hiperplasia y podrían ser de potencial interés en diversas áreas de la farmacoterapia como el tratamiento de prolactinomas resistentes o no a agonistas D2, el tratamiento hormonal de reemplazo en la postmenopausia y el tratamiento de enfermedades cardiovasculares como la insuficiencia cardíaca y la hipertensión.